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表达SIV及HIV基因的多载体疫苗联合应用的免疫策略及相关佐剂研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
主要英文缩写词第8-12页
第1章 绪论第12-18页
   ·艾滋病简介第12页
   ·艾滋病疫苗简介第12-14页
     ·DNA疫苗第13页
     ·腺病毒载体疫苗第13-14页
   ·佐剂在艾滋病疫苗中的应用第14-18页
     ·TLR激动剂佐剂第14-16页
     ·细胞因子佐剂第16-18页
第2章 表达SIV gag基因的Ad5F35载体疫苗的构建和鉴定第18-30页
   ·实验材料第18-19页
     ·质粒、菌株和细胞第18页
     ·试剂第18页
     ·主要实验仪器第18-19页
     ·引物合成第19页
   ·实验方法第19-25页
     ·基础实验方法第19-21页
       ·PCR 产物回收步骤第19-20页
       ·质粒小量提取步骤第20页
       ·琼脂糖凝胶产物回收步骤第20-21页
     ·表达SIV gag基因的穿梭质粒pshuttle-SIV gag的构建第21-22页
     ·重组腺病毒Ad5F35-SIVgag的构建第22页
     ·重组腺病毒Ad5F35-SIVgag的包装第22-23页
     ·rAd5F35-SIV gag重组腺病毒的传代扩增及纯化第23页
     ·重组腺病毒滴度的测定第23-24页
     ·重组腺病毒的鉴定第24-25页
   ·实验结果第25-27页
     ·表达SIV gag基因的穿梭质粒pshuttle-SIV gag的构建第25-26页
     ·重组腺病毒Ad5F35-SIV gag的构建及鉴定第26-27页
   ·讨论第27-28页
   ·小结第28-30页
第3章 表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35疫苗在小鼠体内联合免疫研究第30-40页
   ·实验材料第30-31页
     ·疫苗及实验动物第30页
     ·试剂第30页
     ·主要仪器第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·rAd5F35-SIV gag疫苗的小鼠药效学研究第31页
     ·表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35疫苗在小鼠体内联合免疫方案203.2.3 免疫小鼠血清的分离第31页
     ·免疫小鼠血清的分离第31-32页
     ·免疫小鼠淋巴细胞的分离第32页
     ·Elispot法检测免疫小鼠诱导的SIV gag特异性细胞免疫反应第32-33页
     ·三载体疫苗联合免疫中单独免疫Ad5及Ad5F35疫苗组小鼠血清腺病毒中和抗体实验第33-34页
   ·实验结果第34-37页
     ·rAd5F35-SIV gag疫苗的小鼠药效学研究ELISPOT结果第34-35页
     ·表达SIV gag的DNA、Ad5、Ad5F35三载体疫苗联合免疫的ELISPOT结果第35-36页
     ·三载体疫苗联合免疫中单独免疫Ad5及Ad5F35疫苗组小鼠血清腺病毒中和抗体实验结果第36-37页
   ·讨论第37-38页
   ·小结第38-40页
第4章 IL-7、IL-21基因佐剂及Poly(I:C)、CpG ODN对Ad5-HIVenv疫苗的免疫效果研究第40-52页
   ·实验材料第40-41页
     ·疫苗、细胞、质粒及实验动物第40页
     ·试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·试验方法第41-45页
     ·基础试验方法第41-42页
     ·表达白细胞介素 7、21的质粒pVR-IL7、pVR-IL21的构建第42页
     ·表达白细胞介素 7、21的质粒pVR-IL7、pVR-IL21的鉴定第42-43页
     ·Ad5-HIVenv疫苗添加佐剂的小鼠分组及免疫第43-44页
     ·免疫小鼠的淋巴细胞的分离和血清分离第44页
     ·ELISPOT检测免疫小鼠HIV-1 env特异性细胞免疫反应第44页
     ·免疫小鼠血清中gp120、gp41的抗体滴度检测第44-45页
     ·CCK-8 法检测免疫小鼠HIV-1 env特异性淋巴细胞增殖反应第45页
   ·实验结果第45-50页
     ·pVR-IL7、pVR-IL21质粒的酶切鉴定第45-46页
     ·pVR-IL7、pVR-IL21质粒的western blot鉴定第46-47页
     ·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠ELISPOT结果第47-48页
     ·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠ELISA结果第48-49页
     ·Ad5-HIV env疫苗添加佐剂的小鼠CCK-8 结果第49-50页
   ·讨论第50-51页
   ·小结第51-52页
结论第52-54页
参考文献第54-58页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第58-60页
致谢第60页

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