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大豆花叶病毒山西大豆和白术分离物的分子鉴定

摘要第1-7页
1. 文献综述第7-20页
   ·引言第7页
   ·植物病毒病检测研究进展第7-13页
     ·生物学检测法第7页
     ·电子显微镜检测法第7-8页
     ·血清学检测法第8-9页
     ·分子生物学检测法第9-13页
     ·基因芯片检测法第13页
   ·大豆花叶病毒研究进展第13-16页
     ·SMV的性质与寄主范围第13-14页
     ·SMV的症状与危害第14页
     ·SMV基因组结构及功能第14-15页
     ·SMV株系的划分第15-16页
   ·白术及其病毒病研究进展第16-18页
     ·白术的有效成分第16-17页
     ·白术的药理作用第17-18页
     ·白术病毒病研究进展第18页
   ·本研究的目的意义第18-19页
   ·研究内容及技术路线第19-20页
     ·研究内容第19页
     ·技术路线第19-20页
2. 材料与方法第20-28页
   ·材料第20-21页
     ·病样的收集与保存第20页
     ·菌株与质粒载体第20页
     ·本试验所用引物及用于分子系统学分析的病毒分离物第20-21页
   ·设备第21页
   ·试剂第21-22页
   ·方法第22-28页
     ·汁液摩擦接种法第22页
     ·植物病原dsRNA的提取第22-23页
     ·非序列依赖性扩增(Sequence-independent Amplification,SIA)检测病毒第23页
     ·两步法RT-PCR(Two steps RT-PCR)第23-24页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第24-25页
     ·PCR产物割胶回收第25-26页
     ·链接第26页
     ·重组质粒的转化第26页
     ·重组质粒的筛选及菌液PCR鉴定第26-27页
     ·测序及序列分析第27-28页
3. 结果与分析第28-61页
   ·大豆花叶病毒山西大豆分离物的基因组全序列测定与结构分析第28-41页
     ·大豆花叶病毒山西大豆(SMV-SX)分离物引起的病叶症状观察第28页
     ·SMV-SX dsRNA的提取第28页
     ·SMV-SX全长基因组序列的扩增第28-37页
     ·SMV-SX分离物基因组结构与功能的分析第37-40页
     ·SMV-SX分离物系统进化分析第40-41页
   ·白术病毒病的检测第41-45页
     ·白术病毒病病样的症状观察第41-42页
     ·白术病毒病dsRNA的提取第42页
     ·非序列依赖性扩增(Sequence-independent Amplification,SIA)检测病毒第42页
     ·Two steps RT-PCR鉴定白术病毒病第42-44页
     ·系统进化树分析第44-45页
   ·SMV-Am基因组全序列测定与结构分析第45-61页
     ·SMV-Am全长基因组序列的扩增第45-55页
     ·SMV-Am分离物基因组结构与功能的分析第55-61页
4. 讨论第61-63页
5. 结论第63-65页
参考文献第65-70页
ABSTRACT第70-72页
附录A:本试验所用的重要缩写词及中文对照第72-73页
附录B:本试验所用的主要实验设备第73-74页
附录C:本试验所用的化学试剂第74-75页
附录D:本试验所用分子生物学试剂第75-76页
附录E:本试验所用的缓冲液及培养基配方第76-77页
附录F:常用的抗生素及使用浓度第77-78页
致谢第78页

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