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CD320和RanBP9在山羊精原干细胞中的表达研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
英文缩略词一览表第12-13页
第1章 文献综述第13-27页
    1.1 精原干细胞的起源第13页
    1.2 SSCs的自我更新第13-14页
    1.3 SSCs的微环境(Niche)与归巢第14-15页
    1.4 SSCs的获得第15-17页
        1.4.1 SSCs的分离第16页
        1.4.2 SSCs的纯化第16-17页
    1.5 影响SSCs体外培养的因素第17-20页
        1.5.1 年龄第17-18页
        1.5.2 血清浓度第18页
        1.5.3 维生素C第18页
        1.5.4 生长因子第18-20页
    1.6 SSCs的体外培养体系第20-21页
    1.7 SSCs的鉴定第21页
    1.8 SSCs的移植第21-22页
    1.9 SSCs介导法转基因技术第22-23页
    1.10 CD320基因的研究进展第23页
    1.11 RanBP9的研究进展第23-27页
        1.11.1 RanBP9的结构第23-24页
        1.11.2 RanBP9的表达与作用第24-27页
第2章 引言第27-29页
第3章 山羊SSCs的分离、纯化及鉴定第29-39页
    3.1 材料第29-31页
        3.1.1 组织样品第29页
        3.1.2 主要仪器设备第29-30页
        3.1.3 主要试剂第30-31页
        3.1.4 主要试剂的配制第31页
    3.2 方法第31-34页
        3.2.1 睾丸单细胞悬液的制备第31页
        3.2.2 SSCs的纯化第31-32页
        3.2.3 山羊SSCs的鉴定第32-33页
        3.2.4 统计分析第33-34页
    3.3 结果第34-38页
        3.3.1 山羊SSCs的培养第34页
        3.3.2 碱性磷酸酶染色鉴定第34-35页
        3.3.3 免疫细胞化学染色第35-36页
        3.3.4 RT-PCR第36-38页
    3.4 讨论第38-39页
第4章 CD320在山羊精原干细胞中的表达研究第39-51页
    4.1 实验试剂第39页
    4.2 方法第39-42页
        4.2.1 引物设计第39页
        4.2.2 RNA提取第39-40页
        4.2.3 RT-PCR检测CD320在SSCs中的表达第40页
        4.2.4 亚细胞定位预测(PSORT II)第40页
        4.2.5 CD320载体构建第40页
        4.2.6 重组质粒的扩大培养第40-41页
        4.2.7 重组质粒的提取第41页
        4.2.8 重组质粒的酶切鉴定第41-42页
        4.2.9 重组质粒pEGFP-N1-CD320转染 293T细胞第42页
        4.2.10 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染山羊SSCs第42页
        4.2.11 RT-PCR检测山羊SSCs中CD320的表达水平第42页
    4.3 结果第42-48页
        4.3.1 RNA提取第42-43页
        4.3.2 CD320在山羊SSCs中的表达第43-44页
        4.3.3 亚细胞定位预测(PSORT II)第44页
        4.3.4 CD320表达载体的构建第44-45页
        4.3.5 重组质粒的酶切鉴定第45-46页
        4.3.6 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染 293T细胞第46页
        4.3.7 重组质粒pEGFP-Nl-CD320转染山羊SSCs第46-47页
        4.3.8 转染后山羊SSCs中CD320的表达情况第47-48页
    4.4 讨论第48-51页
第5章 RanBP9在山羊精原干细胞中的表达研究第51-63页
    5.1 实验试剂第51页
    5.2 方法第51-54页
        5.2.1 引物设计第51-52页
        5.2.2 RNA提取第52页
        5.2.3 RT-PCR检测RanBP9在SSCs中的表达第52页
        5.2.4 亚细胞定位预测(PSORT II)第52页
        5.2.5 RanBP9载体构建第52页
        5.2.6 重组质粒的扩大培养第52页
        5.2.7 重组质粒的提取第52页
        5.2.8 重组质粒的酶切鉴定第52-53页
        5.2.9 重组质粒pEGFP-N1- RanBP9转染 293T细胞第53页
        5.2.10 重组质粒pEGFP-Nl- RanBP9转染山羊SSCs第53页
        5.2.11 CCK-8 检测山羊SSCs的增殖第53页
        5.2.12 RT-PCR检测山羊SSCs中RanBP9的表达水平第53-54页
    5.3 结果第54-60页
        5.3.1 RanBP9在山羊SSCs中的表达第54页
        5.3.2 亚细胞定位预测(PSORT II)第54-55页
        5.3.3 RanBP9载体的构建第55页
        5.3.4 重组质粒的酶切鉴定第55-56页
        5.3.5 重组质粒pEGFP-Nl- RanBP9在 293T细胞中的定位第56-57页
        5.3.6 重组质粒pEGFP-Nl-RanBP9转染山羊SSCs第57页
        5.3.7 转染重组质粒后山羊SSCs中RanBP9的表达水平第57-58页
        5.3.8 重组质粒转染后山羊SSCs的发育第58-59页
        5.3.9 CCK-8 检测转染RanBP9后细胞增殖情况第59-60页
    5.4 讨论第60-63页
第6章 结论第63-65页
参考文献第65-77页
附录第77-79页
致谢第79-81页
在学期间发表的文章第81页

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