目 录 | 第1-5页 |
摘 要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
材料和方法 | 第10-32页 |
一、 材 料 | 第10-16页 |
1 cDNA文库 | 第10页 |
2 质粒载体(表1) | 第10页 |
3 宿主菌 | 第10页 |
4 细胞株(表2) | 第10-11页 |
5 引物(表3) | 第11页 |
6 实验材料及试剂盒 | 第11-12页 |
7 实验试剂 | 第12-15页 |
8 培养基: | 第15-16页 |
二、 主要仪器设备 | 第16-17页 |
三、 计算机分析软件 | 第17-18页 |
四、 实验方法 | 第18-32页 |
1 技术路线和实验方案 | 第18页 |
2 近全长人TCP10L基因cDNA的获得 | 第18-20页 |
3 重组质粒的构建 | 第20-21页 |
4 TCP10L基因的重组表达与蛋白纯化 | 第21-23页 |
5 TCP10L重组蛋白多克隆抗体的制备与纯化 | 第23-24页 |
6 TCP10L基因的免疫组化研究 | 第24页 |
7 细胞培养和瞬时转染 | 第24-25页 |
8 TCP10L基因的转录活性研究 | 第25页 |
9 Northern印迹杂交: | 第25-26页 |
10 TCP10L基因的酵母双杂研究 | 第26-30页 |
11 TCP10L基因与PMF1和MAD4的亚细胞定位: | 第30-32页 |
结 果 | 第32-43页 |
1 TCP10L cDNA的克隆 | 第32-33页 |
·EST-contig图的构建和cDNA序列的拼接: | 第32页 |
·近全长cDNA的克隆及鉴定: | 第32-33页 |
2 TCP10L基因的生物信息学分析 | 第33-35页 |
·TCP10L cDNA序列分析 | 第33页 |
·TCP10L基因组序列分析 | 第33-34页 |
·TCP10L基因蛋白产物分析 | 第34-35页 |
3 TCP10L基因的组织表达谱分析: | 第35-36页 |
4 TCP10L基因的重组表达与蛋白纯化 | 第36-37页 |
5 抗体的制备与纯化 | 第37-38页 |
6 TCP10L基因的免疫组化研究 | 第38-41页 |
7 TCP10L基因的转录抑制研究 | 第41页 |
8 TCP10L基因的酵母双杂交 | 第41-42页 |
9 TCP10L基因与PMF1和MAD4的细胞亚定位 | 第42-43页 |
讨 论 | 第43-47页 |
1 TCP10L基因的功能研究 | 第43-44页 |
2 人TCP10L基因的进化 | 第44-47页 |
参考文献 | 第47-62页 |
致 谢 | 第62-64页 |