摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
英文缩略词一览表 | 第12-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-27页 |
1.1 精原干细胞的起源 | 第13页 |
1.2 SSCs的自我更新 | 第13-14页 |
1.3 SSCs的微环境(Niche)与归巢 | 第14-15页 |
1.4 SSCs的获得 | 第15-17页 |
1.4.1 SSCs的分离 | 第16页 |
1.4.2 SSCs的纯化 | 第16-17页 |
1.5 影响SSCs体外培养的因素 | 第17-20页 |
1.5.1 年龄 | 第17-18页 |
1.5.2 血清浓度 | 第18页 |
1.5.3 维生素C | 第18页 |
1.5.4 生长因子 | 第18-20页 |
1.6 SSCs的体外培养体系 | 第20-21页 |
1.7 SSCs的鉴定 | 第21页 |
1.8 SSCs的移植 | 第21-22页 |
1.9 SSCs介导法转基因技术 | 第22-23页 |
1.10 CD320基因的研究进展 | 第23页 |
1.11 RanBP9的研究进展 | 第23-27页 |
1.11.1 RanBP9的结构 | 第23-24页 |
1.11.2 RanBP9的表达与作用 | 第24-27页 |
第2章 引言 | 第27-29页 |
第3章 山羊SSCs的分离、纯化及鉴定 | 第29-39页 |
3.1 材料 | 第29-31页 |
3.1.1 组织样品 | 第29页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第29-30页 |
3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第31页 |
3.2 方法 | 第31-34页 |
3.2.1 睾丸单细胞悬液的制备 | 第31页 |
3.2.2 SSCs的纯化 | 第31-32页 |
3.2.3 山羊SSCs的鉴定 | 第32-33页 |
3.2.4 统计分析 | 第33-34页 |
3.3 结果 | 第34-38页 |
3.3.1 山羊SSCs的培养 | 第34页 |
3.3.2 碱性磷酸酶染色鉴定 | 第34-35页 |
3.3.3 免疫细胞化学染色 | 第35-36页 |
3.3.4 RT-PCR | 第36-38页 |
3.4 讨论 | 第38-39页 |
第4章 CD320在山羊精原干细胞中的表达研究 | 第39-51页 |
4.1 实验试剂 | 第39页 |
4.2 方法 | 第39-42页 |
4.2.1 引物设计 | 第39页 |
4.2.2 RNA提取 | 第39-40页 |
4.2.3 RT-PCR检测CD320在SSCs中的表达 | 第40页 |
4.2.4 亚细胞定位预测(PSORT II) | 第40页 |
4.2.5 CD320载体构建 | 第40页 |
4.2.6 重组质粒的扩大培养 | 第40-41页 |
4.2.7 重组质粒的提取 | 第41页 |
4.2.8 重组质粒的酶切鉴定 | 第41-42页 |
4.2.9 重组质粒pEGFP-N1-CD320转染 293T细胞 | 第42页 |
4.2.10 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染山羊SSCs | 第42页 |
4.2.11 RT-PCR检测山羊SSCs中CD320的表达水平 | 第42页 |
4.3 结果 | 第42-48页 |
4.3.1 RNA提取 | 第42-43页 |
4.3.2 CD320在山羊SSCs中的表达 | 第43-44页 |
4.3.3 亚细胞定位预测(PSORT II) | 第44页 |
4.3.4 CD320表达载体的构建 | 第44-45页 |
4.3.5 重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
4.3.6 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染 293T细胞 | 第46页 |
4.3.7 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染山羊SSCs | 第46-47页 |
4.3.8 转染后山羊SSCs中CD320的表达情况 | 第47-48页 |
4.4 讨论 | 第48-51页 |
第5章 RanBP9在山羊精原干细胞中的表达研究 | 第51-63页 |
5.1 实验试剂 | 第51页 |
5.2 方法 | 第51-54页 |
5.2.1 引物设计 | 第51-52页 |
5.2.2 RNA提取 | 第52页 |
5.2.3 RT-PCR检测RanBP9在SSCs中的表达 | 第52页 |
5.2.4 亚细胞定位预测(PSORT II) | 第52页 |
5.2.5 RanBP9载体构建 | 第52页 |
5.2.6 重组质粒的扩大培养 | 第52页 |
5.2.7 重组质粒的提取 | 第52页 |
5.2.8 重组质粒的酶切鉴定 | 第52-53页 |
5.2.9 重组质粒pEGFP-N1- RanBP9转染 293T细胞 | 第53页 |
5.2.10 重组质粒pEGFP-Nl- RanBP9转染山羊SSCs | 第53页 |
5.2.11 CCK-8 检测山羊SSCs的增殖 | 第53页 |
5.2.12 RT-PCR检测山羊SSCs中RanBP9的表达水平 | 第53-54页 |
5.3 结果 | 第54-60页 |
5.3.1 RanBP9在山羊SSCs中的表达 | 第54页 |
5.3.2 亚细胞定位预测(PSORT II) | 第54-55页 |
5.3.3 RanBP9载体的构建 | 第55页 |
5.3.4 重组质粒的酶切鉴定 | 第55-56页 |
5.3.5 重组质粒pEGFP-Nl- RanBP9在 293T细胞中的定位 | 第56-57页 |
5.3.6 重组质粒pEGFP-Nl-RanBP9转染山羊SSCs | 第57页 |
5.3.7 转染重组质粒后山羊SSCs中RanBP9的表达水平 | 第57-58页 |
5.3.8 重组质粒转染后山羊SSCs的发育 | 第58-59页 |
5.3.9 CCK-8 检测转染RanBP9后细胞增殖情况 | 第59-60页 |
5.4 讨论 | 第60-63页 |
第6章 结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
附录 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
在学期间发表的文章 | 第81页 |