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rAAV生产及质控关键工艺的优化

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第1章 引言第9-17页
   ·问题的提出第9-10页
   ·本文的研究背景及意义第10-11页
     ·研究背景第10页
     ·研究意义第10-11页
   ·国内外的研究动态第11-16页
     ·质粒 DNA 纯化的研究进展第11-14页
     ·AAV 病毒的滴度测定方法的研究进展第14-16页
   ·本文的构思第16-17页
第2章 质粒 DNA 的制备及其纯化第17-30页
   ·实验材料、试剂与仪器第17-19页
     ·实验材料第17页
     ·实验试剂第17页
     ·主要实验仪器第17-18页
     ·主要试剂的配制第18-19页
   ·实验方法第19-21页
     ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备第19页
     ·质粒转化第19页
     ·菌体的培养及碱裂解第19-20页
     ·CTAB 法纯化质粒 DNA第20-21页
     ·DEAE 阴离子柱纯化质粒 DNA第21页
   ·实验结果及分析第21-29页
     ·CTAB 法纯化质粒 DNA第21-27页
     ·DEAE 阴离子柱纯化质粒 DNA第27-29页
   ·本章小结第29-30页
第3章 质粒 DNA 纯度检测第30-40页
   ·实验材料、试剂与仪器第30-31页
     ·实验材料第30页
     ·实验试剂第30页
     ·实验仪器第30页
     ·主要试剂的配制第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·质粒 DNA 的提取第31页
     ·酶切鉴定第31页
     ·质粒 DNA 的浓度测定第31页
     ·宿主蛋白质检测第31-32页
     ·内毒素检测第32页
     ·细菌基因组 DNA 检测第32-34页
   ·实验结果及分析第34-38页
     ·酶切鉴定第34页
     ·质粒 DNA 的浓度测定第34-35页
     ·宿主蛋白质检测第35-36页
     ·内毒素检测第36页
     ·细菌基因组 DNA 检测第36-38页
   ·本章小结第38-40页
第4章 质粒 DNA 生物活性检测第40-51页
   ·实验材料、试剂与仪器第40-42页
     ·实验材料第40页
     ·实验试剂第40页
     ·实验仪器第40-41页
     ·主要试剂的配制第41-42页
   ·实验方法第42-46页
     ·质粒 DNA 的制备第42-43页
     ·体外生物活性检测第43-44页
     ·体内生物活性检测第44-46页
     ·统计学分析第46页
   ·实验结果及分析第46-50页
     ·质粒 DNA 体外生物活性检测第46-49页
     ·质粒 DNA 体内生物活性检测第49-50页
   ·本章小结第50-51页
第5章 AAV 病毒基因组滴度的测定第51-73页
   ·实验材料、试剂与仪器第51-52页
     ·实验材料第51页
     ·实验试剂第51页
     ·实验仪器第51-52页
     ·主要试剂的配制第52页
   ·实验方法第52-57页
     ·UV spectrophotometry 测 rAAV 的基因组滴度第52页
     ·非变性胶电泳测 rAAV 的基因组滴度第52-53页
     ·PCR 法测 rAAV 的基因组滴度第53-56页
     ·qPCR 法测定 rAAV 的基因组滴度第56-57页
     ·统计学分析第57页
   ·实验结果及分析第57-72页
     ·UV spectrophotometry 测 rAAV-EGFP 的基因组滴度第57-58页
     ·非变性胶电泳测 rAAV-EGFP 的基因组滴度第58-60页
     ·普通 PCR 测 rAAV-EGFP 的基因组滴度第60-65页
     ·qPCR 测 rAAV 的基因组滴度第65-71页
     ·PCR 和 qPCR 测 rAAV 滴度的比较第71-72页
   ·本章小结第72-73页
第6章 总结与展望第73-75页
参考文献第75-81页
致谢第81-82页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第82页

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