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番茄抗病蛋白Sw-5b自抑制与激活的调控机理及亚细胞定位研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 绪言第12-40页
    1.1 植物的免疫和防卫系统第12-17页
        1.1.1 基础抗性PTI第13-16页
        1.1.2 基因对基因抗性ETI第16-17页
    1.2 抗病基因的分类第17-19页
    1.3 抗病基因NB-LRR蛋白结构及功能第19-26页
        1.3.1 NB-LRR蛋白结构之NB-ARC结构域第20-23页
        1.3.2 NB-LRR蛋白结构之LRR结构域第23-24页
        1.3.3 NB-LRR蛋白结构之N端结构域第24-26页
    1.4 抗病蛋白对效应蛋白的识别和互作机制第26-31页
        1.4.1 直接互作第26-27页
        1.4.2 间接互作第27-31页
    1.5 NB-LRR类抗病蛋白的定位与功能的研究第31-35页
        1.5.1 NB-LRR类抗病蛋白的亚细胞定位第31-33页
        1.5.2 NB-LRR类抗病蛋白的亚细胞定位与功能的关系第33-35页
    1.6 NB-LRR类抗病蛋白自我调控的研究进展第35-36页
    1.7 番茄抗病蛋白Sw-5b的研究进展第36-37页
        1.7.1 番茄斑萎病毒第36-37页
        1.7.2 番茄抗病蛋白Sw-5b第37页
    1.8 本研究的目的及意义第37-40页
第二章 实验材料与方法第40-56页
    2.1 实验材料、试剂及设备第40-43页
        2.1.1 实验材料第40页
        2.1.2 实验试剂第40-42页
        2.1.3 仪器设备第42-43页
    2.2 常用试剂的配置第43页
    2.3 实验方法第43-56页
        2.3.1 目的基因的克隆第43页
        2.3.2 相关载体的构建第43-48页
        2.3.3 载体经农杆菌浸润本氏烟第48-49页
        2.3.4 倒置荧光显微镜及共聚焦显微镜的观察第49页
        2.3.5 台盼蓝染色第49-50页
        2.3.6 电导率测定第50页
        2.3.7 RT-PCR检测第50-52页
        2.3.8 ELISA分析第52页
        2.3.9 Western blot分析第52-54页
        2.3.10 转基因操作第54-56页
第三章 抗性蛋白Sw-5b自抑制和激活的多层调控机制第56-84页
    3.1 Sw-5b的结构域划分第56-57页
    3.2 NB-LRR单独可特异性识别NSm并诱导细胞死亡第57-59页
    3.3 保守的NB-ARC结构域是激活NB-LRR的重要分子开关第59-61页
    3.4 LRR关闭NB-ARC结构域,使其保持自抑制状态第61-64页
    3.5 CC结构域增强NB-LRR的自抑制第64-67页
    3.6 CC抑制NSm作用下的NB-LRR的激活第67-69页
    3.7 当激发子NSm不存在时NTD加强CC对NB-LRR的抑制第69-73页
    3.8 当激发子NSm存在时NTD正调控CC-NB-LRR的激活第73-75页
    3.9 Sw-5b的自抑制和激活的多层调控对于其抗性是必须的第75-79页
    3.10 讨论第79-84页
第四章 Sw-5b蛋白的亚细胞定位与功能的关系第84-100页
    4.1 Sw-5b蛋白的亚细胞定位第84-87页
    4.2 细胞死亡的触发需要Sw-5b的细胞质分布第87-89页
    4.3 Sw-5b与NSm的识别发生在细胞质第89-90页
    4.4 抗性启动需要Sw-5b的细胞核定位第90-92页
    4.5 Sw-5b进核不依赖于其被激活第92-93页
    4.6 Sw-5b的细胞核定位不依赖于SGT1下游信号途径第93-94页
    4.7 Sw-5b额外的NTD结构域是进核的关键区域第94-96页
    4.8 讨论第96-100页
第五章 全文总结第100-102页
    5.1 全文总结第100-101页
        5.1.1 番茄免疫受体蛋白Sw-5b自抑制和激活的多重调控机制第100页
        5.1.2 番茄免疫受体蛋白Sw-5b亚细胞定位的研究第100-101页
    5.2 本研究的创新点第101-102页
参考文献第102-118页
附录A 缩略词表第118-120页
附录B 载体构建及引物信息第120-126页
附录C 感受态细胞制备第126-128页
附录D 常用培养基及试剂的配制方法第128-134页
附录E 研究生期间学术论文发表情况第134-136页
致谢第136页

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