摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
1 绪论 | 第8-14页 |
·果蝇的应用及研究进展 | 第8-9页 |
·果蝇的天然免疫 | 第9-11页 |
·体液免疫 | 第9-10页 |
·细胞免疫 | 第10-11页 |
·黑化反应 | 第11页 |
·P因子及UAS-Gal4系统的应用 | 第11-12页 |
·jumu基因的研究进展 | 第12-13页 |
·本研究的目的与意义 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-23页 |
·抗Jumu蛋白多克隆抗体的制备 | 第14-16页 |
·实验材料及试剂 | 第14页 |
·原核表达质粒的构建及鉴定 | 第14页 |
·目的蛋白的原核表达及纯化 | 第14-15页 |
·多克隆抗体的制备 | 第15页 |
·Western-blot | 第15页 |
·免疫荧光染色检测 | 第15-16页 |
·jumu低表达突变体的获得 | 第16-19页 |
·果蝇品系及试剂 | 第16页 |
·利用P因子切除方法获得突变体 | 第16-17页 |
·果蝇基因组DNA的提取 | 第17页 |
·果蝇RNA提取 | 第17-18页 |
·PCR检测突变体P因子切除情况 | 第18-19页 |
·半定量RT-PCR检测突变体果蝇jumu基因的表达 | 第19页 |
·过表达jumu突变体的制备 | 第19-20页 |
·果蝇品系 | 第19页 |
·过表达jumu突变体的制备方法 | 第19-20页 |
·RT-PCR检测jumu在不同发育时期及组织中的表达 | 第20页 |
·血细胞计数 | 第20-21页 |
·果蝇羽化率的统计 | 第21页 |
·抗菌肽基因的RT-PCR检测 | 第21-22页 |
·血细胞分化相关基因的RT-PCR检测 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-35页 |
·Jumu蛋白多克隆抗体的制备 | 第23-25页 |
·重组质粒pRSETA-jumu的构建及酶切鉴定 | 第23-24页 |
·Jumu蛋白的原核表达与纯化 | 第24页 |
·Western blot鉴定多克隆抗体的特异性 | 第24-25页 |
·免疫荧光染色验证抗体的特异性 | 第25页 |
·jumu基因在不同发育时期及组织中的表达分析 | 第25-26页 |
·RT-PCR检测jumu在果蝇不同发育时期的转录水平 | 第25-26页 |
·jumu在幼虫的各组织中的表达分析 | 第26页 |
·低表达jumu对果蝇发育及血细胞分化的影响 | 第26-29页 |
·利用P因子切除方法成功获得jumu低表达突变体 | 第26-28页 |
·低表达jumu对果蝇发育的影响 | 第28-29页 |
·低表达jumu导致血细胞异常增加 | 第29页 |
·广泛及组织特异性表达jumu基因对jumu突变体表型的影响分析 | 第29-31页 |
·全身过量表达jumu能够减弱突变体果蝇血细胞的异常增加 | 第29-30页 |
·组织特异性过表达jumu对血细胞分化及果蝇发育的影响 | 第30-31页 |
·jumu对血细胞分化相关基因的转录调节分析 | 第31-32页 |
·jumu对抗菌肽基因的转录调节分析 | 第32-35页 |
4 讨论 | 第35-38页 |
·Jumu蛋白多克隆抗体的制备 | 第35页 |
·jumu对果蝇发育的影响 | 第35-36页 |
·jumu对果蝇血细胞分化的影响 | 第36-37页 |
·jumu对果蝇抗菌肽基因表达的影响 | 第37-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |