| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-20页 |
| 第一章 靶向性腺病毒介导的肿瘤自杀基因治疗的应用 | 第20-54页 |
| 第一节 前言 | 第20-31页 |
| ·肿瘤的基因治疗 | 第20页 |
| ·自杀基因疗法 | 第20-26页 |
| ·自杀基因疗法 | 第20-22页 |
| ·自杀基因系统 | 第22-25页 |
| ·双自杀基因联合应用 | 第25-26页 |
| ·自杀基因治疗的载体 | 第26-30页 |
| ·基因治疗的载体 | 第26页 |
| ·腺病毒作为基因治疗载体 | 第26-28页 |
| ·腺病毒载体的靶向性改造 | 第28-30页 |
| ·自杀基因表达的调控 | 第30-31页 |
| ·肿瘤特异性启动子 | 第30页 |
| ·端粒酶逆转录酶启动子(hTERT) | 第30-31页 |
| 第二节 论文设计 | 第31-34页 |
| ·论文思路 | 第31-33页 |
| ·靶向性腺病毒载体 | 第31-32页 |
| ·双自杀基因联合应用 | 第32页 |
| ·肿瘤特异性启动子 hTERT 调控自杀基因的表达 | 第32-33页 |
| ·论文目的 | 第33页 |
| ·实验设计 | 第33-34页 |
| ·实验方案 | 第33页 |
| ·实验流程 | 第33-34页 |
| 第三节 材料与方法 | 第34-40页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·细胞、质粒、病毒和动物 | 第34页 |
| ·主要试剂及抗体 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·靶向性腺病毒载体平台的构建及鉴定 | 第36页 |
| ·重组腺病毒的包装、扩增、纯化、定量及鉴定 | 第36-38页 |
| ·流式细胞仪检测 CAR 及整合素αvβ3 和αvβ5 | 第38页 |
| ·荧光素酶活性的检测 | 第38-39页 |
| ·靶向性双自杀基因及其前药在体外对肿瘤细胞生长的作用 | 第39页 |
| ·靶向性双自杀基因及其前药对于荷瘤鼠肿瘤生长的影响 | 第39-40页 |
| ·靶向性双自杀基因及其前药对于荷瘤裸鼠肝组织的影响 | 第40页 |
| 第四节 结果与讨论 | 第40-54页 |
| ·靶向性 Ad5 载体平台的建立及靶向性腺病毒的获得 | 第40-46页 |
| ·Ad5 载体平台的建立 | 第41-43页 |
| ·穿梭质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·腺病毒质粒 pAd-RGD-Luc 的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组腺病毒的 Ad-Luc 和 Ad-RGD-Luc 的获得及鉴定 | 第45-46页 |
| ·靶向性腺病毒 AD-RGD-LUC 在 CAR-缺陷的肿瘤细胞中的作用 | 第46-48页 |
| ·携带双自杀基因的靶向腺病毒在肿瘤自杀基因治疗中的作用 | 第48-53页 |
| ·携带双自杀基因的靶向腺病毒的获得及鉴定 | 第48-49页 |
| ·携带双自杀基因的靶向性腺病毒在体外对肿瘤生长的抑制作用 | 第49-50页 |
| ·携带双自杀基因的靶向性腺病毒在体内抑制肿瘤生长 | 第50-51页 |
| ·携带双自杀基因的腺病毒对肝脏的影响 | 第51-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第二章 甲基硒醇前药与 MDV3100 在去势抵抗型前列腺癌中的联合应用 | 第54-96页 |
| 第一节 背景知识 | 第54-55页 |
| ·前列腺癌 | 第54页 |
| ·前列腺癌的发病率 | 第54页 |
| ·前列腺癌的诊断 | 第54-55页 |
| ·雄激素与雄激素受体 | 第55-68页 |
| ·雄激素 | 第55页 |
| ·AR 的结构与功能 | 第55-57页 |
| ·雄激素信号通路 | 第57-58页 |
| ·非雄激素依赖的 AR 信号通路 | 第58-59页 |
| ·前列腺癌的激素治疗 | 第59-60页 |
| ·去势抵抗型前列腺癌(CRPC) | 第60-68页 |
| ·CRPC 的发生及产生机制 | 第60-62页 |
| ·CRPC 的治疗 | 第62-65页 |
| ·靶向 AR 信号通路的新药 | 第65-68页 |
| 第二节 论文设计 | 第68-73页 |
| ·论文思路 | 第68-72页 |
| ·MDV3100 对 CRPC 患者的治疗 | 第68页 |
| ·AR-Vs 对 MDV3100 的耐药性的产生 | 第68-70页 |
| ·甲基硒醇前药对前列腺癌的治疗作用 | 第70-71页 |
| ·甲基硒醇前药与 MDV3100 联合用药的可能性 | 第71-72页 |
| ·论文目的 | 第72页 |
| ·实验设计 | 第72-73页 |
| ·实验方案 | 第72-73页 |
| ·实验流程 | 第73页 |
| 第三节 材料与方法 | 第73-79页 |
| ·实验材料、试剂及器材 | 第73-75页 |
| ·细胞和质粒 | 第73-74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器 | 第74-75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| ·实时定量 PCR (RT-PCR) | 第75-76页 |
| ·核连缀转录检测 (Nuclear Run-on) | 第76页 |
| ·报告基因检测 | 第76-77页 |
| ·细胞生长检测 | 第77页 |
| ·药物相互作用联合指数 | 第77页 |
| ·裸鼠 22Rv1 肿瘤模型及体内实验 | 第77页 |
| ·定量 ELISA 检测血清中 PSA | 第77-78页 |
| ·薄层色谱 | 第78页 |
| ·基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) | 第78页 |
| ·AR N-末端和 C-末端二聚作用检测 | 第78页 |
| ·统计分析 | 第78-79页 |
| 第四节 结果与讨论 | 第79-96页 |
| ·MSA 对 AR-FL 和 AR-Vs 的表达及活性的作用 | 第79-82页 |
| ·MSA 抑制 AR 基因的转录 | 第79-80页 |
| ·MSA 抑制 AR-Vs 蛋白和 mRNA 的表达 | 第80-81页 |
| ·MSA 对非雄激素依赖的 AR 活性的抑制作用 | 第81-82页 |
| ·MSA 和 MDV3100 在体外的联合作用 | 第82-87页 |
| ·MSA 增强 MDV3100 对 AR 信号通路的抑制作用 | 第82-85页 |
| ·MSA 增强 MDV3100 对肿瘤细胞生长的抑制作用 | 第85-86页 |
| ·下调 AR-FL 和 AR-VS 是联合给药抑制肿瘤细胞生长的重要作用机制 | 第86-87页 |
| ·MSC 和 MDV3100 在荷瘤裸鼠体内的联合作用 | 第87-93页 |
| ·联合给药抑制肿瘤细胞生长 | 第88-89页 |
| ·联合给药抑制血清中 PSA 浓度 | 第89页 |
| ·联合给药抑制瘤内 AR-FL 及 AR-Vs 蛋白的表达 | 第89-91页 |
| ·MDV3100 与 MSA 的化合反应 | 第91-93页 |
| ·MDV3100 对 AR 二聚作用的影响 | 第93-94页 |
| ·MDV3100 在体内和体外均下调 AR-FL 的表达 | 第93页 |
| ·MDV3100 抑制 AR 的二聚作用 | 第93-94页 |
| ·小结 | 第94-96页 |
| 结论 | 第96-100页 |
| 参考文献 | 第100-105页 |
| 作者简历 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
