| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一部分 蚯蚓纤溶酶EfP-Ⅰ基因的克隆表达及活性分析 | 第11-52页 |
| 第1章 序言 | 第11-21页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的应用价值 | 第11页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的组分及分类 | 第11-13页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的基本结构性质 | 第13页 |
| ·蚯蚓纤溶酶的基因工程研究 | 第13-15页 |
| ·论文背景、思路及技术路线 | 第15-21页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第21-32页 |
| ·主要实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·蚯蚓纤溶酶基因(Efp-Ⅰ)的制备 | 第22-23页 |
| ·EfP-Ⅰ基因片段的TA克隆 | 第23-25页 |
| ·EfP-Ⅰ基因片段的序列测定 | 第25页 |
| ·pMAL-c2X-Efp-Ⅰ与pBV221-Efp-Ⅰ表达载体的构建 | 第25-28页 |
| ·pMAL-c2X-Efp-Ⅰ在E.coli TB1中的诱导表达 | 第28-29页 |
| ·表达产物的纯化 | 第29-30页 |
| ·Western blotting | 第30页 |
| ·纤溶酶活性检测 | 第30-31页 |
| ·pBV221-Efp-Ⅰ在E.coli JM109中的诱导表达 | 第31-32页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第32-47页 |
| ·蚯蚓纤溶酶基因(Efp-Ⅰ)的制备 | 第32-33页 |
| ·EfP-Ⅰ基因片段的TA克隆 | 第33-35页 |
| ·测序分析及同源性比较 | 第35-37页 |
| ·pMAL-c2X-Efp-Ⅰ和pBV221-Efp-Ⅰ表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·pMAL-c2X-Efp-Ⅰ在E.coli TB1中的诱导表达和纯化 | 第40-43页 |
| ·Western blotting | 第43-44页 |
| ·纤溶酶活性分析 | 第44-45页 |
| ·pBV221-Efp-Ⅰ在E.coli JM109中的诱导表达 | 第45-47页 |
| 第4章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 第二部分 蚯蚓抗菌肽EAP-1基因的克隆与表达 | 第52-97页 |
| 第1章 序言 | 第52-70页 |
| ·抗菌肽概述 | 第52-53页 |
| ·抗菌肽的分类及抗菌肽数据库 | 第53-54页 |
| ·抗菌肽的作用特点 | 第54-56页 |
| ·抗菌肽的活性及其作用机理 | 第56-60页 |
| ·抗菌肽的基因工程研究 | 第60-63页 |
| ·抗菌肽的应用 | 第63-65页 |
| ·蚯蚓与蚯蚓抗菌肽 | 第65-66页 |
| ·论文背景、思路及技术路线 | 第66-70页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第70-83页 |
| ·主要实验材料 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-83页 |
| ·直隶环毛蚓抗菌肽基因(EAp-1)的制备 | 第71-72页 |
| ·EAp-1基因片段的TA克隆 | 第72-75页 |
| ·重组质粒测序分析 | 第75页 |
| ·pMAL-p2X-EAp-1和pKW32-EAp-1表达载体的构建 | 第75-78页 |
| ·pMAL-p2X-EAp-1诱导表达及产物纯化 | 第78-79页 |
| ·抗菌活性测定 | 第79-80页 |
| ·pKW32-EAp-1的诱导表达 | 第80-81页 |
| ·Lumbricin Ⅰ(6-34)的29肽抗菌活性的测定 | 第81页 |
| ·29肽基因的克隆表达 | 第81-83页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第83-96页 |
| ·蚯蚓抗菌肽基因(EAp-1)的制备 | 第83-84页 |
| ·EAp-1基因片段的TA克隆 | 第84-85页 |
| ·重组质粒的测序分析 | 第85-86页 |
| ·pMAL-p2X-EAp-1和pKW32-EAp-1表达载体的构建 | 第86-90页 |
| ·pMAL-p2X-EAp-1的诱导表达和产物纯化 | 第90-91页 |
| ·抗菌活性检测 | 第91页 |
| ·pKW32-EAp-1的诱导表达 | 第91-92页 |
| ·Lumbricin Ⅰ(6-34)的29肽的抗菌活性检测 | 第92-95页 |
| ·29肽基因的克隆表达 | 第95-96页 |
| 第4章 结论 | 第96-97页 |
| 附录 | 第97-101页 |
| 参考文献 | 第101-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第108页 |
