H5N1亚型高致病性禽流感病毒RNA聚合酶PB1B亚基的表达及初步晶体学研究
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| ·禽流感及聚合酶蛋白概述 | 第12-13页 |
| ·禽流感病毒RNA 聚合酶蛋白催化功能及机制 | 第13-15页 |
| ·禽流感病毒RNA 聚合酶蛋白的结构研究 | 第15-16页 |
| ·流感病毒RNA 聚合酶亚基的功能 | 第16页 |
| ·禽流感病毒聚合酶蛋白的研究现状与潜在的应用前景 | 第16页 |
| ·本课题研究的目的意义及研究内容 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·质粒和菌株 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·蛋白质纯化相关仪器与材料 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·聚合酶蛋白亚基PB1B 的生物信息学分析 | 第19页 |
| ·重组蛋白PB1B 的构建 | 第19-23页 |
| ·重组蛋白PB1B 的表达 | 第23-25页 |
| ·蛋白质分离纯化 | 第25页 |
| ·蛋白质结晶及衍射数据收集 | 第25-26页 |
| ·蛋白结构的解析 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| ·重组蛋白PB1B 的生物信息学分析 | 第27-30页 |
| ·基本理化性质分析结果 | 第27-28页 |
| ·蛋白的跨膜区分析结果 | 第28页 |
| ·结构域预测结果 | 第28-29页 |
| ·同源性分析结果 | 第29页 |
| ·蛋白的功能预测结果 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的构建表达及纯化 | 第30-36页 |
| ·聚合酶蛋白PB1B 重组质粒的构建 | 第30页 |
| ·聚合酶蛋白PB1B 的表达 | 第30-31页 |
| ·PB1B 的全波长扫描 | 第31-32页 |
| ·聚合酶蛋白PB1B 的纯化 | 第32-34页 |
| ·纯化蛋白PB1B 的纯度测定 | 第34-35页 |
| ·纯化蛋白PB1B 在结晶缓冲液中的均一性分析 | 第35-36页 |
| ·蛋白质结晶 | 第36-43页 |
| ·PB1B 的结晶条件的初步筛选 | 第36页 |
| ·PB1B 结晶条件的优化 | 第36页 |
| ·PB1B 蛋白的两种晶体 | 第36-37页 |
| ·PB1B 晶体的X 衍射数据的收集和处理 | 第37-40页 |
| ·PB1B 晶体结构解析的尝试 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-52页 |
| ·蛋白质生物信息学预测 | 第43页 |
| ·基因克隆、表达、纯化及生化性质初步分析 | 第43-47页 |
| ·基因克隆与蛋白表达 | 第44页 |
| ·蛋白的分离和纯化 | 第44-46页 |
| ·蛋白样品均一性的检测 | 第46-47页 |
| ·蛋白的结晶和初步晶体学研究 | 第47-52页 |
| ·蛋白质结晶 | 第47-48页 |
| ·蛋白结晶条件的优化 | 第48-49页 |
| ·蛋白质X 衍射数据的收集和处理 | 第49-50页 |
| ·蛋白结构的解析 | 第50-52页 |
| 全文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
