| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 目录 | 第13-16页 |
| 缩略词表及注释 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-24页 |
| 第一章 HTA基因的全长克隆及验证 | 第24-48页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-41页 |
| ·实验材料 | 第24-29页 |
| ·实验方法 | 第29-41页 |
| ·实验结果 | 第41-46页 |
| ·HTA在各肝癌细胞系中的表达 | 第41页 |
| ·3’RACE和5’RACE扩增HTA基因 | 第41页 |
| ·HTA基因结构及可变剪接分析 | 第41-43页 |
| ·HTA基因编码蛋白的生物信息学分析及结构预测 | 第43-45页 |
| ·Northern blot检测HTA转录本在不同细胞系中的表达 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第二章 HTA蛋白的纯化及抗体的制备 | 第48-67页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-59页 |
| ·实验材料 | 第48-52页 |
| ·实验方法 | 第52-59页 |
| ·实验结果 | 第59-65页 |
| ·pGEX-4T-3-HTA原核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·GST-HTA蛋白表达 | 第60页 |
| ·GST-HTA蛋白的纯化和酶切 | 第60-61页 |
| ·Anti-HTA mAb的鉴定 | 第61-62页 |
| ·Anti-HTA mAb用于Western blot检测 | 第62页 |
| ·细胞免疫化学检测各细胞系中HTA的表达 | 第62-63页 |
| ·anti-HTA mAb对不同细胞系的生长抑制作用 | 第63-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第三章 HTA基因过表达对肝癌细胞系表型的影响 | 第67-81页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料与方法 | 第67-72页 |
| ·实验材料 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-72页 |
| ·实验结果 | 第72-79页 |
| ·构建pcDNA3.1(+)-HTA真核表达载体 | 第72页 |
| ·稳定过表达HTA肝癌细胞系的建立 | 第72-73页 |
| ·体外实验检测过表达HTA基因对肝癌细胞系生物学表型的影响 | 第73-76页 |
| ·体内实验检测过表达HTA基因对肝癌细胞系生物学表型的影响 | 第76-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| 第四章 全基因组表达谱芯片筛选HTA相关基因 | 第81-100页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·材料与方法 | 第81-88页 |
| ·实验材料 | 第81-83页 |
| ·实验方法 | 第83-88页 |
| ·实验结果 | 第88-98页 |
| ·HTA干扰前后的HepG2细胞系总RNA制备 | 第88页 |
| ·HTA基因芯片杂交结果 | 第88-89页 |
| ·生物信息学分析芯片结果 | 第89-93页 |
| ·HTA相关差异基因的验证和分析 | 第93-94页 |
| ·HTA与ADAM家族各因子的相关性 | 第94-95页 |
| ·HTA与ADAMs和MMPs活性的相关性 | 第95页 |
| ·HTA对细胞粘附、侵袭、转移的影响 | 第95-98页 |
| ·讨论 | 第98-100页 |
| 第五章 酵母双杂交实验筛选HTA相互作用蛋白 | 第100-113页 |
| ·引言 | 第100页 |
| ·材料与方法 | 第100-106页 |
| ·实验材料 | 第100-102页 |
| ·实验方法 | 第102-106页 |
| ·实验结果 | 第106-111页 |
| ·Bait载体的构建及验证 | 第106页 |
| ·酵母双杂交阳性实验及自激活检测 | 第106-107页 |
| ·酵母双杂交结果 | 第107-108页 |
| ·蛋白相互作用结构分析 | 第108-109页 |
| ·特异性双杂交验证 | 第109-111页 |
| ·讨论 | 第111-113页 |
| 总结论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-128页 |
| 综述 | 第128-144页 |
| 参考文献 | 第137-144页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第144-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
