摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩写词表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-13页 |
1.1 玉米大斑病的生产危害 | 第10页 |
1.2 玉米大斑病菌的黑色素及其生物合成 | 第10-11页 |
1.3 染色质免疫共沉淀技术研究 | 第11页 |
1.4 本试验研究目的与意义 | 第11-13页 |
2 材料和方法 | 第13-26页 |
2.1 材料 | 第13-16页 |
2.1.1 菌株、质粒载体 | 第13页 |
2.1.2 培养基及其配制 | 第13页 |
2.1.3 药品及试剂配制 | 第13-15页 |
2.1.4 主要仪器 | 第15页 |
2.1.5 试验所需引物 | 第15-16页 |
2.2 StMR1 基因诱饵表达载体构建及其转录活性分析 | 第16-21页 |
2.2.1 StMR1 基因诱饵表达载体的构建 | 第16-20页 |
2.2.2 StMR1 基因诱饵表达载体的酵母转化 | 第20-21页 |
2.2.3 StMR1 基因的转录活性分析 | 第21页 |
2.3 StMR1 基因过表达载体构建 | 第21-22页 |
2.4 StMR1 基因过表达菌株获得及验证 | 第22-23页 |
2.4.1 原生质体转化方法步骤 | 第22页 |
2.4.2 转化子PCR验证 | 第22-23页 |
2.5 Stmr1p亚细胞定位 | 第23页 |
2.6 黑色素合成酶基因顺式作用元件预测及转录因子结合位点引物设计 | 第23页 |
2.7 染色质免疫共沉淀分析StMR1 基因对黑色素合成酶基因调控 | 第23-26页 |
2.7.1 染色质免疫共沉淀(ChIP)试验 | 第23-25页 |
2.7.2 StMR1 基因对黑色素合成酶基因调控作用分析 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-39页 |
3.1 玉米大斑病菌StMR1 基因诱饵表达载体构建与验证 | 第26-28页 |
3.1.1 StMR1 基因cDNA克隆 | 第26页 |
3.1.2 StMR1 基因与pGBKT7 载体的连接 | 第26-27页 |
3.1.3 诱饵表达载体StMR1-BD酶切验证 | 第27-28页 |
3.2 诱饵表达载体的酵母转化及其转录活性分析 | 第28-29页 |
3.3 玉米大斑病菌StMR1 基因过表达载体构建 | 第29-30页 |
3.3.1 StMR1 基因扩增 | 第29页 |
3.3.2 终载体的获得与验证 | 第29-30页 |
3.4 玉米大斑病菌StMR1 过表达菌株获得及验证 | 第30-33页 |
3.4.1 原生质体转化 | 第30-31页 |
3.4.2 菌株PCR验证结果及表型观察 | 第31-33页 |
3.5 玉米大斑病菌StMR1 基因亚细胞定位 | 第33页 |
3.6 玉米大斑病菌StMR1 基因调控黑色素合成酶位点分析 | 第33-39页 |
3.6.1 黑色素合成关键基因的表达 | 第33-34页 |
3.6.2 黑色素合成酶基因转录调控元件分析 | 第34-36页 |
3.6.3 超声破碎条件 | 第36-37页 |
3.6.4 Stmr1p蛋白DNA靶点分析 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
4.1 研究植物病原真菌黑色素调控基因表达蛋白的意义 | 第39页 |
4.2 玉米大斑病菌StMR1 基因与黑色素生物合成关系 | 第39-40页 |
4.3 染色质免疫共沉淀与StMR1 靶基因研究 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
在校期间发表论文 | 第49-51页 |
作者简历 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |