| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 实验研究 | 第12-55页 |
| 第一章 八聚体蛛丝蛋白基因(8S)毛囊特异性表达载体的构建 | 第12-26页 |
| 摘要 | 第12-13页 |
| 1 实验材料 | 第13页 |
| ·主要仪器设备 | 第13页 |
| ·实验试剂 | 第13页 |
| ·质粒和菌种 | 第13页 |
| 2 实验方法 | 第13-17页 |
| ·pMD19T-PolyA克隆载体的构建 | 第14-15页 |
| ·中间克隆载体pMD19T-8S-PolyA的构建和鉴定 | 第15-16页 |
| ·毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP的构建及鉴定 | 第16-17页 |
| ·毛囊特异表达载体pCDsR-K8SP的线性化 | 第17页 |
| 3 实验结果 | 第17-23页 |
| ·pMD19T-PolyA克隆载体的构建与鉴定 | 第17-18页 |
| ·中间克隆载体pMD19T-8S-PolyA的构建与鉴定 | 第18-19页 |
| ·毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP的构建及鉴定 | 第19-21页 |
| ·毛囊特异表达载体pCDsR-K8SP的线性化 | 第21-23页 |
| 4 讨论 | 第23页 |
| 5 结论 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-26页 |
| 第二章 八聚体蛛丝蛋白基因(8S)毛囊特异性表达载体的细胞转染及鉴定 | 第26-40页 |
| 摘要 | 第26页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第26-27页 |
| ·试剂及耗材 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-32页 |
| ·小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞的培养 | 第27-28页 |
| ·小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞的G418耐受性测定及细胞转染 | 第28-29页 |
| ·转基因小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的体外筛选和扩大培养 | 第29页 |
| ·转基因小鼠表皮细胞、绒山羊成纤维细胞克隆的PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·转基因小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞mRNA水平的鉴定 | 第30-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-38页 |
| ·小鼠表皮细胞的转染及筛选结果 | 第32-34页 |
| ·绒山羊胎儿成纤维细胞的转染及筛选结果 | 第34-35页 |
| ·转基因小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞的基因组PCR鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·转基因小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞反转录PCR鉴定结果 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-40页 |
| 第三章 八聚体蛛丝蛋白(8S)转基因小鼠胚胎干细胞的获得及转基因小鼠的制备 | 第40-55页 |
| 摘要 | 第40-41页 |
| 第一节 八聚体蛛丝蛋白基因毛囊特异性表达载体转染小鼠胚胎干细胞 | 第41-48页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·试剂及耗材 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·实验培养液配制 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-45页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的培养 | 第42-43页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的G418耐受性测定及细胞转染 | 第43-44页 |
| ·转基因小鼠胚胎干细胞克隆的体外筛选和扩大培养 | 第44-45页 |
| ·转基因小鼠胚胎干细胞克隆的PCR鉴定 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-48页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的转染及筛选结果 | 第45-47页 |
| ·转基因小鼠胚胎干细胞基因组PCR鉴定结果 | 第47-48页 |
| 第二节 原核注射法8S转基因小鼠的制备 | 第48-55页 |
| 1 实验仪器与材料 | 第48页 |
| ·仪器设备 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-50页 |
| ·采集受精卵 | 第48-49页 |
| ·原核注射 | 第49页 |
| ·胚胎移植 | 第49页 |
| ·八聚体蛛丝蛋白转基因原代鼠的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-51页 |
| ·八聚体蛛丝蛋白转基因小鼠的获得 | 第50页 |
| ·八聚体蛛丝蛋白转基因小鼠PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第二部分 文献综述 | 第55-66页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 硕士期间发表文章 | 第67页 |
