致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1 红花的研究概况 | 第11-14页 |
·红花的生物学研究 | 第11页 |
·外观形态 | 第11页 |
·性状 | 第11页 |
·显微鉴别 | 第11页 |
·理化鉴别 | 第11页 |
·红花的药理活性作用及临床应用研究 | 第11-12页 |
·红花的化学成分 | 第12页 |
·红花的种质资源研究 | 第12-13页 |
·红花的综合利用 | 第13-14页 |
·观赏 | 第13页 |
·食用 | 第13页 |
·药用 | 第13页 |
·染料 | 第13页 |
·其它方面 | 第13-14页 |
2 植物组织培养方法研究进展简介 | 第14-16页 |
·植物组织培养有关的基本概念 | 第14页 |
·植物组织培养方式及应用 | 第14-16页 |
·植物的快速繁殖 | 第14-15页 |
·植物种质资源的保存和交换 | 第15页 |
·生产次生代谢产物 | 第15-16页 |
·用于遗传学、细胞生物学、组织学、基因工程、生物工程等 | 第16页 |
·植物基因转化系统的分类 | 第16页 |
3 植物基因克隆技术的的研究进展 | 第16-18页 |
·利用植物基因表达的产物蛋白质克隆基因 | 第16-17页 |
·根据已知基因的序列克隆植物基因 | 第17页 |
·cDNA末端快速扩增RACE(rapid amplification of cDNA end) | 第17页 |
·基因标签法 | 第17-18页 |
4 研究内容及意义 | 第18-19页 |
·研究内容 | 第18页 |
·研究意义 | 第18-19页 |
第二章 红花的组织培养 | 第19-31页 |
1. 实验材料与方法 | 第19-22页 |
·实验材料 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-21页 |
·种子选择与消毒 | 第19页 |
·子叶的愈伤组织诱导 | 第19-20页 |
·茎段、根部、真叶的愈伤组织诱导 | 第20-21页 |
·不同激素处理组合对不定芽的诱导 | 第21页 |
·统计分析 | 第21-22页 |
2 结果与分析 | 第22-29页 |
·不同消毒时间对红花种子萌发的影响 | 第22-23页 |
·子叶愈伤组织的诱导情况 | 第23-24页 |
·茎段愈伤诱导情况 | 第24-25页 |
·根部愈伤组织诱导情况 | 第25-26页 |
·真叶愈伤组织的诱导情况 | 第26-27页 |
·不同激素处理组合对不定芽诱导的影响 | 第27-29页 |
3 总结与讨论 | 第29-31页 |
第三章 红花中羟基红花黄色素A(HSYA)含量的测定 | 第31-36页 |
1 实验材料 | 第31页 |
·植物材料 | 第31页 |
·试剂与仪器 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·仪器 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-33页 |
·色谱条件 | 第31-32页 |
·对照品溶液的制备 | 第32页 |
·供试品溶液的制备 | 第32页 |
·标准曲线的建立 | 第32页 |
·精密度试验 | 第32页 |
·重复性试验 | 第32页 |
·稳定性试验 | 第32页 |
·回收率试验 | 第32-33页 |
·含量测定 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-36页 |
·羟基红花黄色素A的结构 | 第33页 |
·羟基红花黄色素A的回归方程 | 第33-34页 |
·精密度试验 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34页 |
·稳定性试验 | 第34页 |
·回收率试验 | 第34-35页 |
·羟基红花黄色素A的HPLC结果 | 第35-36页 |
第四章 红花中黄烷酮3-羟化酶基因的克隆及分析 | 第36-53页 |
1 实验材料 | 第37-38页 |
·植物材料 | 第37页 |
·试剂与仪器 | 第37-38页 |
·常用生化试剂及酶 | 第37页 |
·主要试剂的配制 | 第37-38页 |
·主要实验仪器 | 第38页 |
2 实验方法 | 第38-44页 |
·总RNA的提取 | 第38-40页 |
·总RNA提取的操作步骤 | 第38-40页 |
·RACE cDNA文库的构建 | 第40-41页 |
·第一链cDNA的合成 | 第40-41页 |
·基因特异性引物的设计 | 第41页 |
·contig897片段3’、5’端序列的扩增 | 第41-42页 |
·胶回收 | 第42页 |
·连接 | 第42页 |
·载体转化 | 第42-43页 |
·PCR鉴定阳性克隆及测序 | 第43-44页 |
·菌液PCR | 第43-44页 |
·F3H基因全长cDNA的获得 | 第44页 |
·生物信息学分析 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-51页 |
·总RNA的提取 | 第44-45页 |
·3’、5'RACE结果 | 第45页 |
·F3H基因全长cDNA的结果 | 第45-47页 |
·生物信息学分析 | 第47-51页 |
·CtF3H蛋白质二级结构分析 | 第47-48页 |
·CtF3H蛋白质三级结构分析 | 第48页 |
·不同植物的F3H比较 | 第48-49页 |
·CtF3H基因的系统进化树分析 | 第49-51页 |
4 小结与讨论 | 第51-53页 |
·CtF3H的克隆 | 第51页 |
·CtF3H克隆的意义 | 第51-52页 |
·实验中的问题 | 第52-53页 |
第五章 F3H基因在不同红花植株中表达差异分析 | 第53-58页 |
1 实验材料 | 第53页 |
·植物材料 | 第53页 |
·主要仪器设备 | 第53页 |
·试剂(盒)和药品 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53-55页 |
·红花花冠RNA的提取及检测 | 第53-54页 |
·引物设计 | 第54页 |
·特异性引物 | 第54页 |
·内参引物 | 第54页 |
·反转录反应 | 第54页 |
·实时定量PCR | 第54-55页 |
·数据分析 | 第55页 |
3 结果与分析 | 第55-56页 |
·结果 | 第55页 |
·分析 | 第55-56页 |
4 小结与讨论 | 第56-58页 |
·实时定量PCR技术 | 第56-57页 |
·实时定量PCR在本实验中的应用 | 第57页 |
·研究意义 | 第57-58页 |
第六章 总结与展望 | 第58-60页 |
1 本文主要在以下几个方面取得进展 | 第58页 |
·红花组培方面 | 第58页 |
·新疆红花中HSYA含量的测定 | 第58页 |
·红花黄烷酮羟化酶(F3H)基因的克隆 | 第58页 |
·F3H基因在不同红花样本中表达差异 | 第58页 |
2 今后研究方向 | 第58-60页 |
附录 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
详细摘要 | 第67-69页 |
Abstract | 第69页 |