| 中文摘要 | 第4-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 第一部分 引言 | 第11-33页 |
| 一、表观修饰酶自身的翻译后修饰 | 第11-13页 |
| （一）表观修饰酶的磷酸化 | 第11-12页 |
| （二）表观修饰酶的乙酰化 | 第12页 |
| （三）表观修饰酶的泛素化 | 第12页 |
| （四）表观修饰酶的甲基化 | 第12-13页 |
| 二、精氨酸甲基转移酶 | 第13-20页 |
| （一）精氨酸甲基转移酶简介 | 第13页 |
| （二）精氨酸甲基转移酶的分类 | 第13-15页 |
| （三）PRMTs的生物学功能 | 第15-18页 |
| （四）PRMTs与癌症 | 第18-20页 |
| 三、PRMT7的结构及功能研究 | 第20-22页 |
| （一）PRMT7的结构 | 第20-21页 |
| （二）PRMT7的功能 | 第21-22页 |
| 四、上皮间质转换 | 第22-29页 |
| （一）上皮间质转换的概念 | 第22-23页 |
| （二）EMT的分类 | 第23-24页 |
| （三）EMT的分子标志 | 第24-25页 |
| （四）EMT相关的信号通路 | 第25-27页 |
| （五）EMT与乳腺癌 | 第27-29页 |
| 五、YY1研究简介 | 第29-30页 |
| 六、本论文研究的内容及意义 | 第30-33页 |
| （一）立题依据 | 第30-31页 |
| （二）研究内容及意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第33-59页 |
| 一、实验材料 | 第33-36页 |
| （一）质粒 | 第33页 |
| （二）抗体 | 第33-34页 |
| （三）哺乳动物细胞系 | 第34页 |
| （四）组织样本 | 第34页 |
| （五）多肽 | 第34页 |
| （六）裸鼠 | 第34页 |
| （七）实验试剂 | 第34-35页 |
| （八）实验仪器 | 第35-36页 |
| 二、实验方法 | 第36-59页 |
| Ⅰ、分子生物学实验方法 | 第36-52页 |
| （一）质粒构建 | 第36-37页 |
| （二）质粒的大量制备 | 第37-38页 |
| （三）哺乳动物细胞总RNA的提取和反转录 | 第38-39页 |
| （四）RT-PCR和Real-time PCR | 第39-40页 |
| （五）Western Blot实验 | 第40-43页 |
| （六）蛋白免疫共沉淀（CoIP） | 第43-44页 |
| （七）Flag亲和层析纯化蛋白 | 第44页 |
| （八）GST融合蛋白诱导表达及纯化 | 第44-46页 |
| （九）染色质免疫共沉淀（ChIP） | 第46-48页 |
| （十）肽段pull down实验 | 第48-49页 |
| （十一）体外甲基化实验 | 第49-50页 |
| （十二）抗体制备与纯化 | 第50-51页 |
| （十三）酶联免疫吸附测定（ELISA）实验 | 第51-52页 |
| （十四）免疫学活性测定（Dot blot）实验 | 第52页 |
| Ⅱ、细胞生物学实验方法 | 第52-57页 |
| （一）细胞培养 | 第52-53页 |
| （二）细胞转染 | 第53-54页 |
| （三）荧光素酶报告基因实验 | 第54页 |
| （四）明胶酶谱实验 | 第54-56页 |
| （五）迁移和侵袭实验 | 第56-57页 |
| Ⅲ、小鼠活体实验及病理检测 | 第57-58页 |
| （一）小鼠肺转移实验 | 第57页 |
| （二）免疫组化实验 | 第57页 |
| （三）苏木精-伊红染色（HE染色） | 第57-58页 |
| Ⅳ、统计分析 | 第58-59页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第59-80页 |
| 一、PRMT7的第531位精氨酸受到甲基化修饰 | 第59-61页 |
| （一）PRMT7发生甲基化修饰 | 第59页 |
| （二）PRMT7的第531位精氨酸受到单甲基化修饰 | 第59-61页 |
| 二、PRMT7发生自甲基化修饰，其修饰对于PRMT7的酶活性是非必需的 | 第61-65页 |
| （一）PRMT7 R531单甲基化修饰抗体专一性的验证 | 第61-62页 |
| （二）PRMT7 R531的单甲基化修饰是由自身所催化的 | 第62-64页 |
| （三）PRMT7 R531是主要的自甲基化修饰位点 | 第64页 |
| （四）PRMT7的自甲基化修饰不影响其酶活性 | 第64-65页 |
| 三、PRMT7的自甲基化修饰对于PRMT7所诱导的EMT是必须的 | 第65-69页 |
| （一）甲基化的PRMT7诱导乳腺上皮细胞发生EMT | 第65-66页 |
| （二）甲基化的PRMT7诱导乳腺癌细胞发生EMT | 第66-69页 |
| 四、PRMT7的自甲基化修饰增强了PRMT7所介导的细胞迁移和侵袭能力 | 第69-71页 |
| （一）甲基化的PRMT7增强了MMP2和MMP9的酶活性 | 第69页 |
| （二）甲基化的PRMT7促进了乳腺癌细胞的迁移和侵袭 | 第69-71页 |
| 五、PRMT7的自甲基化修饰促进了乳腺癌的远端转移 | 第71-73页 |
| 六、PRMT7的自甲基化修饰与恶性乳腺癌组织具有密切的相关性 | 第73-74页 |
| 七、PRMT7的自甲基化修饰位点突变导致其靶基因E-cadherin的脱抑制 | 第74-76页 |
| （一）甲基化的PRMT7增强靶基因启动子的活性 | 第74-75页 |
| （二）甲基化的PRMT7促进其与靶基因启动子的结合 | 第75-76页 |
| 八、PRMT7的自甲基化修饰增强了PRMT7与YY1的相互作用 | 第76-80页 |
| （一）PRMT7的自甲基化修饰增强了细胞内的YY1与PRMT7的结合 | 第76-77页 |
| （二）PRMT7的自甲基化修饰促进了YY1与PRMT7的直接相互作用 | 第77-80页 |
| 第四部分 讨论 | 第80-84页 |
| 一、PRMT7自身的翻译后修饰 | 第80-81页 |
| 二、PRMT7自甲基化修饰的作用形式 | 第81-82页 |
| 三、PRMT7的自甲基化修饰与E-cadherin的转录调控 | 第82页 |
| 四、甲基化的PRMT7调控EMT发生的其它机制 | 第82-84页 |
| 主要结论和创新点 | 第84-85页 |
| 一、主要结论 | 第84页 |
| 二、创新点 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-102页 |
| 附录一 | 第102-104页 |
| 附录二 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第106页 |
