摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-6页 |
引言 | 第6-7页 |
第一章 实验材料 | 第7-9页 |
·组织标本 | 第7页 |
·细胞株 | 第7页 |
·血液标本 | 第7页 |
·药品与试剂 | 第7-8页 |
·仪器与器材 | 第8-9页 |
第二章 实验方法 | 第9-17页 |
·乳腺癌组织WIF-1基因mRNA表达水平检测 | 第9-10页 |
·组织RNA提取 | 第9页 |
·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第9-10页 |
·逆转录反应 | 第9页 |
·PCR反应 | 第9-10页 |
·乳腺组织甲基化状态检测 | 第10-13页 |
·组织DNA提取 | 第10-11页 |
·亚硫酸氢钠修饰及纯化回收 | 第11-12页 |
·亚硫酸氢钠修饰 | 第11-12页 |
·修饰后DNA纯化回收 | 第12页 |
·MSP阳性对照 | 第12-13页 |
·MSP扩增 | 第13页 |
·亚硫酸盐基因测序(BGS) | 第13页 |
·5-Aza-CdR和TSA对MCF-7细胞生长的影响 | 第13-15页 |
·细胞实验分组与药物配制 | 第14页 |
·MTT法检测细胞生长增殖活性 | 第14页 |
·5-Aza-CdR与TSA对MCF-7细胞WIF-1 mRNA表达的影响 | 第14-15页 |
·WIF-1基因启动子区多态性研究 | 第15-16页 |
·基因组DNA的提取 | 第15页 |
·引物设计与合成 | 第15页 |
·PCR反应条件 | 第15-16页 |
·PCR产物分析 | 第16页 |
·测序 | 第16页 |
·统计学分析 | 第16-17页 |
第三章 实验结果 | 第17-26页 |
·WIF-1基因mRNA表达 | 第17页 |
·WIF-1基因甲基化状态 | 第17-18页 |
·WIF-1基因mRNA表达与甲基化的关系 | 第18页 |
·BGS测序结果 | 第18-19页 |
·5-zAa-CdR和TSA分别对MCF-7细胞增殖的影响 | 第19-20页 |
·MCF-7细胞WIF-1mRNA的表达 | 第20-21页 |
·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点基因型电泳结果 | 第21-22页 |
·WIF-1基因启动子区多态性在病例组与对照组之间的分布 | 第22-23页 |
·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点基因型与乳腺癌临床病理特征的关系 | 第23-24页 |
·WIF-1基因启动子区rs58172684A/G和rs2336433C/T位点等位基因测序结果 | 第24-26页 |
第四章 讨论 | 第26-28页 |
结论 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-31页 |
综述 | 第31-43页 |
参考文献 | 第40-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |