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JEV多表位基因重组痘苗病毒安卡拉株(rMVA-mep)及其免疫效果评价

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略语表第13-15页
第一部分 文献综述第15-67页
 第一章 日本乙型脑炎的研究背景第15-45页
  1 JEV的分类第15-16页
  2 乙脑流行的危害第16-17页
  3 乙脑的流行模式第17-18页
  4 乙脑的生物学研究进展第18-25页
   ·病毒基因组结构与功能第18-19页
   ·病毒蛋白的结构与功能第19-23页
   ·乙型脑炎病毒的侵染和复制第23-25页
  5 乙型脑炎病毒的毒力和致病机理第25-26页
   ·分子水平上的毒力研究第25页
   ·乙型脑炎的致病机理第25-26页
  6 乙型脑炎诊断技术研究进展第26-32页
   ·病毒的分离鉴定第26-27页
   ·血清学诊断第27-29页
   ·病原学检查第29-32页
  7 乙脑疫苗研究进展第32-35页
   ·传统疫苗第32-33页
   ·基因工程疫苗第33-35页
  8 展望第35-37页
  参考文献第37-45页
 第二章 痘病毒载体概述第45-59页
  1 MVA的生物学特性第45-46页
   ·MVA的起源第45页
   ·MVA的生长许可性第45-46页
   ·MVA的基因缺失情况第46页
   ·MVA的体内免疫特性第46页
  2 构建重组MVA的方法第46-50页
   ·构建原理第46-48页
   ·构建重组MVA的基本元件第48-49页
   ·重组MVA的筛选第49-50页
  3. MVA表达载体的优越性第50-51页
  4. 重组MVA的应用第51-54页
   ·表达噬菌体T7RNA聚合酶第52页
   ·表达流感病毒血凝素和核蛋白第52页
   ·表达SIV三价抗原(gag-pol和env)第52页
   ·表达麻疹病毒(MV)溶解素和血凝素糖蛋白第52-53页
   ·结核疫苗研究第53页
   ·表达疟疾红前期抗原CSP第53页
   ·肿瘤的免疫治疗研究第53-54页
  5 展望第54-55页
  参考文献第55-59页
 第三章 E蛋白表位概述第59-67页
  1 E蛋白抗原研究历史及现状第59-62页
  2 E蛋白多表位抗原表位选择第62-63页
  3 表位传递第63-64页
   ·脂肽第63页
   ·多价抗原肽第63页
   ·多表位线形肽第63页
   ·受体连接的多肽传递系统第63页
   ·靶向多肽类(targeting polypeptides)第63-64页
  4 前景展望第64-65页
  参考文献第65-67页
第二部分 试验研究第67-107页
 第四章 JEV E蛋白多表位基因重组MVA的构建及纯化第67-91页
  摘要第67-68页
  1 材料第68-69页
   ·质粒和菌株第68页
   ·主要试剂第68页
   ·主要仪器第68-69页
  2 方法第69-78页
   ·引物设计第69页
   ·目的基因的扩增第69-70页
   ·连接及转化第70-71页
   ·重组克隆载体的酶切鉴定和mep基因的序列测定第71-72页
   ·痘苗病毒转移载体pGEM-K1L-mep的构建第72-74页
   ·重组痘苗病毒的获得第74-76页
   ·重组痘苗病毒的筛选第76-77页
   ·蛋白印迹第77-78页
   ·重组痘苗病毒生长曲线的测定第78页
  3 结果第78-80页
   ·多表位基因(mep)的扩增第78页
   ·重组克隆载体pMD18-mep的酶切鉴定第78页
   ·多表位基因(mep)的测序结果第78页
   ·重组转移载体pGEM-K1L-mep的酶切鉴定第78-79页
   ·转移载体pGEM-K1L-mep与野生型MVA同源重组第79页
   ·重组痘苗病毒在RK-13细胞上的筛选第79页
   ·重组痘苗病毒在BHK-21细胞上去除K1L基因第79页
   ·重组痘苗病毒的蛋白印迹第79页
   ·重组痘苗病毒在BHK-21细胞上的生长特性第79-80页
  4 讨论第80-86页
  参考文献第86-89页
  Abstract第89-91页
 第五章 动物实验第91-107页
  摘要第91-92页
  1 材料第92-93页
   ·重组毒,重组蛋白,细胞和毒株第92页
   ·主要试剂第92页
   ·动物第92页
   ·主要仪器第92-93页
  2 方法第93-95页
   ·小鼠免疫与攻毒实验第93页
   ·T淋巴细胞增殖情况第93-94页
   ·抗体及抗体亚型分析第94页
   ·中和抗体检测第94-95页
   ·血清中IL-4和IFN-1,的测定第95页
   ·统计分析第95页
  3 结果第95-97页
   ·JEV病毒抗体和抗体亚型检测第95-96页
   ·中和抗体滴度测定第96页
   ·细胞因子检测第96-97页
   ·MTT结果第97页
   ·对致死量的JEV的保护力第97页
  4 讨论第97-103页
  Abstract第103-104页
  参考文献第104-107页
全文总结第107-109页
在读期间论文及专利成果第109-111页
致谢第111页

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