摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 脂肪细胞因子对肌肉的调控研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 脂肪组织的内分泌功能 | 第11-12页 |
1.1.2 脂肪细胞因子对肌肉功能的调控作用 | 第12-13页 |
1.2 脂联素概述 | 第13-16页 |
1.2.1 脂联素的发现 | 第13-14页 |
1.2.2 脂联素的结构和功能 | 第14-16页 |
1.3 细胞氧化损伤机制研究进展 | 第16-21页 |
1.3.1 氧化应激 | 第16页 |
1.3.2 脂联素对氧化应激损伤的修复作用 | 第16-17页 |
1.3.3 氧化损伤过程中溶酶体-线粒体轴 | 第17-19页 |
1.3.4 p53与氧化损伤 | 第19-21页 |
1.4 本试验研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 鸡骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及氧化应激模型构建 | 第22-32页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 试验动物 | 第22页 |
2.1.2 试验试剂和耗材 | 第22页 |
2.1.3 试验设备仪器 | 第22-23页 |
2.2 试验设计与方法 | 第23-27页 |
2.2.1 试验设计 | 第23页 |
2.2.2 骨骼肌卫星细胞的分离、纯化和培养 | 第23页 |
2.2.3 骨骼肌卫星细胞的传代、冻存和复苏 | 第23-24页 |
2.2.4 骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第24页 |
2.2.5 DCFH-DA检测细胞ROS | 第24-25页 |
2.2.6 Tunel细胞凋亡检测 | 第25页 |
2.2.7 CCK-8检测细胞活力 | 第25页 |
2.2.8 MDA含量测定 | 第25-26页 |
2.2.9 SOD活力测定 | 第26-27页 |
2.2.10 GSH-Px活力测定 | 第27页 |
2.3 数据统计及分析 | 第27页 |
2.4 结果与分析 | 第27-30页 |
2.4.1 骨骼肌卫星细胞的形态 | 第27-28页 |
2.4.2 骨骼肌卫星细胞的鉴定 | 第28页 |
2.4.3 ROS免疫荧光检测 | 第28-29页 |
2.4.4 Tunel细胞凋亡检测 | 第29页 |
2.4.5 CCK-8、MDA、SOD、GSH-Px含量检测 | 第29-30页 |
2.5 讨论 | 第30-31页 |
2.6 小结 | 第31-32页 |
第三章 脂联素对氧化应激鸡骨骼肌卫星细胞中溶酶体及线粒体损伤的修复作用 | 第32-45页 |
3.1 材料 | 第32-33页 |
3.1.1 试验材料 | 第32页 |
3.1.2 试验试剂和耗材 | 第32-33页 |
3.1.3 试验设备仪器 | 第33页 |
3.2 试验设计与方法 | 第33-38页 |
3.2.1 试验设计 | 第33页 |
3.2.2 骨骼肌卫星细胞的培养 | 第33页 |
3.2.3 DCFH-DA检测细胞ROS | 第33页 |
3.2.4 Tunel细胞凋亡检测 | 第33页 |
3.2.5 CCK-8检测细胞活力 | 第33页 |
3.2.6 MDA含量测定 | 第33页 |
3.2.7 SOD活力测定 | 第33页 |
3.2.8 GSH-Px活力测定 | 第33页 |
3.2.9 JC-1染色 | 第33-34页 |
3.2.10 AO染色 | 第34页 |
3.2.11 细胞总RNA提取 | 第34-35页 |
3.2.12 反转录及实时定量PCR | 第35-36页 |
3.2.13 细胞总蛋白提取 | 第36页 |
3.2.14 Western Blot检测 | 第36-38页 |
3.2.14.1 蛋白质电泳 | 第36-37页 |
3.2.14.2 转膜 | 第37页 |
3.2.14.3 化学发光显影,自动曝光 | 第37-38页 |
3.3 数据统计及分析 | 第38页 |
3.4 结果与分析 | 第38-42页 |
3.4.1 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞损伤的修复作用 | 第38-40页 |
3.4.2 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞线粒体的影响 | 第40-41页 |
3.4.3 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞溶酶体膜通透性的影响 | 第41-42页 |
3.4.4 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞凋亡相关因子的影响 | 第42页 |
3.5 讨论 | 第42-44页 |
3.6 小结 | 第44-45页 |
第四章 P53参与脂联素修复鸡骨骼肌卫星细胞氧化应激机制研究 | 第45-55页 |
4.1 材料 | 第45页 |
4.1.1 试验材料 | 第45页 |
4.1.2 试验试剂和耗材 | 第45页 |
4.1.3 试验设备仪器 | 第45页 |
4.2 试验设计与方法 | 第45-46页 |
4.2.1 试验设计 | 第45-46页 |
4.2.2 骨骼肌卫星细胞的培养 | 第46页 |
4.2.3 DCFH-DA检测细胞ROS | 第46页 |
4.2.4 Tunel细胞凋亡检测 | 第46页 |
4.2.5 CCK-8检测细胞活力 | 第46页 |
4.2.6 MDA含量测定 | 第46页 |
4.2.7 SOD活力测定 | 第46页 |
4.2.8 GSH-Px活力测定 | 第46页 |
4.2.9 JC-1染色 | 第46页 |
4.2.10 AO染色 | 第46页 |
4.2.11 细胞总RNA提取 | 第46页 |
4.2.12 反转录及实时定量PCR | 第46页 |
4.2.13 细胞总蛋白提取 | 第46页 |
4.2.14 Western Blot检测 | 第46页 |
4.3 数据统计及分析 | 第46-47页 |
4.4 结果与分析 | 第47-53页 |
4.4.1 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞的抗氧化应激作用 | 第47-49页 |
4.4.2 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞线粒体的影响 | 第49-51页 |
4.4.3 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞溶酶体膜通透性的影响 | 第51-52页 |
4.4.4 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞凋亡基因和蛋白的影响 | 第52-53页 |
4.5 讨论 | 第53-54页 |
4.6 小结 | 第54-55页 |
第五章 结论、创新点及进一步的研究内容 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |