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棉花分生组织转化技术的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
缩略词及英汉对照第11-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·棉花组织培养第13-17页
     ·棉花体细胞培养第14-15页
     ·棉花胚珠培养第15页
     ·棉花花药培养第15-16页
     ·棉花原生质体培养第16页
     ·棉花茎尖分生组织培养第16-17页
   ·植物转基因技术及其在棉花上的应用第17-21页
     ·农杆菌介导法第17-19页
     ·基因枪法第19-20页
     ·花粉管道法第20-21页
   ·标记基因在转基因植物中的应用第21-22页
     ·选择标记基因第21页
     ·报告基因第21-22页
   ·研究目的与意义第22-24页
第二章 实验材料第24-30页
   ·植物材料第24页
   ·菌株及质粒第24页
   ·实验仪器第24页
   ·主要试剂第24-26页
   ·培养基、试剂配制第26-30页
     ·MSB、AB 培养基母液配制方法第26-27页
     ·抗生素母液配置第27-28页
     ·植物激素母液的配置第28页
     ·LB、诱导培养基第28-29页
     ·质粒提取液第29页
     ·10 倍 TE 溶液第29页
     ·X-Gluc 染液第29页
     ·FAA 固定液第29页
     ·TAE第29页
     ·DNA 提取液第29-30页
第三章 实验方法第30-41页
   ·pBp35S 质粒提取及鉴定第30-32页
     ·大量提取 pBp35S 质粒第30-31页
     ·酶切鉴定第31-32页
   ·农杆菌电击转化及转化子鉴定第32-33页
     ·农杆菌 LBA4404 感受态细胞制备第32页
     ·电击转化农杆菌 LBA4404第32页
     ·农杆菌 GV3101 感受态细胞制备第32-33页
     ·电击转化农杆菌 GV3101第33页
     ·菌落 PCR 鉴定转化子第33页
     ·菌液保存第33页
   ·棉花下胚轴及叶柄遗传转化第33-35页
     ·无菌苗的制备第33-34页
     ·农杆菌的培养及侵染第34页
     ·侵染与共培养第34页
     ·棉花抗性愈伤诱导第34-35页
     ·棉花抗性愈伤 GUS 组织化学检测第35页
   ·棉花茎尖分生组织的遗传转化第35-41页
     ·菌种培养与侵染液制备第35-36页
     ·棉胚制备第36-37页
     ·转化第37-38页
     ·共培养第38页
     ·筛选培养第38页
     ·GUS 组织化学染色第38-39页
     ·石蜡切片第39页
     ·幼苗培养第39页
     ·练苗及移栽第39-40页
     ·卡那霉素检测幼苗第40页
     ·幼苗的叶片进行分子检测第40页
     ·以幼苗的叶片进行 GUS 组织化学染色检测第40-41页
第四章 结果与分析第41-52页
   ·pBp35S 质粒鉴定及农杆菌转化第41-42页
     ·pBp35S 质粒的酶切鉴定第41页
     ·pBp35S 质粒转化农杆菌 LBA4404 和 GV3101第41-42页
   ·棉花下胚轴及叶柄的转化第42-43页
     ·愈伤诱导、筛选及分化第42页
     ·抗性愈伤的 GUS 组织化学检测第42-43页
   ·棉花茎尖分生遗传转化体系的建立第43-52页
     ·不同农杆菌菌株对转化的影响第43-44页
     ·菌液浓度对转化的影响第44-45页
     ·不同侵染方式对转化的影响第45-46页
     ·不同玻璃粉量对棉胚损伤的影响第46-47页
     ·涡旋时间对对幼苗损伤及转化的影响第47-49页
     ·棉胚石蜡切片第49-50页
     ·成活幼苗移栽及卡那筛选第50-51页
     ·PCR 检测第51页
     ·GUS 组织化学染色幼苗叶片第51-52页
第五章 结论第52-53页
第六章 讨论第53-55页
参考文献第55-60页
作者简介第60-61页
致谢第61-62页
导师评阅表第62页

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