摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1章 绪论 | 第9-21页 |
·课题背景 | 第9-12页 |
·国内外研究现状 | 第12-16页 |
·植物启动子结构与功能 | 第12-14页 |
·植物转基因技术 | 第14-16页 |
·植物启动子结构与功能研究方法 | 第16-19页 |
·凝胶电泳迁移率实验(Electrophoretic Mobility Shift Assays ,EMSA) | 第16-17页 |
·植物报告基因 | 第17-19页 |
·本文研究的目的及意义 | 第19页 |
·本文研究内容 | 第19-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-40页 |
·实验材料 | 第21-22页 |
·植物材料 | 第21页 |
·质粒、菌株 | 第21页 |
·酶及主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器设备 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-40页 |
·常用试剂 | 第22-26页 |
·PlantProm DB-TSSP分析 | 第26-27页 |
·TFSEARCH分析 | 第27页 |
·PLACE分析 | 第27页 |
·植物基因组DNA提取 | 第27-28页 |
·引物的设计与合成 | 第28页 |
·PCR反应体系与条件 | 第28-30页 |
·PCR产物序列测定 | 第30页 |
·JM109 感受态细胞的制备 | 第30页 |
·大肠杆菌细胞转化 | 第30-31页 |
·质粒小规模提取 | 第31页 |
·酶切 | 第31-32页 |
·连接 | 第32页 |
·插入片段测序 | 第32页 |
·水稻核蛋白提取 | 第32页 |
·SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第32-33页 |
·同位素探针标记 | 第33-35页 |
·EMSA | 第35-37页 |
·水稻愈伤组织的培养与继代 | 第37页 |
·农杆菌EHA105 感受态制备 | 第37页 |
·农杆菌转化 | 第37-38页 |
·农杆菌转化水稻愈伤组织 | 第38页 |
·转化后愈伤组织的抗性筛选 | 第38页 |
·转化后愈伤组织分化再生 | 第38页 |
·愈伤组织GUS染色 | 第38-40页 |
第3章 实验结果与分析 | 第40-55页 |
·pi-hit-1 基因启动子区域软件预测分析 | 第40-42页 |
·PlantProm DB-TSSP分析 | 第40页 |
·TFSEARCH分析 | 第40页 |
·PLACE分析 | 第40页 |
·预测结果 | 第40-42页 |
·EMSA实验 | 第42-47页 |
·核蛋白SDS-PAGE | 第42页 |
·水稻基因组DNA提取 | 第42-43页 |
·pi-hit-1 基因启动子区片段克隆 | 第43-44页 |
·EMSA电泳 | 第44-45页 |
·pi-hit-1 基因启动子区片段克隆 | 第45页 |
·EMSA电泳 | 第45-46页 |
·pi-hit-1 基因启动子区片段克隆 | 第46页 |
·EMSA电泳 | 第46-47页 |
·GUS报告基因检测启动子活性 | 第47-50页 |
·片段克隆 | 第47-48页 |
·测序 | 第48页 |
·载体pCAMBIA1381Z提取 | 第48页 |
·PCR验证 | 第48-49页 |
·酶切验证 | 第49-50页 |
·测序 | 第50页 |
·水稻愈伤组织的诱导与继代 | 第50页 |
·水稻愈伤组织转化及抗性愈伤组织的筛选 | 第50页 |
·水稻愈伤组织的GUS染色 | 第50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
·启动子区结构分析与预测 | 第50-52页 |
·pi-hit-1 基因启动子区结构分析 | 第52-53页 |
·GUS报告基因分析启动子活性与组织特异性 | 第53页 |
·本章小结 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
附录1 载体pCAMBIA1381Z | 第60-61页 |
附录2 测序结果 | 第61-65页 |
致谢 | 第65页 |