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两种侧耳高温胁迫导致的细胞凋亡研究和球孢白僵菌胁迫响应转录机制的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第17-29页
    1.1 细胞凋亡概述第17页
    1.2 丝状真菌细胞凋亡的研究方法第17-19页
        1.2.1 细胞核浓缩的检测第18页
        1.2.2 活性氧积累的检测第18页
        1.2.3 DNA断裂的检测第18-19页
    1.3 丝状真菌细胞凋亡的研究进展第19-20页
        1.3.1 化合物诱导对丝状真菌细胞凋亡的研究进展第19-20页
        1.3.2 环境胁迫对丝状真菌细胞凋亡的研究进展第20页
    1.4 高温胁迫下食用菌的研究进展第20-21页
    1.5 转录因子概述第21-22页
    1.6 转录因子的研究方法第22-26页
        1.6.1 凝胶迁移实验第22-23页
        1.6.2 DNase I足迹法第23-24页
        1.6.3 染色质免疫沉淀第24-25页
        1.6.4 电化学阻抗谱第25-26页
    1.7 球孢白僵菌转录因子研究进展第26-28页
        1.7.1 转录因子MSN2研究进展第26页
        1.7.2 转录辅因子MBF1研究进展第26-27页
        1.7.3 通用转录因子TBP研究进展第27-28页
    1.8 本研究的内容、目的和意义第28-29页
第二章 两种侧耳高温胁迫导致的细胞凋亡研究第29-37页
    2.1 试验材料第29页
        2.1.1 试验菌株及培养基第29页
        2.1.2 试验试剂第29页
    2.2 试验仪器第29-30页
    2.3 试验方法第30-33页
        2.3.1 菌丝培养第30页
        2.3.2 高温胁迫处理第30页
        2.3.3 细胞核浓缩检测第30-31页
        2.3.4 活性氧积累检测第31页
        2.3.5 DNA片段化检测第31-32页
        2.3.6 外源添加剂对真菌细胞凋亡的影响第32页
        2.3.7 统计分析第32-33页
    2.4 结果与分析第33-36页
        2.4.1 高温胁迫下细胞核的变化第33-34页
        2.4.2 高温胁迫下活性氧的变化第34-35页
        2.4.3 高温胁迫下DNA片段化的变化第35-36页
    2.5 讨论第36-37页
第三章 球孢白僵菌转录因子Bb MSN2与靶基因启动子相互作用的研究第37-69页
    3.1 试验材料第37-38页
        3.1.1 试验菌株及培养基第37页
        3.1.2 试验载体第37页
        3.1.3 试验试剂第37-38页
    3.2 试验仪器第38页
    3.3 试验方法第38-52页
        3.3.1 真菌培养第38-39页
        3.3.2 Bb MSN2表达载体的构建第39-44页
        3.3.3 Bb MSN2蛋白的外源表达和纯化第44-47页
        3.3.4 靶基因启动子的扩增和特异探针的合成第47-49页
        3.3.5 凝胶迁移实验第49-52页
        3.3.6 数据分析第52页
    3.4 结果与分析第52-67页
        3.4.1 p ET28GST-Bb MSN2表达载体的构建第52-53页
        3.4.2 Bb MSN2蛋白的生物信息学分析第53页
        3.4.3 Bb MSN2蛋白的外源表达和纯化第53-55页
        3.4.4 Bb MSN2蛋白结合位点的分析第55页
        3.4.5 靶基因启动子序列分析第55-56页
        3.4.6 Bb MSN2蛋白与核酸的相互作用第56-67页
    3.5 讨论第67-69页
第四章 球孢白僵菌Bb TBP与TATA-box及Bb MBF1相互作用的研究第69-88页
    4.1 试验材料第69页
        4.1.1 试验菌株及培养基第69页
        4.1.2 试验载体第69页
        4.1.3 试验试剂第69页
    4.2 试验仪器第69页
    4.3 试验方法第69-72页
        4.3.1 真菌培养第69页
        4.3.2 Bb TBP和Bb MBF1表达载体的构建第69-70页
        4.3.3 Bb TBP和Bb MBF1蛋白的外源表达和纯化第70-71页
        4.3.4 TATA-box序列的分析和合成第71-72页
        4.3.5 凝胶迁移实验第72页
        4.3.6 电化学阻抗谱分析第72页
    4.4 结果与分析第72-86页
        4.4.1 p ET 28a-Bb TBP和p ET 28a-Bb MBF1表达载体的构建第72-73页
        4.4.2 Bb TBP和Bb MBF1蛋白的生物信息学分析第73-74页
        4.4.3 Bb TBP和Bb MBF1蛋白的表达及纯化第74-76页
        4.4.4 Bb TBP结合位点的序列分析第76页
        4.4.5 Bb TBP与TATA box探针的相互作用第76-81页
        4.4.6 Bb TBP与Bb MBF1蛋白间的相互作用第81-86页
    4.5 讨论第86-88页
第五章 结论第88-91页
    5.1 本研究的主要结论第88-89页
    5.2 创新点第89页
    5.3 有待进一步研究的问题第89-91页
参考文献第91-104页
致谢第104-105页
作者简历第105页

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