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大蒜病毒病原的分子鉴定与序列分析

摘要第1-7页
Summary第7-9页
缩略词表第9-10页
第一章 文献综述第10-23页
   ·大蒜的保健、医疗功能第10-11页
   ·大蒜深加工产业的发展第11-12页
   ·大蒜病毒病的研究进展第12-16页
     ·马铃薯Y 病毒属第13-14页
     ·麝香石竹潜隐病毒属第14-15页
     ·马铃薯X 病毒第15页
     ·青葱X 病毒属第15-16页
   ·大蒜病毒的检测方法第16-21页
     ·外观症状诊断法第16-17页
     ·生物学测定(指示植物鉴别法)第17页
     ·电子显微镜法第17-18页
     ·血清学技术第18页
     ·分子生物学技术第18-21页
       ·核酸分子杂交技术(Nucleic Acid Hybridiza-tion)第19页
       ·双链RNA 电泳技术(Double-stranded RNA,dsRNA)第19页
       ·聚合酶链式反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR)第19页
       ·RT-PCR 技术第19-20页
       ·多重RT-PCR第20页
       ·定量PCR第20页
       ·免疫PCR第20页
       ·原位PCR第20页
       ·套式PCR第20-21页
     ·石英晶体微天平生物传感器技术(Quartzcrystal Microbalance Biosensor)第21页
   ·大蒜病毒病研究存在的问题第21-22页
   ·论文选题及欲解决的问题第22-23页
第二章 材料与方法第23-30页
   ·材料第23页
     ·试验材料第23页
     ·酶及试剂第23页
     ·主要试验仪器第23页
   ·方法第23-30页
     ·电镜扫描观察第23-24页
     ·RT-PCR 法检测与鉴定第24-30页
       ·寡聚核苷酸引物的设计与合成第24页
       ·大蒜叶片总RNA 的提取第24-25页
       ·反转录合成病毒cDNA 第一条链第25页
       ·PCR 扩增第25-26页
       ·PCR 产物的纯化第26-27页
       ·PCR 产物与T 载体连接第27页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27-28页
       ·连接产物转化大肠杆菌第28页
       ·重组质粒的提取第28-29页
       ·重组质粒的双酶切验证第29页
       ·序列测定与分析第29-30页
第三章 结果与分析第30-47页
   ·电镜观察结果第30页
   ·大蒜三种主要病毒的RT-PCR 分子鉴定第30-47页
     ·大蒜中洋葱黄矮病毒(OYDV)的RT-PCR 分子鉴定第30-38页
       ·OYDV 总RNA 的提取第30-31页
       ·OYDV 的RT-PCR 扩增第31-32页
       ·OYDV 重组质粒的双酶切鉴定第32页
       ·两个品种中OYDV 目的片段的序列测定及不同分离物相似性比较..第32-36页
       ·OYDV 系统进化分析第36-38页
     ·大蒜普通潜隐病毒(GCLV)的RT-PCR 分子鉴定第38-42页
       ·GCLV 的RT-PCR 扩增第38页
       ·GCLV 重组质粒的双酶切鉴定第38页
       ·GCLV 目的片段的序列测定及与不同分离物相似性比较第38-41页
       ·GCLV 系统进化分析第41-42页
     ·大蒜中韭葱黄条病毒(LYSV)的RT-PCR 分子鉴定第42-47页
       ·LYSV 的RT-PCR 扩增第42页
       ·LYSV 重组质粒的双酶切鉴定第42页
       ·LYSV 目的片段的序列测定及不同分离物相似性比较第42-45页
       ·LYSV 系统进化分析第45-47页
第四章 讨论与结论第47-51页
   ·讨论第47-49页
     ·电镜扫描技术鉴定大蒜病毒病原第47页
     ·RT-PCR 分子检测方法鉴定大蒜病毒病原第47-49页
       ·大蒜OYDV 病毒的RT-PCR 分子鉴定第47-48页
       ·大蒜GCLV 病毒的 RT-PCR 分子鉴定第48页
       ·大蒜 LYSV 病毒的 RT-PCR 分子鉴定第48-49页
   ·结论第49-51页
     ·电子显微鉴定推断大蒜病毒病原为马铃薯Y 病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和马铃薯X 病毒属病毒第49页
     ·OYDV 侵染大蒜具有普遍性第49页
     ·OYDV 在甘肃“成县迟蒜”和山东“鲁蒜王2 号”上具有差异性第49页
     ·自然因素的影响不对OYDV 病毒的变异其决定作用第49页
     ·大蒜中GCLV 和LYSV 病毒的分布具有地域特点第49-51页
参考文献第51-56页
附录第56-59页
致谢第59-60页
作者介绍第60-61页
导师简介第61-62页

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