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植物BAG蛋白的结构和功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
符号说明第10-11页
第一章 引言第11-29页
 第一节 植物生长发育的调控第11-13页
 第二节 植物BAG蛋白的研究第13-24页
     ·哺乳动物BAG蛋白的研究背景第13-14页
     ·植物BAG蛋白家族的发现第14-17页
     ·拟南芥BAG蛋白家族的生理意义第17-24页
 第三节 BAG蛋白的结构生物学研究背景第24-29页
     ·BAG结构域的结构生物学研究第24-26页
     ·BAG结构域与分子伴侣Hsp70/Hsc70的结合第26-29页
第二章 材料和方法第29-51页
 第一节 实验材料第29-37页
     ·研究对象第29页
     ·质粒第29-31页
     ·本文所用菌株第31-32页
     ·试剂、工具酶及耗材第32-33页
     ·主要仪器第33-34页
     ·主要溶液的配制第34-37页
 第二节 实验方法第37-51页
     ·基因克隆第37-42页
     ·蛋白的表达与纯化第42-45页
     ·蛋白质结晶第45-47页
     ·衍射数据收集和处理第47页
     ·晶体结构解析第47-49页
     ·等温滴定微量实验第49-50页
     ·GST pull-down实验第50页
     ·Western Blot实验第50页
     ·超速离心沉降速率(Sendimentation Velocity)分析实验第50-51页
第三章 AtBAG1-4 BAG结构域的结构及功能研究第51-86页
 第一节 AtBAG1-4 BAG结构域的X射线晶体学研究第51-76页
     ·AtBAG4的结构生物学研究第51-62页
     ·AtBAG1-3 BAG结构域的结构生物学研究第62-76页
 第二节 AtBAG1-4 BAG结构域与Hsc70相互作用的研究第76-78页
     ·AtBAG1-4 BAG结构域与AtHsc70-NBD的GST pull-down实验第76-77页
     ·AtBAG1-4 BAG结构域对Hsc70-NBD结合核苷酸的影响第77-78页
 第三节 AtBAG2突变体拟南芥的生理实验第78-80页
 第四节 讨论第80-86页
     ·AtBAG3-BD的晶体结构分析第80-82页
     ·AtBAG1-4 BAG结构域与动物BAG结构域的比较第82-84页
     ·AtBAG1-4:植物中的Hsc70核苷酸交换因子(Nucleotide ExchangeFactor)第84-86页
第四章 AtBAG1-4泛素样结构域与BAG结构域的关系第86-98页
 第一节 AtBAG1-UBD的结构生物学研究第86-92页
     ·AtBAG1-UBD的表达与纯化第86-87页
     ·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物晶体的生长第87-88页
     ·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物晶体的数据收集和结构解析第88-92页
 第二节 AtBAG1-ULD对BAG结构域功能的影响第92-94页
     ·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物的超速离心实验第92-93页
     ·AtBAG1-BD和AtBAG1-UBD的ITC实验第93-94页
 第三节 讨论第94-98页
     ·AtBAG1-4泛素样结构域第94-96页
     ·AtBAG蛋白与Hsc70的结合第96-98页
第五章 AtBAG5的结构生物学研究第98-119页
 第一节 AtBAG5及CaM的表达与纯化第98-101页
     ·AtBAG5-long的表达与纯化第98-100页
     ·CaM的表达与纯化第100页
     ·AtAG5-long/CaM复合物的纯化第100-101页
 第二节 AtBAG5-long单体及其与CaM复合物的结晶第101-102页
     ·AtBAG5-long单体的晶体生长第101页
     ·AtBAG5-long/CaM复合物的晶体生长第101-102页
 第三节 AtBAG5-long单体及其与CaM复合物的晶体结构解析第102-108页
     ·AtBAG5-long单体及AtBAG5-long/CaM复合物的数据收集第102-103页
     ·AtBAG5-long单体及AtBAG5-long/CaM复合物的结构解析第103-108页
 第四节 AtBAG5-long/apo-CaM复合物结构的工TC验证第108-109页
 第五节 Hsc70与AtBAG5及apo-CaM三者间的关系第109-111页
     ·Hsc70-NBD与AtBAG5-long的分子筛结合实验第109页
     ·Hsc70-NBD与AtBAG5-long的分子筛结合验及AtBAG5-long/apo-CaM复合物的ITC实验第109-111页
     ·Hsc70-NBD、AtBAG5-long及apo-CaM三者关系的超速离心实验第111页
 第六节 讨论第111-119页
     ·AtBAG5 BAG结构域的特殊性质第111-112页
     ·AtBAG5 IQ基序与apo-CaM的结合第112-115页
     ·apo-CaM的“半闭合”构象第115-117页
     ·AtBAG5与apo-CaM及Hsc70的关系第117-119页
第六章 结论第119-121页
第七章 牛免疫缺陷病毒整合酶的结构研究第121-123页
已发表结构的PDB信息第123-124页
参考文献第124-132页
致谢第132-133页
个人简历第133页

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