| 中文摘要 | 第2-3页 |
| 英文摘要 | 第3-4页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 大肠杆菌简介 | 第10页 |
| 2 大肠杆菌主要毒力因子 | 第10-14页 |
| 2.1 肠毒素 | 第10-11页 |
| 2.2 黏附素 | 第11-13页 |
| 2.3 毒力岛 | 第13-14页 |
| 3 大肠杆菌的检测现状 | 第14-15页 |
| 3.1 传统检测方法 | 第14页 |
| 3.2 免疫血清学检测方法 | 第14-15页 |
| 3.3 分子生物学检测方法 | 第15页 |
| 4 环介导等温扩增( LAMP)技术 | 第15-21页 |
| 4.1 LAMP方法简述 | 第15-16页 |
| 4.2 LAMP技术的基本原理 | 第16页 |
| 4.3 引物的设计及其设计原则 | 第16页 |
| 4.4 LAMP技术的特点 | 第16-17页 |
| 4.5 LAMP扩增产物的检测方法 | 第17页 |
| 4.6 LAMP技术的改良 | 第17-18页 |
| 4.7 LAMP技术的应用 | 第18-21页 |
| 研究一:新生仔猪源大肠杆菌肠毒素基因LAMP检测方法的建立 | 第21-42页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| 1.1 试验菌株 | 第21-22页 |
| 1.2 仪器设备 | 第22页 |
| 1.3 常用储备液及培养基配置 | 第22页 |
| 1.4 主要生化试剂 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| 2.1 基因组的提取 | 第23页 |
| 2.2 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.3 LAMP和PCR反应体系及反应程序 | 第24-25页 |
| 2.4 肠毒素型大肠杆菌LAMP反应条件摸索 | 第25-26页 |
| 2.5 LAMP可视化检测 | 第26页 |
| 2.6 LAMP特异性检测 | 第26页 |
| 2.7 LAMP和PCR灵敏性检测 | 第26页 |
| 2.8 重复性和稳定性试验 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-39页 |
| 3.1 肠毒素型大肠杆菌LAMP反应条件的摸索 | 第27-34页 |
| 3.2 LAMP可视化检测结果 | 第34-35页 |
| 3.3 LAMP特异性检测结果 | 第35-37页 |
| 3.4 LAMP和PCR灵敏性检测结果 | 第37-39页 |
| 3.5 重复性和稳定性试验结果 | 第39页 |
| 4 讨论与小结 | 第39-42页 |
| 研究二:新生仔猪源大肠杆菌菌毛基因LAMP检测方法的建立 | 第42-57页 |
| 1 材料 | 第42页 |
| 1.1 试验菌株 | 第42页 |
| 1.2 仪器设备 | 第42页 |
| 1.3 常用储备液及培养基配置 | 第42页 |
| 1.4 主要生化试剂 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-44页 |
| 2.1 基因组的提取 | 第42-43页 |
| 2.2 引物的设计与合成 | 第43页 |
| 2.3 LAMP和PCR反应体系及反应程序 | 第43-44页 |
| 2.4 LAMP反应条件的摸索 | 第44页 |
| 2.5 LAMP特异性检测 | 第44页 |
| 2.6 LAMP和PCR灵敏性检测 | 第44页 |
| 2.7 重复性和稳定性试验 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-55页 |
| 3.1 LAMP反应条件的摸索 | 第44-51页 |
| 3.2 LAMP特异性检测结果 | 第51-53页 |
| 3.3 LAMP和PCR灵敏性检测结果 | 第53-55页 |
| 3.4 LAMP重复性和稳定性实验结果 | 第55页 |
| 4 讨论与小结 | 第55-57页 |
| 研究三: 新生仔猪源大肠杆菌毒力岛基因LAMP检测方法的建立 | 第57-72页 |
| 1 材料 | 第57页 |
| 1.1 试验菌株 | 第57页 |
| 1.2 仪器设备 | 第57页 |
| 1.3 常用储备液及培养基配置 | 第57页 |
| 1.4 主要生化试剂 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-59页 |
| 2.1 基因组的提取 | 第57-58页 |
| 2.2 引物的设计与合成 | 第58-59页 |
| 2.3 LAMP和PCR反应体系及反应程序 | 第59页 |
| 2.4 LAMP反应条件的摸索 | 第59页 |
| 2.5 LAMP特异性检测 | 第59页 |
| 2.6 LAMP和PCR灵敏性检测 | 第59页 |
| 2.7 重复性和稳定性试验 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-70页 |
| 3.1 LAMP反应条件的摸索 | 第59-66页 |
| 3.2 LAMP特异性检测结果 | 第66-68页 |
| 3.3 LAMP和PCR灵敏性检测结果 | 第68-70页 |
| 3.4 LAMP重复性和稳定性实验结果 | 第70页 |
| 4 讨论与小结 | 第70-72页 |
| 研究四:新生仔猪源大肠杆菌环介导等温扩增技术的应用 | 第72-78页 |
| 1 材料 | 第72页 |
| 1.1 临床病料 | 第72页 |
| 1.2 仪器设备 | 第72页 |
| 1.3 常用储备液及培养基配置 | 第72页 |
| 1.4 主要生化试剂 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-73页 |
| 2.1 病料的采集与处理 | 第72页 |
| 2.2 病料细菌DNA的提取 | 第72页 |
| 2.3 临床病料的检测 | 第72-73页 |
| 3 结果 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-78页 |
| 4.1 肠毒素的检测情况 | 第76页 |
| 4.2 菌毛的检测情况 | 第76页 |
| 4.3 毒力岛的检测结果 | 第76-78页 |
| 全文总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第89-90页 |
