玉米体细胞胚胎甲基化分析及遗传转化的研究
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·DNA甲基化的研究进展 | 第11-14页 |
| ·DNA甲基化 | 第11页 |
| ·甲基化的发生机制及检测方法 | 第11-13页 |
| ·植物组织培养过程中的DNA甲基化变异 | 第13-14页 |
| ·玉米淀粉合成的相关研究 | 第14-17页 |
| ·淀粉的合成机制 | 第14页 |
| ·颗粒结合型淀粉合成酶 | 第14-15页 |
| ·大麦α-淀粉酶抑制蛋白 | 第15-17页 |
| ·玉米遗传转化的研究 | 第17-21页 |
| ·遗传转化的方法 | 第17-19页 |
| ·影响玉米遗传转化的因素 | 第19-20页 |
| ·农杆菌介导的玉米遗传转化的发展历程 | 第20-21页 |
| ·本实验的研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 玉米体细胞胚胎的DNA甲基化分析 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验药品 | 第22-23页 |
| ·药品 | 第22页 |
| ·试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·材料的获得 | 第23-24页 |
| ·基因组DNA提取 | 第24-25页 |
| ·基因组酶切 | 第25-26页 |
| ·接头连接 | 第26-27页 |
| ·预扩增 | 第27页 |
| ·选择性扩增 | 第27-29页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·图像采集和数据分析 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·玉米体细胞胚胎的继代及植株再生 | 第30-31页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·预扩增 | 第31-32页 |
| ·利用MSAP对玉米体细胞胚胎甲基化变化分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 植物表达载体的构建 | 第35-48页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·菌株和载体 | 第35-36页 |
| ·实验药品 | 第36-37页 |
| ·药品 | 第36页 |
| ·试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·PCR反应 | 第37-38页 |
| ·回收及连接 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的转化 | 第40页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·转化及鉴定 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·基因的克隆 | 第43-44页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第48-64页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·菌株及表达载体 | 第48页 |
| ·受体材料 | 第48页 |
| ·实验药品 | 第48-50页 |
| ·药品 | 第48-49页 |
| ·培养基的配制 | 第49页 |
| ·试剂的配制 | 第49-50页 |
| ·实验仪器 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-54页 |
| ·体细胞胚胎的诱导 | 第50-51页 |
| ·正交试验筛选侵染条件 | 第51页 |
| ·GUS染色 | 第51-52页 |
| ·农杆菌侵染体细胞胚 | 第52页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第52-53页 |
| ·再生植株PCR-Southern检测 | 第53-54页 |
| ·结果分析 | 第54-61页 |
| ·体细胞胚胎的诱导 | 第54-55页 |
| ·Gus染色结果 | 第55-57页 |
| ·农杆菌侵染体细胞胚胎 | 第57-58页 |
| ·再生植株(T0)PCR检测 | 第58-60页 |
| ·再生植株(T0)PCR-southern检测 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第五章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 作者简介 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
