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SNX10,SNX11蛋白功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
第一章 绪论第13-36页
   ·真核细胞内膜转运概述第13-18页
     ·早期内涵体early endosome(EE)第14-16页
     ·晚期内涵体late endosome(LE)第16-17页
     ·循环内涵体和内涵体之间的联系第17-18页
   ·Sorting Nexins 家族第18-20页
     ·SNX1/SNX2,SNX5/SNX6第19-20页
     ·SNX3,SNX16第20页
     ·SNX17第20页
   ·V-ATPase第20-24页
     ·V-ATPase 的结构第21-22页
     ·V-ATPase 的生理功能第22-23页
     ·V-ATPase 功能的调节第23-24页
   ·纤毛与斑马鱼发育第24-36页
     ·纤毛的结构第24页
     ·纤毛的形成(ciliogenesis)第24-31页
       ·调节纤毛生成的信号第24-27页
       ·纤毛的组装(assembly)和运输(trafficking)第27-29页
       ·纤毛的解聚(disassembly)第29-30页
       ·纤毛形成的其他调节因子第30-31页
     ·纤毛的生理学功能第31-33页
     ·斑马鱼发育中的纤毛第33-36页
第二章 实验与方法第36-50页
   ·分子克隆第36-40页
     ·平端克隆第36-38页
       ·引物稀释第36页
       ·PCR第36页
       ·平端载体制备第36-37页
       ·胶回收第37页
       ·连接转化第37-38页
       ·菌落PCR第38页
       ·菌落 PCR第38页
     ·粘端克隆第38页
     ·质粒提取与鉴定第38-39页
     ·质粒大量提取第39-40页
   ·细胞培养第40页
   ·转染与感染第40-42页
   ·免疫荧光第42-43页
   ·中性红实验第43页
   ·丫啶橙染色第43页
   ·细胞中纤毛的诱导第43页
   ·免疫共沉淀第43-44页
   ·Western blot第44-45页
   ·RNA 提取与反转录第45-46页
   ·Realtime PCR第46页
   ·Morpholino 注射第46-47页
   ·原位杂交第47-49页
   ·胚胎纤毛染色第49-50页
第三章 实验结果与讨论第50-81页
   ·SNX10/SNX11 通过V-ATPAase 调节晚期内涵体成熟第50-66页
     ·SNX10 对内涵体的调节发生在晚期内涵体成熟阶段第50-53页
     ·SNX10 诱导成泡过程受Ra67 调节第53-55页
     ·SNX10 加剧内涵体的酸化第55-56页
     ·SNX10 诱导的空泡化和酸化具有V-ATPase 依赖性第56-57页
     ·SNX10 与V-ATPase 的D 亚基相互作用第57-58页
     ·SNX11 抑制SNX10 的成泡能力第58-60页
     ·SNX11 抑制SNX10 诱导的晚期内涵体的融合第60-62页
     ·SNX11 与D 亚基相互作用,并与SNX10 形成竞争关系第62-64页
     ·SNX11 抑制 VacA 诱导的细胞空泡化第64-66页
   ·SNX10/V-ATPase 调节纤毛的形成第66-78页
     ·SNX10 调节斑马鱼左右不对称发育(Left-Right patterning)第67-70页
     ·SNX10 调节细胞中纤毛的形成第70-72页
     ·V-ATPase 在细胞中调节纤毛的形成第72-74页
     ·V-ATPase 在斑马鱼胚胎发育中调节纤毛的发生第74-75页
     ·SNX10 调节 V-ATPase 在中心体上的定位第75-77页
     ·SNX10/V-ATPase 调节 Rab8 所在膜泡向纤毛的运输第77-78页
   ·讨论第78-81页
     ·新的早-晚期内涵体转变途径和 V-ATPase 调节方式的发现第79页
     ·功能上拮抗的 SNX11 和其分子机制的发现为上述途径增加新的调控方式第79-80页
     ·SNX10/V-ATPase 对纤毛的调节展示了新的纤毛中内涵体调节方式第80-81页
参考文献第81-91页
已发表的论文第91-92页
致谢第92-93页

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