摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-24页 |
1 鱼类 GH 的研究进展 | 第15-19页 |
·鱼类 GH 基因结构 | 第15-16页 |
·鱼类 GH 的生理功能 | 第16-18页 |
·鱼类 GH 的应用研究 | 第18-19页 |
2 鱼类 IGFs 研究进展 | 第19-22页 |
·鱼类 IGFs 的基因克隆和表达研究 | 第19-20页 |
·鱼类 IGFs 的功能研究 | 第20-21页 |
·鱼类 IGFs 的合成和分泌调节 | 第21-22页 |
·鱼类 IGFs 的应用研究 | 第22页 |
3 星突江鲽研究进展 | 第22-24页 |
第二章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 基因的克隆和组织表达特性 | 第24-48页 |
1 材料与方法 | 第25-29页 |
·试验用鱼及样品处理 | 第25页 |
·总 RNA 提取 | 第25页 |
·cDNA 第一链合成 | 第25页 |
·保守片段的克隆 | 第25-26页 |
·5’端和 3’端 cDNA 序列克隆 | 第26-28页 |
·序列分析 | 第28页 |
·Real-time PCR 检测 mRNA 的相对表达量 | 第28-29页 |
2 结果 | 第29-45页 |
·cDNA 全长序列 | 第29-33页 |
·氨基酸序列相似性分析 | 第33-38页 |
·系统进化分析 | 第38-41页 |
·组织表达特性分析 | 第41-45页 |
3 讨论 | 第45-48页 |
·星突江鲽 GH 的基因序列特征及组织表达特性 | 第45-46页 |
·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II 的基因序列特征及组织表达特性 | 第46-48页 |
第三章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II mRNA 在早期生长发育中的表达特性 | 第48-59页 |
1 材料与方法 | 第48-50页 |
·试验材料 | 第48-49页 |
·总 RNA 提取和 cDNA 第一链合成 | 第49-50页 |
·Real-time PCR 检测 mRNA 相对表达量 | 第50页 |
·数据统计分析 | 第50页 |
2 结果 | 第50-55页 |
·星突江鲽胚胎和早期生长特征 | 第50-52页 |
·GH mRNA 在胚胎和仔稚幼鱼生长发育中的表达水平变化 | 第52页 |
·IGF-I 和 IGF-IImRNA 在胚胎和仔稚幼鱼生长发育中的表达水平变化 | 第52-55页 |
3 讨论 | 第55-59页 |
·星突江鲽早期生长发育特征 | 第55页 |
·星突江鲽 GH mRNA 在早期生长发育中的表达特性 | 第55-56页 |
·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II mRNA 在早期生长发育中的表达特性 | 第56-59页 |
第四章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 对卵巢发育的调控机制研究 | 第59-73页 |
1 材料与方法 | 第59-61页 |
·试验用鱼及样品处理 | 第59-60页 |
·卵巢发育组织学研究 | 第60页 |
·总 RNA 提取和 cDNA 第一链合成 | 第60页 |
·Real-time PCR 检测 mRNA 相对表达量 | 第60页 |
·放射免疫法测定血浆激素含量 | 第60-61页 |
·数据统计分析 | 第61页 |
2 结果 | 第61-70页 |
·星突江鲽卵巢发育 | 第61-63页 |
·GH 在雌鱼垂体中的 mRNA 表达情况 | 第63-64页 |
·IGF-I 和 IGF-II mRNA 在雌鱼肝脏和性腺中的表达情况 | 第64-66页 |
·血浆 GH、IGF-I、E2和 T 激素的含量变化 | 第66-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
·星突江鲽卵巢发育特征 | 第70页 |
·星突江鲽 GH 对卵巢发育的调控 | 第70-71页 |
·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II 对卵巢发育的调控 | 第71-73页 |
第五章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 成熟肽的原核表达及生物活性检测 | 第73-96页 |
1 材料与方法 | 第73-78页 |
·试验材料 | 第73-75页 |
·重组质粒构建 | 第75-77页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及条件优化 | 第77页 |
·重组蛋白的 Western-blotting 验证 | 第77-78页 |
·重组蛋白的纯化和复性 | 第78页 |
·重组蛋白的生物活性检测 | 第78页 |
2 结果 | 第78-94页 |
·重组表达序列 | 第78-82页 |
·重组质粒在大肠杆菌的最适诱导条件 | 第82-88页 |
·Western-blotting 验证结果 | 第88-90页 |
·重组蛋白的纯化 | 第90-92页 |
·重组蛋白细胞水平的生物活性 | 第92-94页 |
3 讨论 | 第94-96页 |
结论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-118页 |
附录 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |