| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·植物中的钙信号 | 第14-16页 |
| ·Ca~(2+)的产生 | 第14-15页 |
| ·Ca~(2+)的转运 | 第15-16页 |
| ·植物中的钙传感器(钙结合蛋白) | 第16-18页 |
| ·钙调素(CaMs)和钙调素相似蛋白(CMLs) | 第17页 |
| ·Ca~(2+)调节的蛋白激酶 | 第17-18页 |
| ·钙依赖蛋白激酶(CDPK)研究进展 | 第18-22页 |
| ·CDPK序列结构及特性 | 第19-20页 |
| ·CDPK调控植物生长发育 | 第20页 |
| ·CDPK对非生物胁迫的响应 | 第20-21页 |
| ·CDPK对生物胁迫的响应 | 第21-22页 |
| ·CDPK对激素的响应 | 第22页 |
| ·本研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 野生草莓FvCDPK1基因的克隆及序列分析 | 第24-35页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·草莓材料 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·感受态细胞菌株 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·草莓DNA和RNA提取及纯化 | 第25页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第25-26页 |
| ·克隆测序 | 第26页 |
| ·序列和进化树分析 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·FvCDPK1克隆及序列分析 | 第27页 |
| ·FvCDPK1蛋白结构分析 | 第27-32页 |
| ·FvCDPK1进化关系及同源性分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 FvCDPK1表达模式分析 | 第35-45页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·草莓材料 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·温室材料处理及采样 | 第36页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-43页 |
| ·高温处理前后FvCDPK1表达分析 | 第37-38页 |
| ·低温处理前后FvCDPK1表达分析 | 第38页 |
| ·盐胁迫前后FvCDPK1表达分析 | 第38-40页 |
| ·ABA处理前后FvCDPK1表达分析 | 第40-41页 |
| ·SA处理前后FvCDPK1表达分析 | 第41页 |
| ·FvCDPK1在草莓中表达的组织特异性 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·FvCDPK1对生物和非生物胁迫的响应 | 第43-44页 |
| ·FvCDPK1不同组织表达特性 | 第44-45页 |
| 第四章 FvCDPK1体外表达、酶活及亚细胞定位分析 | 第45-52页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR扩增FvCDPK1基因的开放阅读框(ORF)序列 | 第46页 |
| ·FvCDPK1原核表达载体构建 | 第46页 |
| ·FvCDPK1融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 | 第46页 |
| ·FvCDPK1蛋白激酶酶活分析 | 第46-47页 |
| ·FvCDPK1亚细胞定位 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·FvCDPK1重组蛋白的表达与纯化 | 第47-48页 |
| ·FvCDPK1重组蛋白的酶活分析 | 第48-49页 |
| ·FvCDPK1亚细胞定位 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·FvCDPK1激酶活性分析 | 第51页 |
| ·FvCDPK1核定位功能分析 | 第51-52页 |
| 第五章 FvCDPK1在转基因拟南芥中的抗逆功能分析 | 第52-60页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| ·拟南芥FvCDPK1转化植株筛选 | 第53页 |
| ·FvCDPK1在转基因拟南芥株系中的表达检测 | 第53-54页 |
| ·转基因拟南芥对低温及ABA胁迫鉴定 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·FvCDPK1转化拟南芥与阳性植株获得 | 第54页 |
| ·FvCDPK1在PCR阳性植株中的表达分析 | 第54-56页 |
| ·FvCDPK1转基因拟南芥对低温的抗性分析 | 第56-57页 |
| ·FvCDPK1转基因拟南芥对ABA的响应 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 FvCDPK1在转基因草莓上的功能分析 | 第60-67页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-61页 |
| ·草莓叶片再生体系建立 | 第60-61页 |
| ·转化载体和菌株 | 第61页 |
| ·草莓叶盘法转化 | 第61页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第61页 |
| ·FvCDPK1在转化植株中的表达检测 | 第61页 |
| ·转化植株对低温抗性鉴定 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·不同激素组合对“红颜”草莓叶片不定芽再生的影响 | 第61-63页 |
| ·草莓叶片的遗传转化 | 第63页 |
| ·转化植株的检测 | 第63-64页 |
| ·转化草莓对低温的抗性分析 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第七章 FvCDPK1基因启动子活性分析 | 第67-73页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·主要仪器设备 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-68页 |
| ·FvCDPK1启动子克隆及载体构建 | 第67-68页 |
| ·瞬时转化及GUS活性分析 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-71页 |
| ·草莓FvCDPK1基因启动子克隆及序列分析 | 第68-70页 |
| ·草莓FvCDPK1基因启动子活性分析 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 第八章 结论 | 第73-75页 |
| ·结论 | 第73页 |
| ·本研究的创新点 | 第73页 |
| ·研究展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 缩略词表 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简介 | 第86-87页 |
