| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 猪瘟病毒及PDI在病毒感染细胞中作用的研究进展 | 第11-19页 |
| 1.1 CSFV | 第11-13页 |
| 1.1.1 CSFV的基因结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 CSFV结构蛋白及其功能 | 第12页 |
| 1.1.3 CSFV的非结构蛋白及其功能 | 第12-13页 |
| 1.2 分子伴侣PDI | 第13-19页 |
| 1.2.1 分子伴侣简介 | 第13页 |
| 1.2.2 蛋白二硫键异构酶（PDI） | 第13-15页 |
| 1.2.3 PDI在病毒感染过程中的作用 | 第15-17页 |
| 1.2.4 分子伴侣PDI在病毒增殖中的作用 | 第17-19页 |
| 第二章 检测猪PDI基因实时荧光定量PCR方法的建立 | 第19-29页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 组织样品及细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第20页 |
| 2.2.2 质粒标准品制备 | 第20-22页 |
| 2.2.3 PDI实时荧光定量PCR方法的建立 | 第22页 |
| 2.2.4 荧光定量 PCR 方法的初步应用 | 第22页 |
| 2.3 结果 | 第22-27页 |
| 2.3.1 目的基因扩增与鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 标准曲线建立与敏感性 | 第23-24页 |
| 2.3.3 熔解曲线分析特异性 | 第24-25页 |
| 2.3.4 重复性试验 | 第25-26页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR方法的初步应用 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 2.5 小结 | 第28-29页 |
| 第三章 CSFV感染致巨噬细胞PDI表达下调 | 第29-38页 |
| 3.1 材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 病毒和细胞来源 | 第29页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 3.2 方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成 | 第30页 |
| 3.2.2 CSFV Shimen株感染巨噬细胞及其总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.3 细胞总RNA的反转录 | 第31页 |
| 3.2.4 目的基因的扩增 | 第31页 |
| 3.2.5 目的基因定量PCR的检测 | 第31-32页 |
| 3.2.6 PDI的免疫荧光检测 | 第32页 |
| 3.2.7 PDI的Western Blot检测 | 第32-33页 |
| 3.3 结果 | 第33-37页 |
| 3.3.1 目的基因的扩增 | 第33-34页 |
| 3.3.2 目的基因定量PCR的检测 | 第34-35页 |
| 3.3.3 PDI的Western Blot检测 | 第35-36页 |
| 3.3.4 PDI的免疫荧光检测 | 第36-37页 |
| 3.4 讨论 | 第37页 |
| 3.5 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 CSFV Shimen株与PDI调控的初步研究 | 第38-49页 |
| 4.1 材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 病毒和细胞来源 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第38-39页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-43页 |
| 4.2.1 引物的设计和合成 | 第39页 |
| 4.2.2 PDI基因全长的扩增 | 第39-40页 |
| 4.2.3 目的基因与载体的连接 | 第40-41页 |
| 4.2.4 重组质粒的转化 | 第41-42页 |
| 4.2.5 重组质粒的巨噬细胞转染 | 第42-43页 |
| 4.3 结果 | 第43-47页 |
| 4.3.1 PDI过表达体系的过程检测 | 第43-45页 |
| 4.3.2 CSFV调控PDI致ATF4表达下调 | 第45-47页 |
| 4.3.3 过表达PDI抑制CSFV在巨噬细胞中的增殖 | 第47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 4.5 小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
