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乳腺癌WIF-1基因启动子区域的甲基化状态分析及多态性研究

摘要第1-3页
Abstract第3-6页
引言第6-7页
第一章 实验材料第7-9页
   ·组织标本第7页
   ·细胞株第7页
   ·血液标本第7页
   ·药品与试剂第7-8页
   ·仪器与器材第8-9页
第二章 实验方法第9-17页
   ·乳腺癌组织WIF-1基因mRNA表达水平检测第9-10页
     ·组织RNA提取第9页
     ·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)第9-10页
       ·逆转录反应第9页
       ·PCR反应第9-10页
   ·乳腺组织甲基化状态检测第10-13页
     ·组织DNA提取第10-11页
     ·亚硫酸氢钠修饰及纯化回收第11-12页
       ·亚硫酸氢钠修饰第11-12页
       ·修饰后DNA纯化回收第12页
     ·MSP阳性对照第12-13页
     ·MSP扩增第13页
     ·亚硫酸盐基因测序(BGS)第13页
   ·5-Aza-CdR和TSA对MCF-7细胞生长的影响第13-15页
     ·细胞实验分组与药物配制第14页
     ·MTT法检测细胞生长增殖活性第14页
     ·5-Aza-CdR与TSA对MCF-7细胞WIF-1 mRNA表达的影响第14-15页
   ·WIF-1基因启动子区多态性研究第15-16页
     ·基因组DNA的提取第15页
     ·引物设计与合成第15页
     ·PCR反应条件第15-16页
     ·PCR产物分析第16页
     ·测序第16页
   ·统计学分析第16-17页
第三章 实验结果第17-26页
   ·WIF-1基因mRNA表达第17页
   ·WIF-1基因甲基化状态第17-18页
   ·WIF-1基因mRNA表达与甲基化的关系第18页
   ·BGS测序结果第18-19页
   ·5-zAa-CdR和TSA分别对MCF-7细胞增殖的影响第19-20页
   ·MCF-7细胞WIF-1mRNA的表达第20-21页
   ·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点基因型电泳结果第21-22页
   ·WIF-1基因启动子区多态性在病例组与对照组之间的分布第22-23页
   ·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点基因型与乳腺癌临床病理特征的关系第23-24页
   ·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点等位基因测序结果第24-26页
第四章 讨论第26-28页
结论第28-29页
参考文献第29-31页
综述第31-43页
 参考文献第40-43页
攻读学位期间的研究成果第43-44页
致谢第44-45页

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