摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略语表 | 第13-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-67页 |
第一章 日本乙型脑炎的研究背景 | 第15-45页 |
1 JEV的分类 | 第15-16页 |
2 乙脑流行的危害 | 第16-17页 |
3 乙脑的流行模式 | 第17-18页 |
4 乙脑的生物学研究进展 | 第18-25页 |
·病毒基因组结构与功能 | 第18-19页 |
·病毒蛋白的结构与功能 | 第19-23页 |
·乙型脑炎病毒的侵染和复制 | 第23-25页 |
5 乙型脑炎病毒的毒力和致病机理 | 第25-26页 |
·分子水平上的毒力研究 | 第25页 |
·乙型脑炎的致病机理 | 第25-26页 |
6 乙型脑炎诊断技术研究进展 | 第26-32页 |
·病毒的分离鉴定 | 第26-27页 |
·血清学诊断 | 第27-29页 |
·病原学检查 | 第29-32页 |
7 乙脑疫苗研究进展 | 第32-35页 |
·传统疫苗 | 第32-33页 |
·基因工程疫苗 | 第33-35页 |
8 展望 | 第35-37页 |
参考文献 | 第37-45页 |
第二章 痘病毒载体概述 | 第45-59页 |
1 MVA的生物学特性 | 第45-46页 |
·MVA的起源 | 第45页 |
·MVA的生长许可性 | 第45-46页 |
·MVA的基因缺失情况 | 第46页 |
·MVA的体内免疫特性 | 第46页 |
2 构建重组MVA的方法 | 第46-50页 |
·构建原理 | 第46-48页 |
·构建重组MVA的基本元件 | 第48-49页 |
·重组MVA的筛选 | 第49-50页 |
3. MVA表达载体的优越性 | 第50-51页 |
4. 重组MVA的应用 | 第51-54页 |
·表达噬菌体T7RNA聚合酶 | 第52页 |
·表达流感病毒血凝素和核蛋白 | 第52页 |
·表达SIV三价抗原(gag-pol和env) | 第52页 |
·表达麻疹病毒(MV)溶解素和血凝素糖蛋白 | 第52-53页 |
·结核疫苗研究 | 第53页 |
·表达疟疾红前期抗原CSP | 第53页 |
·肿瘤的免疫治疗研究 | 第53-54页 |
5 展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
第三章 E蛋白表位概述 | 第59-67页 |
1 E蛋白抗原研究历史及现状 | 第59-62页 |
2 E蛋白多表位抗原表位选择 | 第62-63页 |
3 表位传递 | 第63-64页 |
·脂肽 | 第63页 |
·多价抗原肽 | 第63页 |
·多表位线形肽 | 第63页 |
·受体连接的多肽传递系统 | 第63页 |
·靶向多肽类(targeting polypeptides) | 第63-64页 |
4 前景展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
第二部分 试验研究 | 第67-107页 |
第四章 JEV E蛋白多表位基因重组MVA的构建及纯化 | 第67-91页 |
摘要 | 第67-68页 |
1 材料 | 第68-69页 |
·质粒和菌株 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68页 |
·主要仪器 | 第68-69页 |
2 方法 | 第69-78页 |
·引物设计 | 第69页 |
·目的基因的扩增 | 第69-70页 |
·连接及转化 | 第70-71页 |
·重组克隆载体的酶切鉴定和mep基因的序列测定 | 第71-72页 |
·痘苗病毒转移载体pGEM-K1L-mep的构建 | 第72-74页 |
·重组痘苗病毒的获得 | 第74-76页 |
·重组痘苗病毒的筛选 | 第76-77页 |
·蛋白印迹 | 第77-78页 |
·重组痘苗病毒生长曲线的测定 | 第78页 |
3 结果 | 第78-80页 |
·多表位基因(mep)的扩增 | 第78页 |
·重组克隆载体pMD18-mep的酶切鉴定 | 第78页 |
·多表位基因(mep)的测序结果 | 第78页 |
·重组转移载体pGEM-K1L-mep的酶切鉴定 | 第78-79页 |
·转移载体pGEM-K1L-mep与野生型MVA同源重组 | 第79页 |
·重组痘苗病毒在RK-13细胞上的筛选 | 第79页 |
·重组痘苗病毒在BHK-21细胞上去除K1L基因 | 第79页 |
·重组痘苗病毒的蛋白印迹 | 第79页 |
·重组痘苗病毒在BHK-21细胞上的生长特性 | 第79-80页 |
4 讨论 | 第80-86页 |
参考文献 | 第86-89页 |
Abstract | 第89-91页 |
第五章 动物实验 | 第91-107页 |
摘要 | 第91-92页 |
1 材料 | 第92-93页 |
·重组毒,重组蛋白,细胞和毒株 | 第92页 |
·主要试剂 | 第92页 |
·动物 | 第92页 |
·主要仪器 | 第92-93页 |
2 方法 | 第93-95页 |
·小鼠免疫与攻毒实验 | 第93页 |
·T淋巴细胞增殖情况 | 第93-94页 |
·抗体及抗体亚型分析 | 第94页 |
·中和抗体检测 | 第94-95页 |
·血清中IL-4和IFN-1,的测定 | 第95页 |
·统计分析 | 第95页 |
3 结果 | 第95-97页 |
·JEV病毒抗体和抗体亚型检测 | 第95-96页 |
·中和抗体滴度测定 | 第96页 |
·细胞因子检测 | 第96-97页 |
·MTT结果 | 第97页 |
·对致死量的JEV的保护力 | 第97页 |
4 讨论 | 第97-103页 |
Abstract | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-107页 |
全文总结 | 第107-109页 |
在读期间论文及专利成果 | 第109-111页 |
致谢 | 第111页 |