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利用昆虫免疫负调控因子serpin提高球孢白僵菌毒力

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·昆虫病原真菌的研究概况第13-14页
   ·昆虫病原真菌的改良及应用第14-16页
     ·提高昆虫病原真菌杀虫毒力第15-16页
     ·提高昆虫病原真菌的抗逆性第16页
     ·改变昆虫病原真菌的寄主范围第16页
   ·Serpin蛋白超家族的研究进展第16-18页
     ·简介第16-17页
     ·Serpin的结构特点第17-18页
     ·Serpin的生物学功能第18页
   ·Serpin在昆虫先天免疫系统中的功能第18-21页
     ·昆虫先天免疫应答第18-19页
     ·先天性免疫信号通路第19-20页
     ·酚氧化酶(PO)级联系统介导的昆虫黑化反应第20-21页
   ·研究目的和意义第21-23页
第二章 引言第23-25页
   ·研究背景和意义第23-24页
   ·技术路线第24-25页
第三章 材料与方法第25-37页
   ·实验材料第25-28页
     ·供试菌株第25页
     ·生测用虫第25页
     ·质粒载体第25页
     ·主要化学试剂第25-26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·主要缓冲液与配方第26-27页
     ·主要培养基第27-28页
     ·实验中使用的引物第28页
   ·实验方法第28-37页
     ·Bbsp:Spn43Ac基因超量表达载体的构建第28-29页
     ·大肠杆菌的转化第29页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及转化第29-30页
     ·农杆菌介导球孢白僵菌的遗传转化第30页
     ·Bbsp:Spn43Ac超量表达菌株的筛选第30页
     ·Bbsp:Spn43Ac基因表达检测第30-31页
     ·Bbsp:Spn43Ac-1菌株菌落形态的观察第31页
     ·观察Bbsp:Spn43Ac-1菌株在蝉翅上的生长第31页
     ·毒力测定第31页
     ·检测Bbsp:Spn43Ac-1菌株在试虫血淋巴中虫菌体的增殖第31页
     ·原核表达蛋白pGEX-6p-Spn43Ac载体的构建第31-32页
     ·GST:Spn43Ac蛋白的原核表达及纯化第32页
     ·Western Blot第32-33页
     ·CDEP-1毕赤酵母的诱导表达第33页
     ·检测GST:Spn43Ac蛋白对蛋白酶CDEP-1的影响第33-34页
     ·昆虫血淋巴内酚氧化酶(PO)的酶活测定第34页
     ·检测GST:Spn43Ac蛋白对酚氧化酶(PO)活性的影响第34-35页
     ·统计分析第35-37页
第四章 结果与分析第37-49页
   ·Bbsp:Spn43Ac基因的真菌表达载体构建第37-38页
   ·超量表达Bbsp:Spn43Ac转化子的筛选第38页
   ·Spn43Ac在转化子中的表达分析第38-39页
   ·表达Bbsp:Spn43Ac不会影响真菌的生长第39-42页
     ·Bbsp:Spn43Ac-1菌株的表型分析第39页
     ·表达Bbsp:Spn43Ac不会影响真菌在蝉翅上的萌发及生长第39-40页
     ·GST:Spn43Ac蛋白不会影响昆虫体壁降解酶CDEP-1的活性第40-42页
   ·Bbsp:Spn43Ac-1菌株毒力测定结果第42-43页
   ·真菌在昆虫血淋巴中的增殖第43-45页
   ·昆虫血淋巴内酚氧化酶(PO)的酶活测定第45页
   ·GST:Spn43Ac蛋白对酚氧化酶(PO)活性的影响第45-49页
第五章 讨论第49-53页
   ·表达Bbsp:Spn43Ac提高球孢白僵菌毒力第49页
   ·表达Bbsp:Spn43Ac不会影响菌株的萌发和生长第49-50页
   ·表达Spn43Ac抑制昆虫酚氧化酶活性第50-53页
第六章 结论第53-55页
参考文献第55-61页
附录1 英文缩写第61-63页
附录2 在读期间获得的成果第63-65页
致谢第65-66页

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