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家蚕吡哆醛激酶和磷酸吡哆醇氧化酶基因的RNA干扰研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 综述第10-21页
    1.1 维生素B6及其在生物体内的作用第10页
    1.2 生物体中PLP的合成途径第10-11页
    1.3 PL激酶研究进展第11-13页
        1.3.1 PL激酶的催化功能及特性第11-12页
        1.3.2 PL激酶的晶体结构第12页
        1.3.3 PL激酶活性调节第12-13页
    1.4 PNP氧化酶研究进展第13-14页
        1.4.1 PNP氧化酶的催化功能及特性第13页
        1.4.2 PNP氧化酶的晶体结构第13-14页
        1.4.3 PNP氧化酶活性调节第14页
    1.5 RNAi概述第14-16页
    1.6 RNAi作用关键点第16-17页
        1.6.1 RNAi的中间效应分子siRNA第16页
        1.6.2 Dicer酶第16页
        1.6.3 RNA诱导的沉默复合物(RISC)第16页
        1.6.4 RNA聚合酶(RdRP)第16页
        1.6.5 ATP在RNAi中的作用第16-17页
    1.7 RNAi分类第17页
        1.7.1 细胞自主型RNAi第17页
        1.7.2 环境RNAi第17页
        1.7.3 系统RNAi第17页
    1.8 昆虫RNA干扰技术第17-19页
        1.8.1 昆虫吸收dsRNA的机制第17-18页
        1.8.2 dsRNA导入虫体方式第18-19页
    1.9 荧光定量PCR技术简介第19-20页
        1.9.1 荧光化学基团第19页
        1.9.2 基本原理第19-20页
    1.10 高通量测序第20-21页
        1.10.1 高通量测序简介第20页
        1.10.2 第二代DNA测序技术的应用第20-21页
2 引言第21-23页
    2.1 研究背景与意义第21页
    2.2 研究内容第21-23页
        2.2.1 家蚕PLK和PNPO基因RNAi第21页
        2.2.2 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后SerB、AST基因表达量变化第21-22页
        2.2.3 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后丝腺组织表达基因转录测序第22-23页
3 实验材料与方法第23-29页
    3.1 生物材料第23页
    3.2 仪器与试剂第23-24页
        3.2.1 主要实验仪器第23页
        3.2.2 主要试剂第23-24页
        3.2.3 实验中常用试剂配方第24页
    3.3 实验方法第24-29页
        3.3.1 siRNA的制备第24-25页
        3.3.2 家蚕饲养和RNAi处理第25页
        3.3.3 家蚕总RNA提取和检测第25-26页
        3.3.4 RNA反转录成cDNA第26-27页
        3.3.5 家蚕PLK、PNPO基因干扰效果的检测及转氨酶表达分析第27-28页
        3.3.6 RNAi处理后丝腺组织表达基因转录分析第28-29页
4 结果与分析第29-44页
    4.1 PLK和PNPO基因RNA干扰第29-34页
        4.1.1 家蚕总RNA的提取第29-30页
        4.1.2 RNA干扰有效时间观察第30页
        4.1.3 注射不同干扰片段PLK和PNPO基因转录表达分析第30-32页
        4.1.4 RNA干扰后PLK和PNPO基因在不同组织中转录表达情况第32-34页
    4.2 PLK和PNPO基因RNAi对转氨酶转录水平的影响第34-35页
    4.3 家蚕PLP合成酶RNAi处理后丝腺组织转录组分析第35-44页
        4.3.1 Reads预处理及参考基因组比对第35页
        4.3.2 家蚕丝腺组织基因表达丰度分布第35页
        4.3.3 家蚕RNAi后与对照中丝腺组织差异表达基因分布第35-36页
        4.3.4 PLK基因RNAi处理后丝腺组织中差异基因GO分类及富集分析第36-38页
        4.3.5 PNPO基因RNAi处理后丝腺组织中差异基因GO分类及富集分析第38-40页
        4.3.6 PLK基因RNAi处后丝腺组织中KEGG信号通路结果分析第40-42页
        4.3.7 PNPO基因RNAi处后丝腺组织中KEGG信号通路结果分析第42-44页
5 讨论第44-46页
    5.1 家蚕PLK、PNPO基因RNAi第44页
    5.2 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后转氨酶的表达量研究第44页
    5.3 家蚕RNAi处理后丝腺组织转录组学分析第44-46页
6 结论第46-47页
参考文献第47-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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