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星突江鲽生长激素和胰岛素样生长因子的生理功能及体外重组研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
引言第14-15页
第一章 文献综述第15-24页
 1 鱼类 GH 的研究进展第15-19页
   ·鱼类 GH 基因结构第15-16页
   ·鱼类 GH 的生理功能第16-18页
   ·鱼类 GH 的应用研究第18-19页
 2 鱼类 IGFs 研究进展第19-22页
   ·鱼类 IGFs 的基因克隆和表达研究第19-20页
   ·鱼类 IGFs 的功能研究第20-21页
   ·鱼类 IGFs 的合成和分泌调节第21-22页
   ·鱼类 IGFs 的应用研究第22页
 3 星突江鲽研究进展第22-24页
第二章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 基因的克隆和组织表达特性第24-48页
 1 材料与方法第25-29页
   ·试验用鱼及样品处理第25页
   ·总 RNA 提取第25页
   ·cDNA 第一链合成第25页
   ·保守片段的克隆第25-26页
   ·5’端和 3’端 cDNA 序列克隆第26-28页
   ·序列分析第28页
   ·Real-time PCR 检测 mRNA 的相对表达量第28-29页
 2 结果第29-45页
   ·cDNA 全长序列第29-33页
   ·氨基酸序列相似性分析第33-38页
   ·系统进化分析第38-41页
   ·组织表达特性分析第41-45页
 3 讨论第45-48页
   ·星突江鲽 GH 的基因序列特征及组织表达特性第45-46页
   ·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II 的基因序列特征及组织表达特性第46-48页
第三章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II mRNA 在早期生长发育中的表达特性第48-59页
 1 材料与方法第48-50页
   ·试验材料第48-49页
   ·总 RNA 提取和 cDNA 第一链合成第49-50页
   ·Real-time PCR 检测 mRNA 相对表达量第50页
   ·数据统计分析第50页
 2 结果第50-55页
   ·星突江鲽胚胎和早期生长特征第50-52页
   ·GH mRNA 在胚胎和仔稚幼鱼生长发育中的表达水平变化第52页
   ·IGF-I 和 IGF-IImRNA 在胚胎和仔稚幼鱼生长发育中的表达水平变化第52-55页
 3 讨论第55-59页
   ·星突江鲽早期生长发育特征第55页
   ·星突江鲽 GH mRNA 在早期生长发育中的表达特性第55-56页
   ·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II mRNA 在早期生长发育中的表达特性第56-59页
第四章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 对卵巢发育的调控机制研究第59-73页
 1 材料与方法第59-61页
   ·试验用鱼及样品处理第59-60页
   ·卵巢发育组织学研究第60页
   ·总 RNA 提取和 cDNA 第一链合成第60页
   ·Real-time PCR 检测 mRNA 相对表达量第60页
   ·放射免疫法测定血浆激素含量第60-61页
   ·数据统计分析第61页
 2 结果第61-70页
   ·星突江鲽卵巢发育第61-63页
   ·GH 在雌鱼垂体中的 mRNA 表达情况第63-64页
   ·IGF-I 和 IGF-II mRNA 在雌鱼肝脏和性腺中的表达情况第64-66页
   ·血浆 GH、IGF-I、E2和 T 激素的含量变化第66-70页
 3 讨论第70-73页
   ·星突江鲽卵巢发育特征第70页
   ·星突江鲽 GH 对卵巢发育的调控第70-71页
   ·星突江鲽 IGF-I 和 IGF-II 对卵巢发育的调控第71-73页
第五章 星突江鲽 GH、IGF-I 和 IGF-II 成熟肽的原核表达及生物活性检测第73-96页
 1 材料与方法第73-78页
   ·试验材料第73-75页
   ·重组质粒构建第75-77页
   ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达及条件优化第77页
   ·重组蛋白的 Western-blotting 验证第77-78页
   ·重组蛋白的纯化和复性第78页
   ·重组蛋白的生物活性检测第78页
 2 结果第78-94页
   ·重组表达序列第78-82页
   ·重组质粒在大肠杆菌的最适诱导条件第82-88页
   ·Western-blotting 验证结果第88-90页
   ·重组蛋白的纯化第90-92页
   ·重组蛋白细胞水平的生物活性第92-94页
 3 讨论第94-96页
结论第96-98页
参考文献第98-118页
附录第118-119页
致谢第119页

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