| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-32页 |
| 第一章 植物的防卫反应和系统获得抗性 | 第12-22页 |
| 1 植物-病原物的互作 | 第12-16页 |
| ·病原物致病基因 | 第12-13页 |
| ·植物的先天免疫反应 | 第13-14页 |
| ·植物的防卫基因类型 | 第14-16页 |
| 2 植物系统获得抗性 | 第16-22页 |
| ·水杨酸(SA)介导的SAR | 第17-20页 |
| ·植物的过敏反应与系统抗病性的关联 | 第20-22页 |
| 第二章 植物病原细菌中的harpin类蛋白研究进展 | 第22-32页 |
| 1 已报道的harpin类蛋白及其生物学效应 | 第22-24页 |
| ·harpin蛋白的生物学效应 | 第22-23页 |
| ·植物病原细菌中的harpin类蛋白 | 第23-24页 |
| 2 harpin蛋白的分子结构特点 | 第24-27页 |
| ·harpin蛋白在植物上的作用位点 | 第24-26页 |
| ·harpin蛋白的关键功能域研究 | 第26-27页 |
| 3 harpin蛋白诱导植物防卫反应的分子机理 | 第27-30页 |
| ·harpin蛋白激发HR的信号通路 | 第27-29页 |
| ·harpin蛋白激发的HCD信号通路与抗病之间关系 | 第29-30页 |
| 4 harpin蛋白在实际生产中的应用 | 第30-32页 |
| ·harpin蛋白在基因工程中的应用 | 第30-31页 |
| ·harpin蛋白在微生物农药研发中的应用 | 第31-32页 |
| 下篇 研究内容 | 第32-76页 |
| 第一章 丁香假单胞大豆致病变种harpin编码基因的克隆与表达 | 第34-52页 |
| 摘要 | 第34页 |
| Abstract | 第34-35页 |
| 1 材料和方法 | 第35-45页 |
| ·菌株和质粒 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·培养基、抗生素和培养条件 | 第36-37页 |
| ·缓冲液 | 第37-38页 |
| ·大豆细菌性斑点病菌基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·引物的设计与合成 | 第39-40页 |
| ·hrpZ基因的扩增 | 第40页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第40-41页 |
| ·PCR产物与pMD18-T载体连接 | 第41页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第41页 |
| ·连接产物的转化 | 第41-42页 |
| ·质粒的提取 | 第42页 |
| ·质粒酶切及PCR验证 | 第42-43页 |
| ·hrpZ的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·harpin融合表达载体的构建 | 第43页 |
| ·harpin融合蛋白表达的影响因素 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·丁香假单胞大豆致病变种hrpZ基因的克隆 | 第45-46页 |
| ·hrpZ的生物信息学分析 | 第46-48页 |
| ·harpin蛋白的表达及影响因素 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 第二章 harpinZ_(PsgS1)蛋白的纯化及生物活性检测 | 第52-60页 |
| 摘要 | 第52页 |
| Abstract | 第52-53页 |
| 1 材料和方法 | 第53-56页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·培养基、抗生素和培养条件 | 第53页 |
| ·缓冲液 | 第53-54页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的纯化 | 第54-55页 |
| ·树脂的再生与储存 | 第55页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的脱盐和浓缩 | 第55页 |
| ·纯化harpinZ_(PsgS1)蛋白的浓度测定 | 第55-56页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的鉴定 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-59页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·纯化harpinZ_(PsgS1)蛋白的浓度 | 第57-58页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的鉴定 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 第三章 harpinZ_(PsgS1)蛋白诱导烟草系统获得抗性机理研究 | 第60-76页 |
| 摘要 | 第60页 |
| Abstract | 第60-61页 |
| 1 材料和方法 | 第61-67页 |
| ·菌株、培养条件和供试植物 | 第61页 |
| ·培养基 | 第61-62页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的表达 | 第62页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的纯化 | 第62页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)蛋白的浓度测定 | 第62页 |
| ·烟草叶片RNA的提取 | 第62-63页 |
| ·RNA的定性与质量检测 | 第63页 |
| ·mRNA反转录cDNA | 第63-64页 |
| ·Real-time PCR | 第64-66页 |
| ·烟草生长量的测定 | 第66页 |
| ·烟草对TMV抗性的测定 | 第66-67页 |
| ·烟草对烟草疫霉抗性的测定 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-74页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)促进烟草的生长 | 第67-68页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)诱导烟草对TMV的抗性 | 第68-69页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)诱导烟草对烟草疫霉的抗性 | 第69-70页 |
| ·harpinZ_(PsgS1)激发植物防卫反应相关基因的表达 | 第70-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第89页 |
