符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1.前言 | 第13-25页 |
1.1 硫丹的结构和理化性质 | 第13页 |
1.2 硫丹应用概况 | 第13-14页 |
1.3 硫丹的毒性 | 第14-15页 |
1.4 硫丹在环境中的残留状况 | 第15-16页 |
1.5 硫丹的微生物降解研究进展 | 第16-19页 |
1.6 硫丹降解菌在土壤中的定殖情况 | 第19-20页 |
1.7 土壤中硫丹残留毒性的检测评价方法 | 第20-23页 |
1.7.1 单细胞凝胶电泳实验 | 第21-22页 |
1.7.2 微核实验 | 第22-23页 |
1.8 硫丹的微生物降解途径和降解产物 | 第23-24页 |
1.9 本文研究的意义和内容 | 第24-25页 |
2.材料与方法 | 第25-43页 |
2.1 药品试剂 | 第25-26页 |
2.2 仪器设备 | 第26-27页 |
2.3 供试材料 | 第27-28页 |
2.3.1 供试土壤 | 第27页 |
2.3.2 菌株 | 第27-28页 |
2.3.2.1 供试菌株 | 第27页 |
2.3.2.2 细菌生长量的测定方法 | 第27-28页 |
2.3.2.3 菌悬液的制备 | 第28页 |
2.3.2.4 喷菌方法 | 第28页 |
2.3.3 供试培养基 | 第28页 |
2.4 实验方法 | 第28-43页 |
2.4.1 硫丹标准溶液配制 | 第28-29页 |
2.4.2 喷药量和喷药方法 | 第29页 |
2.4.3 实验处理 | 第29页 |
2.4.4 土壤中硫丹的提取及测定 | 第29-30页 |
2.4.4.1 土壤中硫丹的提取 | 第29-30页 |
2.4.4.2 土壤中硫丹的GC-ECD色谱分析条件 | 第30页 |
2.4.5 结果计算 | 第30-31页 |
2.4.5.1 土壤样品中硫丹降解率的计算 | 第30-31页 |
2.4.5.2 硫丹降解动力学方程的计算 | 第31页 |
2.4.5.3 变异系数计算 | 第31页 |
2.4.6 变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第31-37页 |
2.4.6.1 试剂配制 | 第31-32页 |
2.4.6.2 土壤总DNA提取 | 第32-33页 |
2.4.6.3 JW2和NS降解菌DNA的提取 | 第33-34页 |
2.4.6.4 PCR扩增 | 第34-36页 |
2.4.6.5 DGGE电泳步骤 | 第36-37页 |
2.4.7 彗星实验 | 第37-40页 |
2.4.7.1 试剂配制 | 第37-38页 |
2.4.7.2 蚯蚓染毒 | 第38-39页 |
2.4.7.3 蚯蚓体腔细胞提取 | 第39页 |
2.4.7.4 彗星实验步骤 | 第39-40页 |
2.4.7.5 观察和分析 | 第40页 |
2.4.8 微核实验 | 第40-41页 |
2.4.8.1 试剂的配制 | 第40页 |
2.4.8.2 测定步骤 | 第40-41页 |
2.4.8.3 结果与计算 | 第41页 |
2.4.9 硫丹代谢产物的GC-MS测定 | 第41-42页 |
2.4.9.1 样品处理 | 第41-42页 |
2.4.9.2 GC-MS分析条件 | 第42页 |
2.4.9.3 图谱分析方法 | 第42页 |
2.4.10 数据处理 | 第42-43页 |
3.结果与分析 | 第43-58页 |
3.1 土壤中硫丹残留量测定 | 第43-46页 |
3.1.1 土壤中硫丹GC-ECD残留测定方法及其可靠性验证 | 第43页 |
3.1.2 硫丹的降解动态 | 第43-46页 |
3.2 降解菌JW2和NS在两种土壤中的定殖情况 | 第46-49页 |
3.2.1 土壤细菌总 DNA 的提取结果 | 第46页 |
3.2.2 第一轮细菌 16S r DNA PCR扩增结果 | 第46-47页 |
3.2.3 第二轮细菌V3序列PCR扩增结果 | 第47-48页 |
3.2.4 降解菌在土壤中的定殖结果 | 第48-49页 |
3.3 硫丹降解前后综合毒性的变化 | 第49-52页 |
3.3.1 硫丹降解前后对蚯蚓体腔细胞 DNA 损伤程度的影响 | 第49-50页 |
3.3.2 硫丹降解前后对蚕豆根尖细胞微核率的影响 | 第50-52页 |
3.4 硫丹在土壤中的降解产物 | 第52-58页 |
4.讨论 | 第58-61页 |
4.1 硫丹微生物强化降解 | 第58页 |
4.2 降解菌JW2和NS在土壤中的定殖 | 第58-59页 |
4.3 硫丹降解前后土壤毒性变化 | 第59页 |
4.4 硫丹的微生物降解产物和途径 | 第59-60页 |
4.5 展望 | 第60-61页 |
5.结论 | 第61-62页 |
6.本研究的创新之处 | 第62-63页 |
7.参考文献 | 第63-69页 |
8.致谢 | 第69-70页 |
9.攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |