| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 草菇的生物学特性及食药用价值 | 第13-16页 |
| ·学名及分类地位 | 第13页 |
| ·形态特征与生态习性 | 第13页 |
| ·草菇生长的环境条件 | 第13-15页 |
| ·营养 | 第13-14页 |
| ·温度 | 第14页 |
| ·水分和空气湿度 | 第14页 |
| ·酸碱度(pH) | 第14-15页 |
| ·空气 | 第15页 |
| ·光照 | 第15页 |
| ·草菇采后生理变化与保鲜 | 第15-16页 |
| ·草菇食药用价值 | 第16页 |
| 2 低温胁迫反应的生理应答研究进展 | 第16-20页 |
| ·低温胁迫对细胞膜的影响 | 第17页 |
| ·低温胁迫对抗氧化系统,抗坏血酸-谷胱甘肽系统调控的影响 | 第17-19页 |
| ·低温胁迫下草菇低温应答机制研究 | 第19-20页 |
| 3 实时荧光定量PCR技术 | 第20-23页 |
| ·RT-PCR的定量方法 | 第21-22页 |
| ·绝对定量 | 第21页 |
| ·相对定量 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR的检测方法 | 第22-23页 |
| ·SYBR Green Ⅰ荧光染料法 | 第22页 |
| ·Taqman探针法 | 第22页 |
| ·分子信标法 | 第22-23页 |
| 4 本研究研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 草菇低温胁迫下电导率、丙二醛含量变化及恢复生长速度的分析 | 第25-35页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第25-26页 |
| ·实验菌株 | 第25页 |
| ·化学试剂 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-28页 |
| ·培养基的配制 | 第26页 |
| ·草菇受低温伤害程度的电导率测定方法 | 第26-27页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝恢复生长速度的测定方法 | 第27-28页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝体丙二醛(MDA)含量的测定方法 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·草菇在低温胁迫下电导率变化分析 | 第28-29页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝恢复生长分析 | 第29-31页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝体丙二醛含量变化 | 第31页 |
| 4 分析讨论 | 第31-33页 |
| 5 小结 | 第33-35页 |
| 第三章 草菇低温胁迫下抗氧化系统中关键酶的基因相对表达量的变化分析 | 第35-59页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第35-36页 |
| ·实验菌株 | 第35页 |
| ·化学试剂 | 第35-36页 |
| ·仪器与设备 | 第36页 |
| 2 实验方法 | 第36-43页 |
| ·培养基的配制 | 第36页 |
| ·草菇菌丝的培养和处理 | 第36-37页 |
| ·草菇菌丝RNA提取与反转录 | 第37-39页 |
| ·目的基因序列的生物信息学分析和编码区序列的获得 | 第39页 |
| ·引物序列 | 第39页 |
| ·目的片段的扩增 | 第39-40页 |
| ·标准品质粒的制备 | 第40-42页 |
| ·质粒标准品稀释曲线的构建 | 第42-43页 |
| ·荧光定量方法的选择和基因的RT-PCR | 第43页 |
| 3 实验结果 | 第43-54页 |
| ·草菇菌丝RNA的提取效果及目的片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝抗氧化系统关键酶基因的表达变化分析 | 第44-54页 |
| ·铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的相对表达变化分析 | 第44-47页 |
| ·锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因的相对表达变化分析 | 第47-49页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)基因的相对表达变化分析 | 第49-52页 |
| ·谷胱甘肽还原酶(GR)基因的相对表达变化分析 | 第52-54页 |
| 4 分析讨论 | 第54-56页 |
| 5 小结 | 第56-59页 |
| 第四章 草菇低温胁迫下抗氧化系统中关键酶的活性与序列分析 | 第59-83页 |
| 1 材料、试剂与仪器 | 第59-60页 |
| ·实验菌株 | 第59页 |
| ·化学试剂 | 第59-60页 |
| ·仪器与设备 | 第60页 |
| 2 实验方法 | 第60-62页 |
| ·培养基的配制 | 第60页 |
| ·草菇菌丝的培养和处理 | 第60页 |
| ·抗氧化酶系统相关酶活性的测定 | 第60-62页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定方法 | 第60-61页 |
| ·过氧化氢酶(CAT)活性的测定方法 | 第61页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定方法 | 第61-62页 |
| ·谷胱甘肽还原酶(GR)活性的测定方法 | 第62页 |
| ·粗酶液中蛋白含量的测定 | 第62页 |
| 3 实验结果 | 第62-78页 |
| ·草菇菌丝细胞内抗氧化酶序列分析 | 第62-75页 |
| ·Cu/Zn-SOD序列比对及进化树分析 | 第62-65页 |
| ·Mn-SOD序列比对及进化树分析 | 第65-67页 |
| ·CAT序列比对及进化树分析 | 第67-71页 |
| ·GR序列比对及进化树分析 | 第71-75页 |
| ·低温胁迫下草菇菌丝抗氧化酶活性的分析 | 第75-78页 |
| ·SOD活性的变化分析 | 第75页 |
| ·CAT活性的变化分析 | 第75-76页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的变化分析 | 第76-77页 |
| ·GR活性的变化分析 | 第77-78页 |
| 4 分析讨论 | 第78-80页 |
| 5 小结 | 第80-83页 |
| 第五章 全文讨论与总结 | 第83-87页 |
| 附录 | 第87-95页 |
| 一 文中缩写 | 第87-88页 |
| 二 基因序列信息 | 第88-92页 |
| 三 氨基酸序列信息 | 第92-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 硕士期间申请专利和发表的文章 | 第103页 |
