摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略语 | 第7-12页 |
第1章 引言 | 第12-20页 |
1.1 叶酸 | 第12页 |
1.2 叶酸生物学功能及检测重要性 | 第12-13页 |
1.3 免疫学分析技术 | 第13-17页 |
1.3.1 放射免疫技术 | 第13-14页 |
1.3.2 免疫荧光技术 | 第14页 |
1.3.3 化学发光免疫技术 | 第14-15页 |
1.3.4 酶免疫分析技术 | 第15-17页 |
1.4 常见叶酸检测方法 | 第17-18页 |
1.4.1 比色法 | 第17页 |
1.4.2 薄层层析法 | 第17页 |
1.4.3 高效液相色谱法 | 第17页 |
1.4.4 微生物法 | 第17-18页 |
1.4.5 叶酸免疫分析法 | 第18页 |
1.5 研究目的与意义 | 第18-20页 |
第2章 叶酸免疫原的合成与鉴定 | 第20-39页 |
2.1 实验仪器及材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验仪器 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 主要溶液 | 第21-22页 |
2.1.4 实验动物 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 FA-BSA免疫原制备 | 第22-23页 |
2.2.2 FA-OVA的制备 | 第23页 |
2.2.3 FA-BSA-ACA的制备 | 第23页 |
2.2.4 叶酸免疫原鉴定 | 第23-27页 |
2.3 实验结果 | 第27-35页 |
2.3.1 FA免疫原浓度测定结果 | 第27-28页 |
2.3.2 FA免疫原紫外扫描及偶联比 | 第28-31页 |
2.3.3 免疫原性鉴定 | 第31-35页 |
2.4 讨论 | 第35-38页 |
2.4.1 人工抗原合成 | 第35-37页 |
2.4.2 FA-BSA和FA-BSA-ACA免疫效果对比 | 第37-38页 |
2.5 小结 | 第38-39页 |
第3章 FA单克隆抗体和多克隆抗体制备 | 第39-52页 |
3.1 实验仪器及材料 | 第39-41页 |
3.1.1 主要实验仪器 | 第39页 |
3.1.2 主要试剂耗材 | 第39-40页 |
3.1.3 主要溶液 | 第40-41页 |
3.1.4 实验动物和细胞 | 第41页 |
3.2 实验方法 | 第41-46页 |
3.2.1 FA杂交瘤细胞制备 | 第41-43页 |
3.2.2 FA多克隆抗体制备 | 第43-46页 |
3.3 实验结果 | 第46-49页 |
3.3.1 FA杂交瘤细胞株建立 | 第46-47页 |
3.3.2 杂交瘤细胞筛选 | 第47-48页 |
3.3.3 FA多抗检测结果 | 第48-49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
3.4.1 单克隆抗体制备 | 第49-50页 |
3.4.2 单、多克隆抗体选择 | 第50页 |
3.4.3 不同种类多抗选择 | 第50页 |
3.5 小结 | 第50-52页 |
第4章 FA间接竞争ELISA方法建立与评价 | 第52-67页 |
4.1 主要仪器和试剂 | 第52页 |
4.2 主要溶液 | 第52-53页 |
4.3 实验方法 | 第53-57页 |
4.3.1 兔血清多抗最适工作条件 | 第54页 |
4.3.2 兔血清多抗ELISA竞争曲线建立 | 第54页 |
4.3.3 兔血清多抗纯化 | 第54-55页 |
4.3.4 纯化多抗浓度测定 | 第55页 |
4.3.5 抗原抗体工作浓度确定 | 第55页 |
4.3.6 间接法标准曲线建立 | 第55-56页 |
4.3.7 FA间接竞争ELISA检测方法评价 | 第56-57页 |
4.4 实验结果 | 第57-64页 |
4.4.1 兔血清多抗最适工作条件 | 第57页 |
4.4.2 兔血清多抗ELISA竞争曲线 | 第57-59页 |
4.4.3 多抗纯化 | 第59-60页 |
4.4.4 抗原抗体最佳工作浓度 | 第60-61页 |
4.4.5 间接法检测标准曲线建立 | 第61-63页 |
4.4.6 检测方法评价 | 第63-64页 |
4.5 讨论 | 第64-66页 |
4.5.1 抗体的纯化 | 第64-65页 |
4.5.2 FA间接竞争ELISA检测方法建立 | 第65页 |
4.5.3 FA间接竞争ELISA检测方法评价 | 第65-66页 |
4.6 小结 | 第66-67页 |
总结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |