| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·植物先天免疫系统 | 第12-13页 |
| ·转录因子 | 第13-14页 |
| ·WRKY 转录因子 | 第14-22页 |
| ·WRKY 转录因子发现 | 第14页 |
| ·WRKY 转录因子结构特点 | 第14-16页 |
| ·WRKY 转录因子的分类 | 第16页 |
| ·WRKY 基因的起源与分子进化 | 第16-18页 |
| ·WRKY 转录因子结合的 DNA 序列 | 第18页 |
| ·WRKY 转录因子的生物学功能 | 第18-22页 |
| ·WRKY 转录因子在植物防卫反应中的作用 | 第18-21页 |
| ·WRKY 转录因子在植物生长发育中的调节作用 | 第21页 |
| ·WRKY 转录因子在植物物质代谢中的调控作用 | 第21-22页 |
| ·本实验的目的意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-45页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·棉花的培养与处理 | 第23页 |
| ·菌株与质粒 | 第23-24页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-45页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第26页 |
| ·甲醛变性凝胶进行 RNA 电泳 | 第26-27页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第27页 |
| ·cDNA 纯化和加尾反应（用于 5 RACE） | 第27-28页 |
| ·cDNA 的纯化 | 第27-28页 |
| ·cDNA 5′末端加尾反应 | 第28页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·电泳目的片段的回收 | 第29页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌微量质粒 DNA 提取和质粒酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·试剂盒微量提取大肠杆菌质粒 DNA | 第30-31页 |
| ·对重组质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·DNA 序列测定 | 第31页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第31-34页 |
| ·GhWRKY15 全长基因组序列的获得 | 第34-35页 |
| ·Northern 杂交 | 第35-36页 |
| ·基因枪基因瞬时表达 | 第36-39页 |
| ·植物表达载体的构建、转化及转化植株鉴定 | 第39-42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第40页 |
| ·农杆菌的培养 | 第40页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第41-42页 |
| ·转基因植株的抗病分析 | 第42-44页 |
| ·网络资源及数据库 | 第44页 |
| ·生物学软件 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-68页 |
| ·棉花 GhWRKY15 基因的分离 | 第45-46页 |
| ·棉花 RNA 的提取及反转录 | 第45页 |
| ·GhWRKY15 中间片段的分离 | 第45页 |
| ·GhWRKY15 的 5′片段的分离 | 第45-46页 |
| ·GhWRKY15 的 3′片段的分离 | 第46页 |
| ·GhWRKY15 全长 cDNA 的分离 | 第46页 |
| ·GhWRKY15 的序列分析 | 第46-53页 |
| ·GhWRKY15 的全长 cDNA 序列分析 | 第46-47页 |
| ·GhWRKY15 蛋白序列分析 | 第47-49页 |
| ·GhWRKY15 基因组序列分析 | 第49-51页 |
| ·GhWRKY15 基因拷贝数分析 | 第51-52页 |
| ·GhWRKY15 启动子序列的分离与序列分析 | 第52-53页 |
| ·GhWRKY15 的亚细胞定位分析 | 第53-54页 |
| ·GhWRKY15 基因的的表达特性分析 | 第54-56页 |
| ·GhWRKY15 过表达烟草植株的获得和鉴定 | 第56-58页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·再生植株的获得 | 第57页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第57-58页 |
| ·GhWRKY15 过表达植株的抗病分析 | 第58-61页 |
| ·病毒抗性分析 | 第58-60页 |
| ·真菌抗性分析 | 第60-61页 |
| ·抗性相关基因和乙烯合成相关基因的表达模式 | 第61-62页 |
| ·过表达转基因植株的抗氧化分析 | 第62-65页 |
| ·ROS 的测定和 MV 处理下 GhWRKY15 基因的表达模式 | 第62-63页 |
| ·抗氧化基因的表达模式 | 第63-64页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第64-65页 |
| ·GhWRKY15 过表达烟草的生长和发育 | 第65-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间专利申请和发表论文情况 | 第80页 |