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参与锂离子运输泵编码基因ENA1调控的相关基因筛选和分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第7-17页
    1.1 锂的生物学性质第7-9页
        1.1.1 锂的理化性质第7页
        1.1.2 锂在治疗精神疾病方面的应用第7-8页
        1.1.3 锂在其他疾病中的应用第8-9页
        1.1.4 锂的毒副作用及预防措施第9页
    1.2 锂盐的作用机制第9-11页
    1.3 酿酒酵母对高盐胁迫的应答机制第11-14页
    1.4 酿酒酵母的VPS基因家族第14-15页
    1.5 本课题研究的目的和意义第15-17页
第二章 实验材料与方法第17-28页
    2.1 实验材料第17-24页
        2.1.1 实验试剂第17-18页
        2.1.2 主要仪器设备第18-19页
        2.1.3 实验所用菌株、质粒和引物第19-22页
        2.1.4 试剂与培养基第22-24页
    2.2 实验方法第24-28页
        2.2.1 碱裂解法小量提取质粒DNA第24-25页
        2.2.2 醋酸锂法转化质粒到酿酒酵母细胞第25页
        2.2.3 酵母 β-半乳糖苷酶(LacZ)活性的测定第25-26页
        2.2.4 PCR扩增目的片段DNA第26页
        2.2.5 酿酒酵母的DNA片段转化第26页
        2.2.6 玻璃珠法提取酿酒酵母的基因组DNA第26-27页
        2.2.7 酿酒酵母的荧光定位观察第27-28页
第三章 结果与讨论第28-42页
    3.1 锂离子耐受相关酿酒酵母基因缺失菌株中ENA1转录水平的测定第28-34页
        3.1.1 缺失后导致ENA1转录水平升高的基因功能分析第29-31页
        3.1.2 缺失后导致ENA1转录水平与野生型菌株无显著性差异的基因功能分析第31页
        3.1.3 缺失后导致ENA1转录水平低于野生型菌株的基因功能分析第31-34页
    3.2 Ena1p的N端整合GFP标签策略第34-36页
    3.3 GFP-Ena1融合蛋白在酵母基因缺失株细胞中的荧光定位第36-42页
        3.3.1 GFP-Ena1p定位于细胞质膜,液泡膜和液泡腔中的单基因缺失菌株第37-38页
        3.3.2 GFP-Ena1p定位于细胞质膜和液泡膜的单基因缺失菌株第38-39页
        3.3.3 GFP-Ena1p仅定位于细胞质膜的单基因缺失株第39-42页
主要结论与展望第42-43页
    主要结论第42页
    展望第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-49页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第49页

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