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一株红球菌(Rhodococcus sp.strain p52)二噁英降解质粒的接合转移、稳定性及降解功能研究

摘要第12-14页
ABSTRACT第14-15页
第一章 前言第16-25页
    1 研究背景第16-21页
        1.1 二噁英类化合物及其危害第16页
        1.2 环境中二噁英类污染物的来源第16-19页
            1.2.1 焚烧排放的二噁英第16-17页
            1.2.2 造纸业排放的二噁英第17-18页
            1.2.3 冶金工业排放的二噁英第18页
            1.2.4 电子垃圾拆解排放的二噁英第18页
            1.2.5 生物质燃烧第18-19页
            1.2.6 含氯化学品和消费品的生产和使用第19页
            1.2.7 其他人类活动第19页
        1.3 环境中二噁英类化合物的处理第19-21页
            1.3.1 物理法处理二噁英类化合物第19-20页
            1.3.2 化学法处理二噁英类化合物第20页
            1.3.3 生物法处理二噁英类化合物第20-21页
    2 生物强化处理二噁英类污染物第21-25页
        2.1 二噁英类物质的生物降解研究现状第21页
        2.2 基因水平转移在生物强化中的作用第21-22页
            2.2.1 基因水平转移第21-22页
            2.2.2 基因水平转移的机理第22页
            2.2.3 基因水平转移的影响因素第22页
        2.3 质粒的生态学效应第22-24页
            2.3.1 质粒的定义第22-23页
            2.3.2 降解质粒第23页
            2.3.3 二噁英类降解质粒的研究现状第23-24页
        2.4 本论文的研究目的和意义第24-25页
第二章 降解质粒pDF01、pDF02接合转移性研究第25-44页
    2.1 材料与方法第25-28页
        2.1.1 主要仪器第25页
        2.1.2 主要试剂及配制第25-26页
        2.1.3 主要培养基第26-27页
        2.1.4 实验菌株第27-28页
    2.2 实验方法第28-33页
        2.2.1 平板接合实验第28-29页
        2.2.2 接合菌株目的基因的菌落PCR检测第29-30页
        2.2.3 质粒DNA提取第30-31页
        2.2.5 接合子质粒Southern杂交验证第31页
        2.2.6 接合子的荧光原位杂交第31-33页
        2.2.7 质粒pDF01、pDF02全序列分析第33页
    2.3 结果与讨论第33-42页
        2.3.1 二噁英降解质粒pDF01、pDF02的序列特征第33-36页
        2.3.2 二噁英降解质粒pDF01、pDF02从供体菌向不同受体菌中的接合转移第36-38页
        2.3.3 铜绿假单胞菌接合子中二噁英降解质粒pDF01、pDF02的验证第38-41页
        2.3.4 铜绿假单胞菌接合子细胞中降解质粒pDF01/pDF02的检测第41-42页
    2.4 小结第42-44页
第三章 降解质粒pDF01、pDF02稳定性研究第44-50页
    3.1 材料与方法第44-45页
        3.1.1 主要仪器第44页
        3.1.2 主要试剂第44页
        3.1.3 菌株及培养条件第44-45页
    3.2 实验方法第45-46页
        3.2.1 P.aeruginosa和接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)的生长繁殖比较第45页
        3.2.2 接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)质粒的遗传稳定性研究第45-46页
    3.3 结果第46-49页
        3.3.1 P.aeruginosa和接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)的生长曲线第46-48页
        3.3.2 接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)质粒的遗传稳定性第48-49页
    3.4 小结第49-50页
第四章 降解质粒pDF01、pDF02表达性能研究第50-58页
    4.1 材料与方法第50-51页
        4.1.1 主要仪器第50页
        4.1.2 主要试剂第50-51页
        4.1.3 菌株及培养条件第51页
    4.2 实验方法第51-53页
        4.2.1 降解实验设计第51页
        4.2.2 菌体生长定量第51-52页
        4.2.3 底物的定量检测第52-53页
    4.3 结果第53-56页
        4.3.1 接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)对二苯并呋喃的利用与生长第53-54页
        4.3.2 接合子P.aeruginosa (pDF01,pDF02)对氯代二苯并呋喃的利用与生长第54-56页
    4.4 小结第56-58页
第五章 基于降解质粒pDF01、pDF02转移的生物强化应用研究第58-68页
    5.1 材料与方法第58-59页
        5.1.1 主要仪器第58页
        5.1.2 主要试剂第58-59页
        5.1.3 菌株及培养条件第59页
    5.2 实验方法第59-61页
        5.2.1 二噁英降解质粒在活性污泥菌群中接合转移实验设计第59-60页
        5.2.2 定量分析方法第60页
        5.2.3 接合子鉴定第60页
        5.2.4 接合菌株目的基因检测第60页
        5.2.5 接和子质粒DNA提取及Southern杂交第60页
        5.2.6 接合子对二苯并呋喃降解能力测试第60-61页
    5.3 结果与讨论第61-67页
        5.3.1 二噁英降解质粒pDF01和pDF02在活性污泥菌群中接合接合转移性能第61-63页
        5.3.2 降解体系中接合子分离鉴定第63-65页
        5.3.3 Arthrobacter sp.接合子中二噁英降解质粒pDF01、pDF02的检测第65-66页
        5.3.4 Arthrobacter sp.接合子利用二苯并呋喃生长测试第66-67页
    5.4 小结第67-68页
第六章 结论与建议第68-70页
参考文献第70-80页
致谢第80-82页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第82-83页
学位论文评阅及答辩情况表第83页

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