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红花的组织培养和品质相关基因的克隆及分析

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-19页
 1 红花的研究概况第11-14页
   ·红花的生物学研究第11页
     ·外观形态第11页
     ·性状第11页
     ·显微鉴别第11页
     ·理化鉴别第11页
   ·红花的药理活性作用及临床应用研究第11-12页
   ·红花的化学成分第12页
   ·红花的种质资源研究第12-13页
   ·红花的综合利用第13-14页
     ·观赏第13页
     ·食用第13页
     ·药用第13页
     ·染料第13页
     ·其它方面第13-14页
 2 植物组织培养方法研究进展简介第14-16页
   ·植物组织培养有关的基本概念第14页
   ·植物组织培养方式及应用第14-16页
     ·植物的快速繁殖第14-15页
     ·植物种质资源的保存和交换第15页
     ·生产次生代谢产物第15-16页
     ·用于遗传学、细胞生物学、组织学、基因工程、生物工程等第16页
   ·植物基因转化系统的分类第16页
 3 植物基因克隆技术的的研究进展第16-18页
   ·利用植物基因表达的产物蛋白质克隆基因第16-17页
   ·根据已知基因的序列克隆植物基因第17页
   ·cDNA末端快速扩增RACE(rapid amplification of cDNA end)第17页
   ·基因标签法第17-18页
 4 研究内容及意义第18-19页
   ·研究内容第18页
   ·研究意义第18-19页
第二章 红花的组织培养第19-31页
 1. 实验材料与方法第19-22页
   ·实验材料第19页
   ·实验方法第19-21页
     ·种子选择与消毒第19页
     ·子叶的愈伤组织诱导第19-20页
     ·茎段、根部、真叶的愈伤组织诱导第20-21页
     ·不同激素处理组合对不定芽的诱导第21页
   ·统计分析第21-22页
 2 结果与分析第22-29页
   ·不同消毒时间对红花种子萌发的影响第22-23页
   ·子叶愈伤组织的诱导情况第23-24页
   ·茎段愈伤诱导情况第24-25页
   ·根部愈伤组织诱导情况第25-26页
   ·真叶愈伤组织的诱导情况第26-27页
   ·不同激素处理组合对不定芽诱导的影响第27-29页
 3 总结与讨论第29-31页
第三章 红花中羟基红花黄色素A(HSYA)含量的测定第31-36页
 1 实验材料第31页
   ·植物材料第31页
   ·试剂与仪器第31页
     ·试剂第31页
     ·仪器第31页
 2 实验方法第31-33页
   ·色谱条件第31-32页
   ·对照品溶液的制备第32页
   ·供试品溶液的制备第32页
   ·标准曲线的建立第32页
   ·精密度试验第32页
   ·重复性试验第32页
   ·稳定性试验第32页
   ·回收率试验第32-33页
   ·含量测定第33页
 3 结果与分析第33-36页
   ·羟基红花黄色素A的结构第33页
   ·羟基红花黄色素A的回归方程第33-34页
   ·精密度试验第34页
   ·重复性试验第34页
   ·稳定性试验第34页
   ·回收率试验第34-35页
   ·羟基红花黄色素A的HPLC结果第35-36页
第四章 红花中黄烷酮3-羟化酶基因的克隆及分析第36-53页
 1 实验材料第37-38页
   ·植物材料第37页
   ·试剂与仪器第37-38页
     ·常用生化试剂及酶第37页
     ·主要试剂的配制第37-38页
     ·主要实验仪器第38页
 2 实验方法第38-44页
   ·总RNA的提取第38-40页
     ·总RNA提取的操作步骤第38-40页
   ·RACE cDNA文库的构建第40-41页
     ·第一链cDNA的合成第40-41页
   ·基因特异性引物的设计第41页
   ·contig897片段3’、5’端序列的扩增第41-42页
   ·胶回收第42页
   ·连接第42页
   ·载体转化第42-43页
   ·PCR鉴定阳性克隆及测序第43-44页
     ·菌液PCR第43-44页
   ·F3H基因全长cDNA的获得第44页
   ·生物信息学分析第44页
 3 结果与分析第44-51页
   ·总RNA的提取第44-45页
   ·3’、5'RACE结果第45页
   ·F3H基因全长cDNA的结果第45-47页
   ·生物信息学分析第47-51页
     ·CtF3H蛋白质二级结构分析第47-48页
     ·CtF3H蛋白质三级结构分析第48页
     ·不同植物的F3H比较第48-49页
     ·CtF3H基因的系统进化树分析第49-51页
 4 小结与讨论第51-53页
   ·CtF3H的克隆第51页
   ·CtF3H克隆的意义第51-52页
   ·实验中的问题第52-53页
第五章 F3H基因在不同红花植株中表达差异分析第53-58页
 1 实验材料第53页
   ·植物材料第53页
   ·主要仪器设备第53页
   ·试剂(盒)和药品第53页
 2 实验方法第53-55页
   ·红花花冠RNA的提取及检测第53-54页
   ·引物设计第54页
     ·特异性引物第54页
     ·内参引物第54页
   ·反转录反应第54页
   ·实时定量PCR第54-55页
   ·数据分析第55页
 3 结果与分析第55-56页
   ·结果第55页
   ·分析第55-56页
 4 小结与讨论第56-58页
   ·实时定量PCR技术第56-57页
   ·实时定量PCR在本实验中的应用第57页
   ·研究意义第57-58页
第六章 总结与展望第58-60页
 1 本文主要在以下几个方面取得进展第58页
   ·红花组培方面第58页
   ·新疆红花中HSYA含量的测定第58页
   ·红花黄烷酮羟化酶(F3H)基因的克隆第58页
   ·F3H基因在不同红花样本中表达差异第58页
 2 今后研究方向第58-60页
附录第60-62页
参考文献第62-67页
详细摘要第67-69页
Abstract第69页

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