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脂联素修复鸡骨骼肌细胞氧化损伤的分子机制研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 脂肪细胞因子对肌肉的调控研究进展第11-13页
        1.1.1 脂肪组织的内分泌功能第11-12页
        1.1.2 脂肪细胞因子对肌肉功能的调控作用第12-13页
    1.2 脂联素概述第13-16页
        1.2.1 脂联素的发现第13-14页
        1.2.2 脂联素的结构和功能第14-16页
    1.3 细胞氧化损伤机制研究进展第16-21页
        1.3.1 氧化应激第16页
        1.3.2 脂联素对氧化应激损伤的修复作用第16-17页
        1.3.3 氧化损伤过程中溶酶体-线粒体轴第17-19页
        1.3.4 p53与氧化损伤第19-21页
    1.4 本试验研究目的和意义第21-22页
第二章 鸡骨骼肌卫星细胞分离、培养、鉴定及氧化应激模型构建第22-32页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 试验动物第22页
        2.1.2 试验试剂和耗材第22页
        2.1.3 试验设备仪器第22-23页
    2.2 试验设计与方法第23-27页
        2.2.1 试验设计第23页
        2.2.2 骨骼肌卫星细胞的分离、纯化和培养第23页
        2.2.3 骨骼肌卫星细胞的传代、冻存和复苏第23-24页
        2.2.4 骨骼肌卫星细胞的鉴定第24页
        2.2.5 DCFH-DA检测细胞ROS第24-25页
        2.2.6 Tunel细胞凋亡检测第25页
        2.2.7 CCK-8检测细胞活力第25页
        2.2.8 MDA含量测定第25-26页
        2.2.9 SOD活力测定第26-27页
        2.2.10 GSH-Px活力测定第27页
    2.3 数据统计及分析第27页
    2.4 结果与分析第27-30页
        2.4.1 骨骼肌卫星细胞的形态第27-28页
        2.4.2 骨骼肌卫星细胞的鉴定第28页
        2.4.3 ROS免疫荧光检测第28-29页
        2.4.4 Tunel细胞凋亡检测第29页
        2.4.5 CCK-8、MDA、SOD、GSH-Px含量检测第29-30页
    2.5 讨论第30-31页
    2.6 小结第31-32页
第三章 脂联素对氧化应激鸡骨骼肌卫星细胞中溶酶体及线粒体损伤的修复作用第32-45页
    3.1 材料第32-33页
        3.1.1 试验材料第32页
        3.1.2 试验试剂和耗材第32-33页
        3.1.3 试验设备仪器第33页
    3.2 试验设计与方法第33-38页
        3.2.1 试验设计第33页
        3.2.2 骨骼肌卫星细胞的培养第33页
        3.2.3 DCFH-DA检测细胞ROS第33页
        3.2.4 Tunel细胞凋亡检测第33页
        3.2.5 CCK-8检测细胞活力第33页
        3.2.6 MDA含量测定第33页
        3.2.7 SOD活力测定第33页
        3.2.8 GSH-Px活力测定第33页
        3.2.9 JC-1染色第33-34页
        3.2.10 AO染色第34页
        3.2.11 细胞总RNA提取第34-35页
        3.2.12 反转录及实时定量PCR第35-36页
        3.2.13 细胞总蛋白提取第36页
        3.2.14 Western Blot检测第36-38页
            3.2.14.1 蛋白质电泳第36-37页
            3.2.14.2 转膜第37页
            3.2.14.3 化学发光显影,自动曝光第37-38页
    3.3 数据统计及分析第38页
    3.4 结果与分析第38-42页
        3.4.1 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞损伤的修复作用第38-40页
        3.4.2 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞线粒体的影响第40-41页
        3.4.3 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞溶酶体膜通透性的影响第41-42页
        3.4.4 脂联素对氧化应激骨骼肌卫星细胞凋亡相关因子的影响第42页
    3.5 讨论第42-44页
    3.6 小结第44-45页
第四章 P53参与脂联素修复鸡骨骼肌卫星细胞氧化应激机制研究第45-55页
    4.1 材料第45页
        4.1.1 试验材料第45页
        4.1.2 试验试剂和耗材第45页
        4.1.3 试验设备仪器第45页
    4.2 试验设计与方法第45-46页
        4.2.1 试验设计第45-46页
        4.2.2 骨骼肌卫星细胞的培养第46页
        4.2.3 DCFH-DA检测细胞ROS第46页
        4.2.4 Tunel细胞凋亡检测第46页
        4.2.5 CCK-8检测细胞活力第46页
        4.2.6 MDA含量测定第46页
        4.2.7 SOD活力测定第46页
        4.2.8 GSH-Px活力测定第46页
        4.2.9 JC-1染色第46页
        4.2.10 AO染色第46页
        4.2.11 细胞总RNA提取第46页
        4.2.12 反转录及实时定量PCR第46页
        4.2.13 细胞总蛋白提取第46页
        4.2.14 Western Blot检测第46页
    4.3 数据统计及分析第46-47页
    4.4 结果与分析第47-53页
        4.4.1 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞的抗氧化应激作用第47-49页
        4.4.2 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞线粒体的影响第49-51页
        4.4.3 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞溶酶体膜通透性的影响第51-52页
        4.4.4 p53参与脂联素对骨骼肌卫星细胞凋亡基因和蛋白的影响第52-53页
    4.5 讨论第53-54页
    4.6 小结第54-55页
第五章 结论、创新点及进一步的研究内容第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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