| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-29页 |
| ·研究现状 | 第12-26页 |
| ·HIV颗粒 | 第12-22页 |
| ·HIV-1基因组RNA | 第13-14页 |
| ·HIV-1的转录和编码蛋白 | 第14页 |
| ·HIV-1的LTR和15个蛋白质的功能 | 第14-21页 |
| ·HIV-1的复制周期 | 第21-22页 |
| ·HIV-1的高度变异性 | 第22页 |
| ·HIV-1的遗传型 | 第22-25页 |
| ·现有亚型 | 第22-23页 |
| ·M组 | 第23页 |
| ·HIV-1遗传型的地理分布 | 第23-24页 |
| ·遗传亚型和流行病学 | 第24-25页 |
| ·HIV-1遗传多样性与疫苗研发 | 第25-26页 |
| ·研究目的和意义 | 第26-29页 |
| 第2章 病毒的分离 | 第29-34页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·药品与试剂 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·外周血单核细胞(PBMCs)的分离与培养 | 第30-31页 |
| ·HIV-1阳性患者PBMCs与健康人PBMCs共培养 | 第31页 |
| ·逆转录酶活性测定法Reverse Transcriptase Assay,colorimetric~*(Roche) | 第31-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-34页 |
| ·结果 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第3章 病毒的细胞嗜性 | 第34-38页 |
| ·引言 | 第34-35页 |
| ·材料与方法 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·仪器与设备 | 第35页 |
| ·药品与试剂 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-36页 |
| ·受体转染细胞复苏培养 | 第35-36页 |
| ·病毒接种细胞观察细胞嗜性 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-38页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第4章 病毒全基因组克隆构建 | 第38-51页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-47页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·仪器与设备 | 第38-39页 |
| ·药品与试剂 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-47页 |
| ·健康人PBMCs分离培养 | 第39页 |
| ·病毒培养 | 第39页 |
| ·PBMCs基因组DNA提取 | 第39-40页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)分离HIV-1病毒基因组 | 第40-42页 |
| ·HIV-1病毒全基因组分子克隆构建 | 第42-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-51页 |
| ·HIV-1 B′基因组片段PCR扩增及克隆 | 第47-48页 |
| ·long-PCR扩增病毒基因组3′端近全长片段及克隆 | 第47-48页 |
| ·PCR扩增病毒基因组5′端1.8kb片段及克隆 | 第48页 |
| ·克隆限制性酶切和全基因组分子克隆 | 第48-50页 |
| ·克隆限制性内切酶酶切 | 第48-49页 |
| ·全基因组分子克隆 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 第5章 病毒基因组序列分析 | 第51-57页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-57页 |
| ·病毒基因组序列系统树分析 | 第51-52页 |
| ·病毒基因组序列重组检测分析 | 第52-54页 |
| ·病毒基因组序列耐药性分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第6章 病毒全基因组分子克隆感染活性 | 第57-61页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-59页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·仪器与设备 | 第57页 |
| ·药品与试剂 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-59页 |
| ·克隆转染293T细胞 | 第58页 |
| ·转染细胞培养液感染PBMCs | 第58-59页 |
| ·Western Blot | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-61页 |
| ·细胞培养液中p24蛋白/逆转录酶活性检测分析 | 第59-60页 |
| ·转染细胞中病毒蛋白检测分析 | 第60-61页 |
| 第7章 结论 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第61页 |
| ·创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
