摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第9-16页 |
1 蓝舌病流行状况 | 第9-10页 |
1.1 国外流行状况 | 第9-10页 |
1.2 国内流行状况 | 第10页 |
2 流行病学 | 第10-11页 |
3 BTV病原学 | 第11-13页 |
3.1 BTV的结构 | 第11页 |
3.2 BTV结构蛋白 | 第11-12页 |
3.2.1 外壳蛋白VP2和VP5 | 第11页 |
3.2.2 内衣壳蛋白VP3和VP7 | 第11-12页 |
3.2.3 微量蛋白VP1、VP4和VP6 | 第12页 |
3.3 非结构蛋白 | 第12-13页 |
3.4 病毒特性 | 第13页 |
4 发病机理与免疫应答 | 第13页 |
5 临床症状和病理变化 | 第13-14页 |
6 诊断 | 第14-15页 |
6.1 临床诊断 | 第14页 |
6.2 实验室诊断 | 第14-15页 |
6.2.1 分子生物学检测 | 第14页 |
6.2.2 血清学检测方法 | 第14-15页 |
7 防控措施 | 第15页 |
8 研究目的与意义 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-30页 |
1 材料 | 第16-18页 |
1.1 试验样品、鸡胚与细胞 | 第16页 |
1.2 主要设备和仪器 | 第16-17页 |
1.3 试验主要试剂 | 第17页 |
1.3.1 C-ELISA主要试剂 | 第17页 |
1.3.2 细胞培养相关试剂 | 第17页 |
1.3.3 核酸电泳相关试剂 | 第17页 |
1.3.4 病毒核酸鉴定相关试剂 | 第17页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第17-18页 |
1.5 引物的合成 | 第18页 |
2 方法 | 第18-30页 |
2.1 湖北省山羊BTV清流行病学调查 | 第18-21页 |
2.1.1 样品及信息的采集 | 第18-19页 |
2.1.2 样品处理 | 第19-20页 |
2.1.3 相关性分析方法 | 第20-21页 |
2.2 监控点的设立与监测 | 第21页 |
2.2.1 监控点的选择 | 第21页 |
2.2.2 监控动物群设置 | 第21页 |
2.2.3 样品采集 | 第21页 |
2.2.4 抗体监测方法 | 第21页 |
2.3 病毒分离 | 第21-24页 |
2.3.1 接种样品的处理 | 第21页 |
2.3.2 鸡胚的准备 | 第21-22页 |
2.3.3 鸡胚接种 | 第22页 |
2.3.4 鸡胚收获 | 第22-23页 |
2.3.5 细胞接种 | 第23-24页 |
2.3.6 病毒分离物保存 | 第24页 |
2.4 病毒鉴定 | 第24-30页 |
2.4.1 细胞分离物RNA提取 | 第24-25页 |
2.4.2 PCR扩增 | 第25-26页 |
2.4.3 PCR产物胶回收 | 第26-27页 |
2.4.4 载体连接 | 第27页 |
2.4.5 感受态细胞DH5α的制备(CaCl2法) | 第27页 |
2.4.6 DH5α感受态细胞的转化 | 第27-28页 |
2.4.7 质粒的提取 | 第28页 |
2.4.8 酶切鉴定 | 第28页 |
2.4.9 序列分析 | 第28-30页 |
试验结果 | 第30-38页 |
1 湖北省山羊BTV血清学检测结果 | 第30-32页 |
1.1 BTV抗体检测结果 | 第30页 |
1.2 相关性分析结果 | 第30-32页 |
1.2.1 地理位置与血清阳性率相关性分析 | 第30页 |
1.2.2 气候与血清阳性率相关性分析 | 第30-32页 |
2 监控动物抗体检测结果 | 第32-33页 |
3 病毒分离结果 | 第33-35页 |
3.1 鸡胚接毒结果 | 第33-34页 |
3.2 细胞接毒结果 | 第34-35页 |
4 病毒鉴定结果 | 第35-38页 |
4.1 PCR扩增 | 第35页 |
4.2 酶切鉴定 | 第35-36页 |
4.3 基因序列分析 | 第36-37页 |
4.4 基因进化分析 | 第37-38页 |
讨论 | 第38-40页 |
结论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
Abstract | 第46-47页 |
致谢 | 第48页 |