摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 综述 | 第10-21页 |
1.1 维生素B6及其在生物体内的作用 | 第10页 |
1.2 生物体中PLP的合成途径 | 第10-11页 |
1.3 PL激酶研究进展 | 第11-13页 |
1.3.1 PL激酶的催化功能及特性 | 第11-12页 |
1.3.2 PL激酶的晶体结构 | 第12页 |
1.3.3 PL激酶活性调节 | 第12-13页 |
1.4 PNP氧化酶研究进展 | 第13-14页 |
1.4.1 PNP氧化酶的催化功能及特性 | 第13页 |
1.4.2 PNP氧化酶的晶体结构 | 第13-14页 |
1.4.3 PNP氧化酶活性调节 | 第14页 |
1.5 RNAi概述 | 第14-16页 |
1.6 RNAi作用关键点 | 第16-17页 |
1.6.1 RNAi的中间效应分子siRNA | 第16页 |
1.6.2 Dicer酶 | 第16页 |
1.6.3 RNA诱导的沉默复合物(RISC) | 第16页 |
1.6.4 RNA聚合酶(RdRP) | 第16页 |
1.6.5 ATP在RNAi中的作用 | 第16-17页 |
1.7 RNAi分类 | 第17页 |
1.7.1 细胞自主型RNAi | 第17页 |
1.7.2 环境RNAi | 第17页 |
1.7.3 系统RNAi | 第17页 |
1.8 昆虫RNA干扰技术 | 第17-19页 |
1.8.1 昆虫吸收dsRNA的机制 | 第17-18页 |
1.8.2 dsRNA导入虫体方式 | 第18-19页 |
1.9 荧光定量PCR技术简介 | 第19-20页 |
1.9.1 荧光化学基团 | 第19页 |
1.9.2 基本原理 | 第19-20页 |
1.10 高通量测序 | 第20-21页 |
1.10.1 高通量测序简介 | 第20页 |
1.10.2 第二代DNA测序技术的应用 | 第20-21页 |
2 引言 | 第21-23页 |
2.1 研究背景与意义 | 第21页 |
2.2 研究内容 | 第21-23页 |
2.2.1 家蚕PLK和PNPO基因RNAi | 第21页 |
2.2.2 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后SerB、AST基因表达量变化 | 第21-22页 |
2.2.3 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后丝腺组织表达基因转录测序 | 第22-23页 |
3 实验材料与方法 | 第23-29页 |
3.1 生物材料 | 第23页 |
3.2 仪器与试剂 | 第23-24页 |
3.2.1 主要实验仪器 | 第23页 |
3.2.2 主要试剂 | 第23-24页 |
3.2.3 实验中常用试剂配方 | 第24页 |
3.3 实验方法 | 第24-29页 |
3.3.1 siRNA的制备 | 第24-25页 |
3.3.2 家蚕饲养和RNAi处理 | 第25页 |
3.3.3 家蚕总RNA提取和检测 | 第25-26页 |
3.3.4 RNA反转录成cDNA | 第26-27页 |
3.3.5 家蚕PLK、PNPO基因干扰效果的检测及转氨酶表达分析 | 第27-28页 |
3.3.6 RNAi处理后丝腺组织表达基因转录分析 | 第28-29页 |
4 结果与分析 | 第29-44页 |
4.1 PLK和PNPO基因RNA干扰 | 第29-34页 |
4.1.1 家蚕总RNA的提取 | 第29-30页 |
4.1.2 RNA干扰有效时间观察 | 第30页 |
4.1.3 注射不同干扰片段PLK和PNPO基因转录表达分析 | 第30-32页 |
4.1.4 RNA干扰后PLK和PNPO基因在不同组织中转录表达情况 | 第32-34页 |
4.2 PLK和PNPO基因RNAi对转氨酶转录水平的影响 | 第34-35页 |
4.3 家蚕PLP合成酶RNAi处理后丝腺组织转录组分析 | 第35-44页 |
4.3.1 Reads预处理及参考基因组比对 | 第35页 |
4.3.2 家蚕丝腺组织基因表达丰度分布 | 第35页 |
4.3.3 家蚕RNAi后与对照中丝腺组织差异表达基因分布 | 第35-36页 |
4.3.4 PLK基因RNAi处理后丝腺组织中差异基因GO分类及富集分析 | 第36-38页 |
4.3.5 PNPO基因RNAi处理后丝腺组织中差异基因GO分类及富集分析 | 第38-40页 |
4.3.6 PLK基因RNAi处后丝腺组织中KEGG信号通路结果分析 | 第40-42页 |
4.3.7 PNPO基因RNAi处后丝腺组织中KEGG信号通路结果分析 | 第42-44页 |
5 讨论 | 第44-46页 |
5.1 家蚕PLK、PNPO基因RNAi | 第44页 |
5.2 家蚕PLK和PNPO基因RNAi后转氨酶的表达量研究 | 第44页 |
5.3 家蚕RNAi处理后丝腺组织转录组学分析 | 第44-46页 |
6 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |