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产气荚膜梭菌与化脓隐秘杆菌二联灭活疫苗的制备及体液免疫效果评价

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-16页
   ·产气荚膜梭菌病概述第11-13页
     ·产气荚膜梭菌第11页
     ·产气荚膜梭菌病及临床症状第11-12页
     ·产气荚膜梭菌病的防治第12-13页
   ·化脓隐秘杆菌病概述第13-14页
     ·化脓隐秘杆菌第13页
     ·化脓隐秘杆菌病及临床症状第13页
     ·化脓隐秘杆菌病的防治第13-14页
   ·多联灭活疫苗的研究进展第14-15页
   ·本研究的目的与意义第15-16页
2 材料与方法第16-21页
   ·材料第16页
     ·试验动物第16页
     ·质粒、血清、菌株第16页
     ·主要试剂及抗体第16页
     ·主要仪器第16页
   ·A 型产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌小鼠感染模型的建立第16-18页
     ·A 型产气荚膜梭菌小鼠感染模型的建立第16-17页
     ·化脓隐秘杆菌小鼠感染模型的建立第17-18页
   ·α毒素蛋白及 PLO 蛋白抗体间接 ELISA 检测方法的建立第18-19页
     ·α毒素蛋白抗体间接 ELISA 检测方法的建立第18页
     ·PLO 蛋白抗体间接 ELISA 检测方法的建立第18-19页
   ·产气荚膜梭菌和化脓隐秘杆菌灭活条件的优化及免疫佐剂的选择第19-20页
     ·细菌培养第19页
     ·灭活条件的优化第19页
     ·免疫佐剂的选择第19-20页
   ·产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌二联灭活疫苗的制备及体液免疫效果的评价第20-21页
3 结果第21-40页
   ·产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌生长曲线的绘制第21-22页
   ·产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌小鼠感染模型的建立第22-28页
     ·产气荚膜梭菌小鼠感染模型的建立第22-25页
     ·化脓隐秘杆菌小鼠感染模型的建立第25-28页
   ·产气荚膜梭菌α毒素的粗提和抗原性鉴定第28-29页
   ·化脓隐秘杆菌 PLO 蛋白的表达纯化及抗原性鉴定第29-31页
     ·重组 PLO 蛋白的诱导表达及纯化第29-30页
     ·重组 PLO 蛋白的 western blot 鉴定第30-31页
   ·化脓隐秘杆菌 PLO 蛋白和产气荚膜梭菌α毒素抗体间接 ELISA 方法的初步建立第31-33页
     ·化脓隐秘杆菌 PLO 蛋白最佳抗原包被量和最佳血清稀释度的确定第31页
     ·化脓隐秘杆菌 PLO 蛋白最适包被缓冲液的选择和最佳封闭液的选择第31-32页
     ·产气荚膜梭菌粗提α毒素最适抗原包被浓度和血清稀释度的确定第32-33页
   ·二联灭活疫苗免疫效果的评定第33-40页
     ·不同灭活条件对产气荚膜梭菌和化脓隐秘杆菌免疫原性影响第33-34页
     ·产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌不同佐剂疫苗免疫效果的比较第34-35页
     ·不同佐剂疫苗免疫攻毒保护试验第35页
     ·产气荚膜梭菌和化脓隐秘杆菌二联灭活疫苗免疫小鼠后抗体水平检测第35-37页
     ·二联灭活疫苗免疫攻毒保护试验结果第37-38页
     ·组织病理切片观察第38-40页
4 讨论第40-42页
   ·选择重组 PLO 蛋白和粗提α毒素蛋白建立间接 ELISA 检测方法的依据第40页
   ·感染动物模型的建立第40-41页
     ·接种方式的选择第40页
     ·临床病理变化的观察第40-41页
   ·佐剂的选择及疫苗免疫原性评价第41-42页
5 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第47页

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