致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语及中英文对照 | 第10-17页 |
1 引言 | 第17-43页 |
1.1 DNA损伤 | 第17-19页 |
1.1.1 DNA损伤类型 | 第18-19页 |
1.2 DNA修复通路 | 第19-32页 |
1.2.1 直接修复 | 第20页 |
1.2.2 碱基切除修复 | 第20-21页 |
1.2.3 核酸切除修复 | 第21页 |
1.2.4 错配修复 | 第21-22页 |
1.2.5 双链断裂修复 | 第22-32页 |
1.3 单链DNA结合蛋白 | 第32-33页 |
1.4 RPA的研究现状 | 第33-37页 |
1.4.1 RPA的结构 | 第33-34页 |
1.4.2 RPA结合ssDNA具体机制 | 第34-35页 |
1.4.3 RPA参与DNA复制 | 第35-36页 |
1.4.4 RPA参与DNA修复 | 第36-37页 |
1.5 hSSB1研究现状 | 第37-40页 |
1.6 SOSS1功能 | 第40-41页 |
1.7 INTS6在DNA修复中的功能 | 第41-42页 |
1.8 论文研究目的与意义 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-69页 |
2.1 实验材料 | 第43-45页 |
2.1.1 分子克隆试剂与耗材 | 第43页 |
2.1.2 蛋白纯化试剂与耗材 | 第43-44页 |
2.1.3 结晶试剂与耗材 | 第44页 |
2.1.4 仪器 | 第44-45页 |
2.2 实验方法 | 第45-69页 |
2.2.1 目的基因表达载体构建 | 第45-51页 |
2.2.2 目的蛋白表达纯化步骤 | 第51-65页 |
2.2.3 复合物结晶方法 | 第65-67页 |
2.2.4 凝胶阻滞实验(EMSA)实验步骤 | 第67-68页 |
2.2.5 等温滴定量热法(ITC)操作步骤 | 第68-69页 |
3 结果 | 第69-97页 |
3.1 SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC的表达、纯化、结晶与结构解析 | 第69-80页 |
3.1.1 SOSSB1的表达和纯化 | 第69-71页 |
3.1.2 SOSSC的表达和纯化 | 第71-72页 |
3.1.3 SOSSA的单独表达 | 第72-75页 |
3.1.4 SOSSA_N/SOSSB1共表达和纯化 | 第75-78页 |
3.1.5 SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC复合物的组装 | 第78页 |
3.1.6 SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC晶体筛选及优化 | 第78-80页 |
3.1.7 SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC结构解析过程 | 第80页 |
3.2 SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC结构分析 | 第80-85页 |
3.2.1 SOSSA_N分析 | 第81页 |
3.2.2 SOSSB_1结构分析 | 第81-82页 |
3.2.3 SOSSC结构分析 | 第82页 |
3.2.4 SOSSA/B1界面分析 | 第82-84页 |
3.2.5 SOSSA/C界面分析 | 第84-85页 |
3.3 SOSSA_N/SOSSB1/dT12、SOSSA_N/SOSSB1/SOSSC/dT35纯化、结晶、结构解析及分析 | 第85-94页 |
3.4 C-INTS6/SOSSA_C纯化与结晶 | 第94-97页 |
4 讨论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-122页 |
作者简历及科研成果 | 第122页 |