| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 副猪嗜血杆菌的研究进展 | 第11-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌的生物学特性 | 第11页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的研究现状 | 第11-13页 |
| ·副猪嗜血杆菌病流行病学 | 第11页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的发病机理 | 第11-12页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的临床症状 | 第12页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的病理变化 | 第12页 |
| ·副猪嗜血杆菌病的诊治 | 第12-13页 |
| ·血清型研究 | 第13页 |
| ·血清分型 | 第13页 |
| ·血清型与毒力之间的关系 | 第13页 |
| ·毒力因子 | 第13-16页 |
| ·菌毛 | 第14页 |
| ·荚膜 | 第14页 |
| ·脂多糖 | 第14页 |
| ·外膜蛋白 | 第14页 |
| ·神经氨酸酶 | 第14-15页 |
| ·转铁蛋白 | 第15页 |
| ·毒力相关三聚自转运载体 | 第15页 |
| ·其他毒力因子相关研究 | 第15-16页 |
| 2 抑制性差减杂交技术 | 第16-21页 |
| ·抑制性差减杂交技术原理 | 第16-17页 |
| ·抑制性差减杂交技术流程 | 第17-18页 |
| ·基因组的酶切 | 第17页 |
| ·接头的连接 | 第17页 |
| ·两轮差减杂交 | 第17-18页 |
| ·两次抑制性 PCR 反应 | 第18页 |
| ·抑制性差减杂交技术注意事项 | 第18-19页 |
| ·抑制性差减杂交技术在细菌毒力研究中的应用 | 第19-21页 |
| ·毒力岛或遗传岛的发现 | 第19页 |
| ·毒力基因的筛选 | 第19-20页 |
| ·基因表达上的变化 | 第20-21页 |
| 第二章 江西省副猪嗜血杆菌的分离鉴定及血清分型 | 第21-29页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·病料及血清来源 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-23页 |
| ·副猪嗜血杆菌的分离鉴定 | 第22页 |
| ·副猪嗜血杆菌的血清分型 | 第22-23页 |
| 2 结果 | 第23-27页 |
| ·细菌的分离培养 | 第23页 |
| ·生化试验 | 第23页 |
| ·PCR 鉴定 | 第23-24页 |
| ·江西分离株概况 | 第24-26页 |
| ·血清分型结果 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 副猪嗜血杆菌潜在毒力基因的筛选 | 第29-46页 |
| 1 材料与方法 | 第29-36页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·菌株、载体和质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·Southern blot 缓冲液的配制 | 第30页 |
| ·试验用引物 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-36页 |
| ·试验菌株基因组的提取 | 第30-31页 |
| ·基因组的酶切 | 第31页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第31-35页 |
| ·差减文库的构建 | 第35页 |
| ·斑点杂交试验对差异基因的筛选 | 第35-36页 |
| ·差异基因的测序、对比、分析 | 第36页 |
| 2 结果 | 第36-43页 |
| ·基因组的提取 | 第36-37页 |
| ·酶切基因组 | 第37页 |
| ·接头的连接 | 第37-38页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第38页 |
| ·差减效率检测 | 第38页 |
| ·差减文库构建 | 第38-39页 |
| ·斑点杂交试验 | 第39-40页 |
| ·JX1108 和 HS197 斑点杂交结果 | 第39-40页 |
| ·HPJX9 和 HS81 斑点杂交结果 | 第40页 |
| ·筛选的差异片段的测序及分析 | 第40-43页 |
| ·JX1108 和 HS197 差异片段的测序及分析 | 第40-42页 |
| ·HPJX9 和 HS81 差异片段的测序及分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 副猪嗜血杆菌潜在毒力基因的分布调查 | 第46-55页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·材料 | 第46-49页 |
| ·菌株 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·引物 | 第46-49页 |
| ·方法 | 第49页 |
| ·模板的制备 | 第49页 |
| ·潜在毒力基因在参考菌株中分布调查 | 第49页 |
| ·毒力偏向性基因在江西地方分离株中的分布调查 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·潜在毒力基因在参考菌株中的分布 | 第49-52页 |
| ·JX1108 与 HS197 的潜在毒力基因在参考菌株中的分布 | 第49-51页 |
| ·HPJX9 与 HS81 的潜在毒力基因在参考菌株中的分布 | 第51-52页 |
| ·毒力偏向性基因在江西地方分离株中的分布 | 第52-53页 |
| ·JX1108 与 HS197 筛选的毒力偏向性基因在江西地方分离株中的分布 | 第52-53页 |
| ·HPJX9 与 HS81 筛选的毒力偏向性基因在江西地方分离株中的分布 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 鉴别副猪嗜血杆菌潜在毒株的二重 PCR 方法的建立 | 第55-62页 |
| 1 材料与方法 | 第55-57页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·菌种 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·引物设计 | 第55-56页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第56页 |
| ·引物特异性试验 | 第56页 |
| ·引物对参考株的检测 | 第56页 |
| ·二重 PCR 条件的优化 | 第56页 |
| ·二重 PCR 特异性试验 | 第56页 |
| ·二重 PCR 敏感性试验 | 第56页 |
| ·二重 PCR 对参考株的检测 | 第56-57页 |
| ·二重 PCR 的初步应用 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-60页 |
| ·引物特异性 | 第57页 |
| ·引物对参考株的检测 | 第57页 |
| ·二重 PCR 条件的优化 | 第57-58页 |
| ·二重 PCR 的特异性 | 第58-59页 |
| ·二重 PCR 的敏感性 | 第59页 |
| ·二重 PCR 对参考株的检测 | 第59-60页 |
| ·二重 PCR 的初步应用 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 全文总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
