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玉米大斑病菌黑色素合成调控基因StMR1转录活性及调控机制分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
缩写词表第9-10页
1 引言第10-13页
    1.1 玉米大斑病的生产危害第10页
    1.2 玉米大斑病菌的黑色素及其生物合成第10-11页
    1.3 染色质免疫共沉淀技术研究第11页
    1.4 本试验研究目的与意义第11-13页
2 材料和方法第13-26页
    2.1 材料第13-16页
        2.1.1 菌株、质粒载体第13页
        2.1.2 培养基及其配制第13页
        2.1.3 药品及试剂配制第13-15页
        2.1.4 主要仪器第15页
        2.1.5 试验所需引物第15-16页
    2.2 StMR1 基因诱饵表达载体构建及其转录活性分析第16-21页
        2.2.1 StMR1 基因诱饵表达载体的构建第16-20页
        2.2.2 StMR1 基因诱饵表达载体的酵母转化第20-21页
        2.2.3 StMR1 基因的转录活性分析第21页
    2.3 StMR1 基因过表达载体构建第21-22页
    2.4 StMR1 基因过表达菌株获得及验证第22-23页
        2.4.1 原生质体转化方法步骤第22页
        2.4.2 转化子PCR验证第22-23页
    2.5 Stmr1p亚细胞定位第23页
    2.6 黑色素合成酶基因顺式作用元件预测及转录因子结合位点引物设计第23页
    2.7 染色质免疫共沉淀分析StMR1 基因对黑色素合成酶基因调控第23-26页
        2.7.1 染色质免疫共沉淀(ChIP)试验第23-25页
        2.7.2 StMR1 基因对黑色素合成酶基因调控作用分析第25-26页
3 结果与分析第26-39页
    3.1 玉米大斑病菌StMR1 基因诱饵表达载体构建与验证第26-28页
        3.1.1 StMR1 基因cDNA克隆第26页
        3.1.2 StMR1 基因与pGBKT7 载体的连接第26-27页
        3.1.3 诱饵表达载体StMR1-BD酶切验证第27-28页
    3.2 诱饵表达载体的酵母转化及其转录活性分析第28-29页
    3.3 玉米大斑病菌StMR1 基因过表达载体构建第29-30页
        3.3.1 StMR1 基因扩增第29页
        3.3.2 终载体的获得与验证第29-30页
    3.4 玉米大斑病菌StMR1 过表达菌株获得及验证第30-33页
        3.4.1 原生质体转化第30-31页
        3.4.2 菌株PCR验证结果及表型观察第31-33页
    3.5 玉米大斑病菌StMR1 基因亚细胞定位第33页
    3.6 玉米大斑病菌StMR1 基因调控黑色素合成酶位点分析第33-39页
        3.6.1 黑色素合成关键基因的表达第33-34页
        3.6.2 黑色素合成酶基因转录调控元件分析第34-36页
        3.6.3 超声破碎条件第36-37页
        3.6.4 Stmr1p蛋白DNA靶点分析第37-39页
4 讨论第39-42页
    4.1 研究植物病原真菌黑色素调控基因表达蛋白的意义第39页
    4.2 玉米大斑病菌StMR1 基因与黑色素生物合成关系第39-40页
    4.3 染色质免疫共沉淀与StMR1 靶基因研究第40-42页
5 结论第42-44页
参考文献第44-49页
在校期间发表论文第49-51页
作者简历第51-52页
致谢第52-53页

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