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乳酸菌益生效应评价体外模型建立及黏附相关机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-17页
第一章 引言第17-25页
   ·乳酸菌在水产中的益生作用第17-19页
     ·乳酸菌在鱼类肠道中的黏附第17页
     ·乳酸菌在鱼类肠道中的定植第17-18页
     ·乳酸菌对致病菌的抑制第18页
     ·乳酸菌促进鱼类的生长第18页
     ·乳酸菌与鱼类肠道免疫第18-19页
   ·乳酸菌黏附评价模型的发展第19-21页
     ·黏液黏附模型第20页
     ·细胞培养模型第20页
     ·组织器官模型第20-21页
   ·影响乳酸菌黏附的因素第21-22页
     ·生长阶段的影响第21页
     ·pH 值的影响第21页
     ·温度的影响第21页
     ·浓度的影响第21页
     ·其它影响因子第21-22页
   ·乳酸菌黏附素研究概况第22-23页
     ·脂磷壁酸(LTA)第22页
     ·肽聚糖和多糖第22页
     ·黏附相关蛋白第22-23页
 本研究的目的和意义第23-25页
第二章 鱼类肠道体外培养肠囊模型的建立第25-38页
   ·前言第25页
   ·实验材料第25-27页
     ·鱼样的来源及饲养条件第25-26页
     ·引物合成和核酸序列测序第26页
     ·试剂盒、工具酶与生化试剂第26页
     ·仪器第26页
     ·实验所用菌种第26页
     ·常用溶液及培养基第26-27页
   ·实验方法第27-31页
     ·菌种培养第27页
     ·罗非鱼肠道离体培养肠囊模型的制备第27-28页
     ·肠囊模型检测肠道菌群黏附效应可行性评价第28-29页
     ·肠囊模型体外培养 mRNA 表达量稳定性检测第29-31页
     ·扫描电镜分析第31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·肠囊模型检测肠道菌群黏附效应可行性评价结果分析第31-34页
     ·肠囊模型体外培养 mRNA 表达量稳定性检测第34页
     ·扫描电镜分析第34-35页
   ·讨论第35-37页
 本章小结第37-38页
第三章 可定植乳酸杆菌在罗非鱼前肠及后肠互作效应研究第38-54页
   ·前言第38页
   ·实验材料第38-39页
     ·鱼样的来源及饲养条件第38页
     ·引物合成和核酸序列测序第38-39页
     ·试剂盒、工具酶与生化试剂第39页
     ·仪器第39页
     ·实验所用菌种第39页
     ·常用溶液及培养基第39页
   ·实验方法第39-44页
     ·菌种培养第39页
     ·罗非鱼肠道分离及肠囊实验第39-40页
     ·变性梯度凝胶电泳分析第40-42页
     ·肠囊模型细胞因子基因转录分析第42-43页
     ·肠囊模型黏附总菌量分析第43-44页
     ·扫描电镜分析第44页
   ·结果与分析第44-51页
     ·变性梯度凝胶电泳分析第44-47页
     ·肠道黏附菌群数量实时荧光定量 PCR 分析第47-49页
     ·离体培养肠道组织细胞因子相对表达量分析第49-50页
     ·扫描电子显微镜分析第50-51页
   ·讨论第51-53页
 本章小结第53-54页
第四章 鼠李糖乳杆菌及其黏附相关菌毛蛋白黏附机制研究第54-79页
   ·前言第54-55页
   ·实验材料第55-56页
     ·实验所用菌种及斑马鱼第55页
     ·引物合成和核酸序列测序第55页
     ·试剂盒、工具酶与生化试剂第55页
     ·仪器第55页
     ·常用溶液及培养基第55-56页
   ·实验方法第56-65页
     ·菌种培养第56页
     ·乳酸菌生物膜形成检测第56页
     ·乳酸菌菌毛蛋白基因 PCR 检测第56-57页
     ·经异硫氰酸荧光素(FITC)染色后,鼠李糖乳杆菌生物膜形成检测第57-58页
     ·FITC 荧光乳酸菌黏附斑马鱼肠道实验第58页
     ·spaABC 菌毛蛋白基因的克隆、表达第58-61页
     ·细胞培养第61页
     ·细胞培养 spa 系列蛋白与细胞互作实验第61-62页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验细胞凋亡实验分析第62页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验细胞因子表达量分析第62-63页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验 TLR 受体表达量分析第63-65页
   ·结果与分析第65-76页
     ·乳酸菌生物膜形成检测实验分析第65-66页
     ·乳酸菌菌毛蛋白基因 PCR 检测第66-67页
     ·经异硫氰酸荧光素(FITC)染色后,乳酸菌生物膜形成检测分析第67-68页
     ·FITC 荧光乳酸菌黏附斑马鱼肠道实验分析第68-69页
     ·spaABC 菌毛蛋白基因的克隆第69页
     ·spa 菌毛蛋白原核表达载体构建及目的基因序列的测定第69-71页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达第71-72页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验细胞凋亡实验分析第72-73页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验 TLR 受体表达量分析第73-75页
     ·spa 系列蛋白与细胞互作实验细胞因子表达量分析第75-76页
   ·讨论第76-78页
 本章小结第78-79页
第五章 全文结论第79-80页
参考文献第80-88页
致谢第88-89页
作者简历第89页

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