| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 缩略词 | 第8-12页 |
| 第1章 斑马鱼及神经管畸形综述 | 第12-26页 |
| ·斑马鱼—明星模式生物 | 第12-13页 |
| ·斑马鱼早期胚胎发育 | 第13-16页 |
| ·人类及斑马鱼神经管的发育 | 第16-19页 |
| ·初级神经管化过程 | 第16-18页 |
| ·斑马鱼神经管的发育 | 第18-19页 |
| ·神经管畸形概述 | 第19-21页 |
| ·PCP信号通路与NTD的相关性研究进展 | 第21-23页 |
| ·COPⅡ衣被小泡的的组成及运输 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第25页 |
| ·研究内容与技术方法 | 第25-26页 |
| 第2章 Sec24b基因的生物信息学分析 | 第26-30页 |
| ·内容与方法 | 第26页 |
| ·基因的发现及结构域预测 | 第26页 |
| ·直向同源基因预测 | 第26页 |
| ·进化分析 | 第26页 |
| ·结果及分析 | 第26-30页 |
| ·基因的发现及结构 | 第26-28页 |
| ·斑马鱼和人类Sec24b基因的同源性及保守性分析 | 第28-30页 |
| 第3章 斑马鱼Sec24b基因的克隆及功能分析 | 第30-48页 |
| ·前言 | 第30页 |
| ·材料及方法 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·质粒及试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-40页 |
| ·斑马鱼总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·cDNA的合成 | 第32-33页 |
| ·整胚胎原位杂交 | 第33-36页 |
| ·冰冻切片 | 第36页 |
| ·反义干扰(Morpholino)及体外挽救实验 | 第36-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·斑马鱼Sec24b基因表达谱 | 第40-42页 |
| ·斑马鱼Sec24b基因敲低对汇聚延伸的影响 | 第42-43页 |
| ·采用斑马鱼体系检测人类SEC24B基因突变对功能的影响 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第4章 人类神经管畸形患者SEC24B基因突变体相关功能分析 | 第48-70页 |
| ·前言 | 第48-50页 |
| ·质粒,菌种及试剂盒 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-60页 |
| ·突变载体的构建 | 第51-53页 |
| ·细胞培养 | 第53-54页 |
| ·免疫印迹及免疫共沉淀实验 | 第54-56页 |
| ·细胞内亚定位实验 | 第56-60页 |
| ·人源SEC24B野生及突变型质粒对斑马鱼胚胎的体外挽救功能实验 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-67页 |
| ·SEC24B错意点突变影响了其在细胞内蛋白的稳定性,改变了其蛋白与Vangl2蛋白的互作关系 | 第60-61页 |
| ·SEC24B错意点突变影响了Vangl2蛋白由内质网到高尔基体的运输 | 第61-62页 |
| ·SEC24B错意点突变对斑马鱼神经管汇聚延伸的影响 | 第62-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 附录 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第86页 |
