| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 WRKY家族转录因子的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1.1 WRKY转录因子概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 WRKY转录因子的结构特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2.1 WRKY结构域 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 WRKY蛋白与W盒 | 第14页 |
| 1.1.3 WRKY转录因子的生物学功能 | 第14-16页 |
| 1.1.3.1 WRKY转录因子对生物胁迫的响应 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 WRKY转录因子对非生物胁迫的响应 | 第15-16页 |
| 1.1.3.3 WRKY转录因子在植物生长发育中的响应 | 第16页 |
| 1.1.4 大豆WRKY转录因子研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 大豆遗传转化方法研究 | 第17-19页 |
| 1.2.1 农杆菌介导法 | 第17-18页 |
| 1.2.2 基因枪法 | 第18页 |
| 1.2.3 电击法 | 第18页 |
| 1.2.4 聚乙二醇法 | 第18-19页 |
| 1.2.5 花粉管通道法 | 第19页 |
| 1.3 农杆菌介导大豆遗传转化的主要影响因素 | 第19-21页 |
| 1.3.1 基因型的选择 | 第19-20页 |
| 1.3.2 农杆菌菌株的选择 | 第20页 |
| 1.3.3 筛选标记基因的选择 | 第20-21页 |
| 1.4 转基因大豆的食用和环境安全性研究 | 第21-23页 |
| 2 大豆植株耐盐简易鉴定方法探索 | 第23-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第23-24页 |
| 2.2 结果与分析 | 第24-29页 |
| 2.2.1 盐胁迫对不同大豆基因型植株高度的影响 | 第24页 |
| 2.2.2 盐胁迫对不同大豆基因型主根长度的影响 | 第24-25页 |
| 2.2.3 盐胁迫对不同大豆基因型植株鲜重的影响 | 第25-27页 |
| 2.2.4 盐胁迫对不同大豆基因型植株干重的影响 | 第27-29页 |
| 2.2.5 盐胁迫对不同大豆基因型萎蔫率的影响 | 第29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 3 GmWRKY70基因的遗传转化与转基因植株的鉴定筛选 | 第31-44页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-38页 |
| 3.1.1 材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 3.1.1.2 主要化学试剂及药品溶液配制 | 第32-33页 |
| 3.1.1.3 培养基配方 | 第33-34页 |
| 3.1.1.4 主要仪器设备 | 第34页 |
| 3.1.2 方法 | 第34-38页 |
| 3.1.2.1 种子消毒 | 第34页 |
| 3.1.2.2 种子萌发 | 第34-35页 |
| 3.1.2.3 共生菌制备 | 第35页 |
| 3.1.2.4 外植体的制备和共培养 | 第35页 |
| 3.1.2.5 抗性芽的诱导 | 第35-36页 |
| 3.1.2.6 丛生芽的伸长 | 第36页 |
| 3.1.2.7 生根培养 | 第36页 |
| 3.1.2.8 植株的驯化与移栽 | 第36-37页 |
| 3.1.2.9 DNA提取与PCR检测 | 第37-38页 |
| 3.2 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.2.1 大豆的遗传转化 | 第38-39页 |
| 3.2.2 转基因大豆幼苗的草丁膦抗性筛选 | 第39页 |
| 3.2.3 转基因大豆的分子检测 | 第39-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-44页 |
| 4 基于反向PCR技术的T-DNA整合位点分析 | 第44-54页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 4.1.1 材料 | 第44-45页 |
| 4.1.2 大豆基因组DNA的提取 | 第45页 |
| 4.1.3 反向PCR引物设计与酶切位点选择 | 第45-46页 |
| 4.1.4 DNA的酶切和酶切片段的环化 | 第46页 |
| 4.1.5 两轮巢式反向PCR扩增与产物克隆测序 | 第46页 |
| 4.1.6 序列对比分析 | 第46-47页 |
| 4.1.7 T-DNA整合位点验证 | 第47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-52页 |
| 4.2.1 反向PCR扩增 | 第47-48页 |
| 4.2.2 基于反向PCR的T-DNA整合位点分析 | 第48-50页 |
| 4.2.3 T-DNA整合位点的PCR验证 | 第50-52页 |
| 4.3 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-69页 |
| 附录A 缩写词 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
