摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要英文缩写词 | 第8-12页 |
第1章 绪论 | 第12-18页 |
·艾滋病简介 | 第12页 |
·艾滋病疫苗简介 | 第12-14页 |
·DNA疫苗 | 第13页 |
·腺病毒载体疫苗 | 第13-14页 |
·佐剂在艾滋病疫苗中的应用 | 第14-18页 |
·TLR激动剂佐剂 | 第14-16页 |
·细胞因子佐剂 | 第16-18页 |
第2章 表达SIV gag基因的Ad5F35载体疫苗的构建和鉴定 | 第18-30页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·质粒、菌株和细胞 | 第18页 |
·试剂 | 第18页 |
·主要实验仪器 | 第18-19页 |
·引物合成 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·基础实验方法 | 第19-21页 |
·PCR 产物回收步骤 | 第19-20页 |
·质粒小量提取步骤 | 第20页 |
·琼脂糖凝胶产物回收步骤 | 第20-21页 |
·表达SIV gag基因的穿梭质粒pshuttle-SIV gag的构建 | 第21-22页 |
·重组腺病毒Ad5F35-SIVgag的构建 | 第22页 |
·重组腺病毒Ad5F35-SIVgag的包装 | 第22-23页 |
·rAd5F35-SIV gag重组腺病毒的传代扩增及纯化 | 第23页 |
·重组腺病毒滴度的测定 | 第23-24页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第24-25页 |
·实验结果 | 第25-27页 |
·表达SIV gag基因的穿梭质粒pshuttle-SIV gag的构建 | 第25-26页 |
·重组腺病毒Ad5F35-SIV gag的构建及鉴定 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-30页 |
第3章 表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35疫苗在小鼠体内联合免疫研究 | 第30-40页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·疫苗及实验动物 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·rAd5F35-SIV gag疫苗的小鼠药效学研究 | 第31页 |
·表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35疫苗在小鼠体内联合免疫方案203.2.3 免疫小鼠血清的分离 | 第31页 |
·免疫小鼠血清的分离 | 第31-32页 |
·免疫小鼠淋巴细胞的分离 | 第32页 |
·Elispot法检测免疫小鼠诱导的SIV gag特异性细胞免疫反应 | 第32-33页 |
·三载体疫苗联合免疫中单独免疫Ad5及Ad5F35疫苗组小鼠血清腺病毒中和抗体实验 | 第33-34页 |
·实验结果 | 第34-37页 |
·rAd5F35-SIV gag疫苗的小鼠药效学研究ELISPOT结果 | 第34-35页 |
·表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35三载体疫苗联合免疫的ELISPOT结果 | 第35-36页 |
·三载体疫苗联合免疫中单独免疫Ad5及Ad5F35疫苗组小鼠血清腺病毒中和抗体实验结果 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-40页 |
第4章 IL-7、IL-21基因佐剂及Poly(I:C)、CpG ODN对Ad5-HIVenv疫苗的免疫效果研究 | 第40-52页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·疫苗、细胞、质粒及实验动物 | 第40页 |
·试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·试验方法 | 第41-45页 |
·基础试验方法 | 第41-42页 |
·表达白细胞介素 7、21的质粒pVR-IL7、pVR-IL21的构建 | 第42页 |
·表达白细胞介素 7、21的质粒pVR-IL7、pVR-IL21的鉴定 | 第42-43页 |
·Ad5-HIVenv疫苗添加佐剂的小鼠分组及免疫 | 第43-44页 |
·免疫小鼠的淋巴细胞的分离和血清分离 | 第44页 |
·ELISPOT检测免疫小鼠HIV-1 env特异性细胞免疫反应 | 第44页 |
·免疫小鼠血清中gp120、gp41的抗体滴度检测 | 第44-45页 |
·CCK-8 法检测免疫小鼠HIV-1 env特异性淋巴细胞增殖反应 | 第45页 |
·实验结果 | 第45-50页 |
·pVR-IL7、pVR-IL21质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
·pVR-IL7、pVR-IL21质粒的western blot鉴定 | 第46-47页 |
·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠ELISPOT结果 | 第47-48页 |
·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠ELISA结果 | 第48-49页 |
·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠CCK-8 结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |