| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| CONTENT | 第11-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-21页 |
| 1.1 重金属污染的来源及危害 | 第14-16页 |
| 1.1.1 重金属污染的来源 | 第14-15页 |
| 1.1.2 重金属污染的危害 | 第15-16页 |
| 1.2 重金属污染植物修复技术 | 第16-17页 |
| 1.3 ZIP基因家族国内外研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 西洋菜简介 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的、意义及研究内容 | 第19-21页 |
| 1.5.1 研究目的、意义 | 第19-20页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第20-21页 |
| 第二章 西洋菜中锌铁转运蛋白NoZIP基因全长的克隆 | 第21-43页 |
| 2.1 引言 | 第21-22页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第22-24页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.2.2 菌种 | 第22页 |
| 2.2.3 酶与试剂盒 | 第22页 |
| 2.2.4 化学试剂 | 第22页 |
| 2.2.5 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2.6 引物 | 第23页 |
| 2.2.7 DNA测序 | 第23页 |
| 2.2.8 仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.3 主要试验方法 | 第24-36页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.1.1 准备工作 | 第24页 |
| 2.3.1.2 具体步骤 | 第24-25页 |
| 2.3.2 NoZIP cDNA的克隆 | 第25-35页 |
| 2.3.2.1 用RT-PCR的方法获得ZIP保守片段 | 第25-27页 |
| 2.3.2.2 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第27-28页 |
| 2.3.2.3 连接转化及测序 | 第28页 |
| 2.3.2.4 ZIP基因5'RACE | 第28-33页 |
| 2.3.2.5 NoZIP基因3'RACE | 第33-35页 |
| 2.3.2.6 ZIP基因cDNA全长克隆 | 第35页 |
| 2.3.3 NoZIP基因的序列分析 | 第35-36页 |
| 2.4 结果分析 | 第36-41页 |
| 2.4.1 RNA电泳图 | 第36页 |
| 2.4.2 ZIP保守片段产物凝胶电泳图 | 第36-37页 |
| 2.4.3 ZIP 5'RACE产物克隆及测序 | 第37-38页 |
| 2.4.4 NoZIP 3'RACE产物克隆及测序 | 第38页 |
| 2.4.5 NoZIP基因cDNA全长获得 | 第38-39页 |
| 2.4.6 NoZIP基因的序列分析 | 第39-41页 |
| 2.4.6.1 NoZIP基因编码蛋白的氨基酸序列、保守结构域以及亚细胞定位 | 第39-40页 |
| 2.4.6.2 NoZIP氨基酸序列与其余物种的相似性比较及进化树构建 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 不同条件下西洋菜根和叶中NoZIP基因的转录 | 第43-58页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-48页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.2.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 3.2.1.2 试剂 | 第43-44页 |
| 3.2.1.3 引物 | 第44页 |
| 3.2.1.4 主要仪器 | 第44页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 3.2.2.1 Actin基因片段的克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.2.2 荧光定量PCR | 第45-48页 |
| 3.3 结果分析 | 第48-55页 |
| 3.3.1 Actin基因保守片段 | 第48-49页 |
| 3.3.2 qPCR标准曲线 | 第49-50页 |
| 3.3.3 荧光定量结果分析 | 第50-55页 |
| 3.3.3.1 不同锌铁离子浓度下NoZIP基因在西洋菜根中的表达 | 第50-54页 |
| 3.3.3.2 不同锌铁离子浓度下NoZIP基因在西洋菜叶中的表达 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 附录1 NoZIP保守序列BLAST比对 | 第69-70页 |
| 附录2 Actin保守序列片段BLAST比对 | 第70页 |
