中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
1.1 腺病毒简介 | 第11-12页 |
1.2 腺病毒载体在基因治疗中的应用 | 第12-13页 |
1.3 腺病毒载体的靶向修饰 | 第13-15页 |
1.4 具有特殊纤维蛋白结构的腺病毒简介 | 第15-17页 |
1.5 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的应用 | 第17-19页 |
1.6 论文设计 | 第19-22页 |
1.6.1 论文思路 | 第19-20页 |
1.6.2 实验设计 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1. 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 质粒、细胞和菌株 | 第22页 |
2.1.2 主要材料 | 第22-23页 |
2.1.3 仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-33页 |
2.2.1 病毒骨架质粒的构建 | 第24-25页 |
2.2.2 重组腺病毒的包装、扩增、纯化和滴度检测 | 第25-27页 |
2.2.3 病毒纯化 | 第27-28页 |
2.2.4 病毒滴度检测 | 第28-29页 |
2.2.5 新型腺病毒载体鉴定 | 第29-33页 |
第三章 结果与讨论 | 第33-54页 |
3.1 纤维蛋白修饰的腺病毒载体的构建 | 第33-41页 |
3.1.1 骨架质粒的构建 | 第33-39页 |
3.1.2 穿梭质粒PDC311-CMV-RFP-BGH的构建 | 第39-40页 |
3.1.3 质粒的初步表达 | 第40-41页 |
3.2 重组腺病毒的获得及鉴定 | 第41-44页 |
3.2.1 重组腺病毒的获得 | 第41-42页 |
3.2.2 重组腺病毒单克隆的筛选 | 第42-43页 |
3.2.3 重组腺病毒的外源基因表达的初步鉴定 | 第43-44页 |
3.3 病毒的纯化以及相关鉴定 | 第44-46页 |
3.3.1 病毒的纯化 | 第44-45页 |
3.3.2 Slot Blot检测重组腺病毒的性质 | 第45页 |
3.3.3 免疫胶体金电镜法检测重组腺病毒表面的TRAIL | 第45-46页 |
3.4 重组腺病毒感染性质的鉴定 | 第46-49页 |
3.5. 溶瘤重组腺病毒Ad5-E1a-fFT的获得、鉴定及体外抗肿瘤活性 | 第49-54页 |
3.5.1 穿梭质粒pDC311-CMV-Luc&RFP-BGH-Survivin-E1dl24的获得 | 第49-50页 |
3.5.2 溶瘤重组腺病毒Ad5-E1a-fFT的获得、纯化及鉴定 | 第50-52页 |
3.5.3 重组溶瘤腺病毒Ad5-E1a-fFT对正常细胞的影响 | 第52-53页 |
3.5.4 重组溶瘤腺病毒Ad5-E1a-fET的体外抗肿瘤活性 | 第53-54页 |
讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
作者简介 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |