摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
缩略词及英汉对照 | 第11-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
·棉花组织培养 | 第13-17页 |
·棉花体细胞培养 | 第14-15页 |
·棉花胚珠培养 | 第15页 |
·棉花花药培养 | 第15-16页 |
·棉花原生质体培养 | 第16页 |
·棉花茎尖分生组织培养 | 第16-17页 |
·植物转基因技术及其在棉花上的应用 | 第17-21页 |
·农杆菌介导法 | 第17-19页 |
·基因枪法 | 第19-20页 |
·花粉管道法 | 第20-21页 |
·标记基因在转基因植物中的应用 | 第21-22页 |
·选择标记基因 | 第21页 |
·报告基因 | 第21-22页 |
·研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 实验材料 | 第24-30页 |
·植物材料 | 第24页 |
·菌株及质粒 | 第24页 |
·实验仪器 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-26页 |
·培养基、试剂配制 | 第26-30页 |
·MSB、AB 培养基母液配制方法 | 第26-27页 |
·抗生素母液配置 | 第27-28页 |
·植物激素母液的配置 | 第28页 |
·LB、诱导培养基 | 第28-29页 |
·质粒提取液 | 第29页 |
·10 倍 TE 溶液 | 第29页 |
·X-Gluc 染液 | 第29页 |
·FAA 固定液 | 第29页 |
·TAE | 第29页 |
·DNA 提取液 | 第29-30页 |
第三章 实验方法 | 第30-41页 |
·pBp35S 质粒提取及鉴定 | 第30-32页 |
·大量提取 pBp35S 质粒 | 第30-31页 |
·酶切鉴定 | 第31-32页 |
·农杆菌电击转化及转化子鉴定 | 第32-33页 |
·农杆菌 LBA4404 感受态细胞制备 | 第32页 |
·电击转化农杆菌 LBA4404 | 第32页 |
·农杆菌 GV3101 感受态细胞制备 | 第32-33页 |
·电击转化农杆菌 GV3101 | 第33页 |
·菌落 PCR 鉴定转化子 | 第33页 |
·菌液保存 | 第33页 |
·棉花下胚轴及叶柄遗传转化 | 第33-35页 |
·无菌苗的制备 | 第33-34页 |
·农杆菌的培养及侵染 | 第34页 |
·侵染与共培养 | 第34页 |
·棉花抗性愈伤诱导 | 第34-35页 |
·棉花抗性愈伤 GUS 组织化学检测 | 第35页 |
·棉花茎尖分生组织的遗传转化 | 第35-41页 |
·菌种培养与侵染液制备 | 第35-36页 |
·棉胚制备 | 第36-37页 |
·转化 | 第37-38页 |
·共培养 | 第38页 |
·筛选培养 | 第38页 |
·GUS 组织化学染色 | 第38-39页 |
·石蜡切片 | 第39页 |
·幼苗培养 | 第39页 |
·练苗及移栽 | 第39-40页 |
·卡那霉素检测幼苗 | 第40页 |
·幼苗的叶片进行分子检测 | 第40页 |
·以幼苗的叶片进行 GUS 组织化学染色检测 | 第40-41页 |
第四章 结果与分析 | 第41-52页 |
·pBp35S 质粒鉴定及农杆菌转化 | 第41-42页 |
·pBp35S 质粒的酶切鉴定 | 第41页 |
·pBp35S 质粒转化农杆菌 LBA4404 和 GV3101 | 第41-42页 |
·棉花下胚轴及叶柄的转化 | 第42-43页 |
·愈伤诱导、筛选及分化 | 第42页 |
·抗性愈伤的 GUS 组织化学检测 | 第42-43页 |
·棉花茎尖分生遗传转化体系的建立 | 第43-52页 |
·不同农杆菌菌株对转化的影响 | 第43-44页 |
·菌液浓度对转化的影响 | 第44-45页 |
·不同侵染方式对转化的影响 | 第45-46页 |
·不同玻璃粉量对棉胚损伤的影响 | 第46-47页 |
·涡旋时间对对幼苗损伤及转化的影响 | 第47-49页 |
·棉胚石蜡切片 | 第49-50页 |
·成活幼苗移栽及卡那筛选 | 第50-51页 |
·PCR 检测 | 第51页 |
·GUS 组织化学染色幼苗叶片 | 第51-52页 |
第五章 结论 | 第52-53页 |
第六章 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
作者简介 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
导师评阅表 | 第62页 |