摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
目录 | 第9-12页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
·启动子研究进展 | 第12-15页 |
·启动子概述 | 第12-13页 |
·启动子的特点及其分类 | 第13-15页 |
·组成型启动子 | 第13-14页 |
·诱导型启动子 | 第14页 |
·组织特异性启动子 | 第14-15页 |
·果实特异启动子的研究进展 | 第15-17页 |
·果实特异性启动子的研究 | 第15-17页 |
·果实特异启动子的应用 | 第17页 |
·改善果实品质 | 第17页 |
·生产目的蛋白 | 第17页 |
·改良果实农艺性状 | 第17页 |
·启动子的功能鉴定方法 | 第17-19页 |
·启动子的预测功能 | 第18页 |
·启动子的功能验证 | 第18-19页 |
·点突变分析 | 第18页 |
·缺失突变分析 | 第18页 |
·瞬时表达分析 | 第18-19页 |
·稳定表达分析 | 第19页 |
·GUS 报告基因 | 第19页 |
·果胶甲酯酶抑制子 | 第19-20页 |
·Micro-Tom 番茄 | 第20页 |
·本研究的目的意义和主要内容 | 第20-22页 |
·研究的目的意义 | 第20页 |
·主要内容 | 第20-22页 |
2 优化适于 Micro‐Tom 番茄的 GUS 组织化学染色体系 | 第22-26页 |
·试验材料、试剂及仪器设备 | 第22页 |
·试验设计与方法 | 第22-23页 |
·Micro‐Tom 番茄植株及外植体的获得 | 第22-23页 |
·不同 pH 磷酸缓冲液筛选 | 第23页 |
·叶片脱色筛选 | 第23页 |
·GUS 组织化学染色 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
3 应用 GUS 瞬时表达体系初步分析目标启动子功能 | 第26-30页 |
·试验材料、试剂及仪器设备 | 第26页 |
·试验设计与方法 | 第26-28页 |
·Micro‐Tom 番茄植株及外植体的获得 | 第26页 |
·菌株和质粒 | 第26-27页 |
·外植体培养 | 第27页 |
·农杆菌菌液的制备 | 第27页 |
·外植体浸染 | 第27页 |
·GUS 组织化学染色 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
4 Micro‐Tom 番茄潮霉素遗传转化体系的建立 | 第30-35页 |
·试验材料、试剂及仪器设备 | 第30页 |
·试验设计与方法 | 第30-31页 |
·外植体的获得 | 第30页 |
·菌株与质粒 | 第30页 |
·培养基组分 | 第30-31页 |
·Micro‐Tom 番茄外植体对 Hyg 抗性试验 | 第31页 |
·转化与再生 | 第31页 |
·农杆菌菌液的制备 | 第31页 |
·外植体的浸染与筛选 | 第31页 |
·抗性芽生根培养 | 第31页 |
·转化效率的计算 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-33页 |
·Hyg 使用浓度对 Micro‐Tom 番茄愈伤组织和不定芽诱导的影响 | 第31-32页 |
·抗性芽的再生 | 第32-33页 |
·转化频率 | 第33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
·褐变对抗性芽筛选的影响 | 第33-34页 |
·外植体的长势对遗传转化效率的影响 | 第34页 |
·污染对遗传转化的影响 | 第34-35页 |
5 转基因番茄的植株鉴定及目标启动子功能分析 | 第35-40页 |
·目的基因遗传转化 Micro‐Tom 番茄 | 第35页 |
·试验设计与方法 | 第35-36页 |
·引物设计 | 第35页 |
·DNA 提取及分析检测 | 第35-36页 |
·CTAB 法提取 Micro‐Tom 番茄抗性植株叶片的 DNA | 第35-36页 |
·PCR 分子检测 | 第36页 |
·结果与分析 | 第36-38页 |
·CsPMEI 启动子转化 Micro‐Tom 番茄抗性植株的检测 | 第36-37页 |
·抗性植株 DNA 的提取分析 | 第36-37页 |
·Micro‐Tom 番茄抗性植株 PCR 检测分析 | 第37页 |
·目标启动子稳定表达分析 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
6 结语 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
附录一 | 第48-50页 |
附录二 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |