| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1. 引言 | 第12-20页 |
| ·猪流行性腹泻流行特点及流行现状 | 第12-13页 |
| ·PEDV的病毒学分类及其主要结构基因 | 第13-16页 |
| ·S(spike)基因与S蛋白的功能特性 | 第14-15页 |
| ·E(small membrane)基因功能特点 | 第15页 |
| ·M(membrane)基因与M蛋白的功能特性 | 第15页 |
| ·N(nucleocpsid)基因与N蛋白的功能特性 | 第15页 |
| ·开放阅读框架ORF3 | 第15-16页 |
| ·PEDV感染特性的研究进展 | 第16-17页 |
| ·Ⅰ群冠状病毒受体研究进展 | 第17-19页 |
| ·研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-38页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·细胞与毒株 | 第20页 |
| ·菌种与质粒 | 第20页 |
| ·引物设计与合成 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验动物及抗体 | 第22页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第22-24页 |
| ·试验方法 | 第24-38页 |
| ·各分段的pAPN在昆虫细胞-杆状病毒体系中的表达 | 第24-33页 |
| ·鼠抗SPA、SPB和SPC血清及天然pAPN血清的制备 | 第33页 |
| ·各分段的pAPN与PEDV作用结果研究 | 第33-38页 |
| 3. 结果 | 第38-49页 |
| ·各分段pAPN在昆虫细胞-杆状病毒体系中的表达 | 第38-43页 |
| ·目的基因的PCR扩增结果 | 第38页 |
| ·重组质粒pFastBac~(TM)1-SPA,pFastBac~(TM)1-SPB及pFastBac~(TM)1-SPC的鉴定结果 | 第38-40页 |
| ·重组杆粒rAcBacmid-SPA,rAcBacmid-SPB和rAcBacmid-SPC感染昆虫细胞的鉴定结果 | 第40-41页 |
| ·表达蛋白产物的SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
| ·表达蛋白的Western blotting检测 | 第42页 |
| ·多克隆抗体效价的测定 | 第42-43页 |
| ·pAPN与PEDV结合区域的鉴定 | 第43-49页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-SPA,pcDNA3.1-SPB和pcDNA3.1-SPC的鉴定 | 第43-44页 |
| ·免疫荧光鉴定重组质粒pcDNA3.1-SPA,pcDNA3.1-SPB和pcDNA3.1-SPC的表达 | 第44-45页 |
| ·病毒感染表达不同片段的细胞的病变 | 第45页 |
| ·病毒感染表达不同片段的MDCK的免疫荧光结果 | 第45-46页 |
| ·提取病毒RNA验证 | 第46-47页 |
| ·SPC抗血清抑制病变的发生 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·选择昆虫细胞表达各分段pAPN并制备抗血清的优点 | 第49页 |
| ·MDCK细胞表达分段pAPN对PEDV易感性分析 | 第49-50页 |
| ·SPC段与PEDV的特异性结合 | 第50-51页 |
| ·获得非容许性细胞MDCK与PEDV增殖 | 第51-52页 |
| ·本研究结果的理论及实践意义 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62页 |
