摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-29页 |
第一节 植物生长发育的调控 | 第11-13页 |
第二节 植物BAG蛋白的研究 | 第13-24页 |
·哺乳动物BAG蛋白的研究背景 | 第13-14页 |
·植物BAG蛋白家族的发现 | 第14-17页 |
·拟南芥BAG蛋白家族的生理意义 | 第17-24页 |
第三节 BAG蛋白的结构生物学研究背景 | 第24-29页 |
·BAG结构域的结构生物学研究 | 第24-26页 |
·BAG结构域与分子伴侣Hsp70/Hsc70的结合 | 第26-29页 |
第二章 材料和方法 | 第29-51页 |
第一节 实验材料 | 第29-37页 |
·研究对象 | 第29页 |
·质粒 | 第29-31页 |
·本文所用菌株 | 第31-32页 |
·试剂、工具酶及耗材 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·主要溶液的配制 | 第34-37页 |
第二节 实验方法 | 第37-51页 |
·基因克隆 | 第37-42页 |
·蛋白的表达与纯化 | 第42-45页 |
·蛋白质结晶 | 第45-47页 |
·衍射数据收集和处理 | 第47页 |
·晶体结构解析 | 第47-49页 |
·等温滴定微量实验 | 第49-50页 |
·GST pull-down实验 | 第50页 |
·Western Blot实验 | 第50页 |
·超速离心沉降速率(Sendimentation Velocity)分析实验 | 第50-51页 |
第三章 AtBAG1-4 BAG结构域的结构及功能研究 | 第51-86页 |
第一节 AtBAG1-4 BAG结构域的X射线晶体学研究 | 第51-76页 |
·AtBAG4的结构生物学研究 | 第51-62页 |
·AtBAG1-3 BAG结构域的结构生物学研究 | 第62-76页 |
第二节 AtBAG1-4 BAG结构域与Hsc70相互作用的研究 | 第76-78页 |
·AtBAG1-4 BAG结构域与AtHsc70-NBD的GST pull-down实验 | 第76-77页 |
·AtBAG1-4 BAG结构域对Hsc70-NBD结合核苷酸的影响 | 第77-78页 |
第三节 AtBAG2突变体拟南芥的生理实验 | 第78-80页 |
第四节 讨论 | 第80-86页 |
·AtBAG3-BD的晶体结构分析 | 第80-82页 |
·AtBAG1-4 BAG结构域与动物BAG结构域的比较 | 第82-84页 |
·AtBAG1-4:植物中的Hsc70核苷酸交换因子(Nucleotide ExchangeFactor) | 第84-86页 |
第四章 AtBAG1-4泛素样结构域与BAG结构域的关系 | 第86-98页 |
第一节 AtBAG1-UBD的结构生物学研究 | 第86-92页 |
·AtBAG1-UBD的表达与纯化 | 第86-87页 |
·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物晶体的生长 | 第87-88页 |
·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物晶体的数据收集和结构解析 | 第88-92页 |
第二节 AtBAG1-ULD对BAG结构域功能的影响 | 第92-94页 |
·AtBAG1-UBD/Hsc70-NBD复合物的超速离心实验 | 第92-93页 |
·AtBAG1-BD和AtBAG1-UBD的ITC实验 | 第93-94页 |
第三节 讨论 | 第94-98页 |
·AtBAG1-4泛素样结构域 | 第94-96页 |
·AtBAG蛋白与Hsc70的结合 | 第96-98页 |
第五章 AtBAG5的结构生物学研究 | 第98-119页 |
第一节 AtBAG5及CaM的表达与纯化 | 第98-101页 |
·AtBAG5-long的表达与纯化 | 第98-100页 |
·CaM的表达与纯化 | 第100页 |
·AtAG5-long/CaM复合物的纯化 | 第100-101页 |
第二节 AtBAG5-long单体及其与CaM复合物的结晶 | 第101-102页 |
·AtBAG5-long单体的晶体生长 | 第101页 |
·AtBAG5-long/CaM复合物的晶体生长 | 第101-102页 |
第三节 AtBAG5-long单体及其与CaM复合物的晶体结构解析 | 第102-108页 |
·AtBAG5-long单体及AtBAG5-long/CaM复合物的数据收集 | 第102-103页 |
·AtBAG5-long单体及AtBAG5-long/CaM复合物的结构解析 | 第103-108页 |
第四节 AtBAG5-long/apo-CaM复合物结构的工TC验证 | 第108-109页 |
第五节 Hsc70与AtBAG5及apo-CaM三者间的关系 | 第109-111页 |
·Hsc70-NBD与AtBAG5-long的分子筛结合实验 | 第109页 |
·Hsc70-NBD与AtBAG5-long的分子筛结合验及AtBAG5-long/apo-CaM复合物的ITC实验 | 第109-111页 |
·Hsc70-NBD、AtBAG5-long及apo-CaM三者关系的超速离心实验 | 第111页 |
第六节 讨论 | 第111-119页 |
·AtBAG5 BAG结构域的特殊性质 | 第111-112页 |
·AtBAG5 IQ基序与apo-CaM的结合 | 第112-115页 |
·apo-CaM的“半闭合”构象 | 第115-117页 |
·AtBAG5与apo-CaM及Hsc70的关系 | 第117-119页 |
第六章 结论 | 第119-121页 |
第七章 牛免疫缺陷病毒整合酶的结构研究 | 第121-123页 |
已发表结构的PDB信息 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
个人简历 | 第133页 |